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    一种人脐带间充质干细胞的培养方法
    1.
    发明公开
    一种人脐带间充质干细胞的培养方法 无效

    公开(公告)号：CN107189982A

    公开(公告)日：2017-09-22

    申请号：CN201710437614.X

    申请日：2017-06-12

    申请人： 北京焕生汇生物技术研究院

    发明人： 姚玲玲 ,  孟得龙 ,  杨敏 ,  杨苗 ,  宋丹 ,  刘得娟

    IPC分类号： C12N5/0775

    CPC分类号： C12N5/0668 ,  C12N2501/91 ,  C12N2509/00

    摘要： 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞的培养方法，其包括以下步骤：(1)获取脐带组织；(2)分离华通氏胶；(3)将华通氏胶切割成组织块，将组织块接种至T75培养瓶中，加入适量原代培养基置于CO2培养箱中培养，前3天静置培养，第4天补加原代培养基5ml，之后每2天‑3天换一次液，在大部分组织块都有细胞爬出时去掉组织块，换液，在细胞密度达到80％或以上时进行传代扩增；(4)处理后，用传代培养基重悬，传代。本发明的有益之处在于：(1)在培养过程中，不使用动物来源的添加物，更加安全；(2)操作简单方便，培养时间短。

    一种新型的离体组织保存液
    3.
    发明公开
    一种新型的离体组织保存液 无效

    公开(公告)号：CN106417257A

    公开(公告)日：2017-02-22

    申请号：CN201610894382.6

    申请日：2016-10-13

    申请人： 北京焕生汇生物技术研究院

    发明人： 姚玲玲 ,  杨敏 ,  孟得龙 ,  杨苗

    IPC分类号： A01N1/02

    CPC分类号： A01N1/021

    摘要： 本发明公开了一种新型的离体组织保存试剂，各组成成分及用量分别为：渗透压调节剂15-500g、pH值缓冲对1-100g、氯化钾1-150g、氯化钠1-50g、抗生素1-300mg、重组人血白蛋白100-500g、DMEM培养基补足1000ml。本发明的有益之处在于：(1)不含动物成分，使用安全可靠；(2)成分完全明确，便于质量控制；(3)即用型，操作更加方便；(4)可室温保存，储存极为方便。

    一种新型的细胞冻存试剂
    4.
    发明公开
    一种新型的细胞冻存试剂 无效

    公开(公告)号：CN106417252A

    公开(公告)日：2017-02-22

    申请号：CN201610851438.X

    申请日：2016-09-26

    申请人： 北京焕生汇生物技术研究院

    发明人： 姚玲玲 ,  杨敏 ,  孟得龙 ,  杨苗

    IPC分类号： A01N1/02

    CPC分类号： A01N1/0221

    摘要： 本发明公开了一种新型的细胞冻存试剂，各组成成分及用量分别为：重组人表皮生长因子100ng、重组人碱性成纤维细胞生长因子500ng、重组人肝细胞生长因子300ng、DMSO0.5ml、重组人血白蛋白2ml、DMEM培养基8ml。本发明的有益之处在于：(1)不含动物成分，使用安全可靠；(2)成分完全明确，便于质量控制；(3)即用型，细胞计数后，即可直接使用本试剂进行细胞重悬，操作更加方便，无需额外配制；(4)适用的细胞类型不限；(5)可以维持细胞在-196℃液氮环境下长期安全保存。

    一种DC细胞诱导试剂盒及DC细胞诱导培养方法
    5.
    发明公开
    一种DC细胞诱导试剂盒及DC细胞诱导培养方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN107043750A

    公开(公告)日：2017-08-15

    申请号：CN201710442869.5

    申请日：2017-06-13

    申请人： 北京焕生汇生物技术研究院

    发明人： 姚玲玲 ,  杨敏 ,  孟得龙 ,  杨苗 ,  宋丹 ,  刘得娟

    IPC分类号： C12N5/0784

    CPC分类号： C12N5/0639 ,  C12N2500/84 ,  C12N2501/22 ,  C12N2501/2304 ,  C12N2501/25

    摘要： 本发明公开了一种DC细胞诱导试剂盒及DC细胞诱导培养方法，其中，试剂盒包含：试剂A、试剂B、试剂C和试剂D，试剂A是浓度为20ng/ml的GM‑CSF溶液，试剂B是浓度为10ng/ml的IL‑4溶液，试剂C是浓度为500IU/ml的TNF‑a溶液，试剂D为淋巴细胞分离液；诱导培养DC细胞的方法主要包括以下步骤：用试剂D以密度梯度离心法分离并收获PBMC，将PBMC接种于1640培养基中，加入试剂A和试剂B，CO2培养箱中孵育，第2天、第4天补加试剂A和试剂B，第6天补加试剂A、试剂B和试剂C，第8天收集细胞。本发明的有益之处在于：本发明的DC细胞诱导试剂盒及DC细胞诱导培养方法能够提高DC细胞的增殖速度和活性、增强DC细胞抑瘤和杀瘤作用。

    一种人类诱导性多能干细胞专用的复苏试剂及复苏方法
    6.
    发明公开
    一种人类诱导性多能干细胞专用的复苏试剂及复苏方法 有权 转让

    公开(公告)号：CN107034195A

    公开(公告)日：2017-08-11

    申请号：CN201710354122.4

    申请日：2017-05-18

    申请人： 北京焕生汇生物技术研究院

    发明人： 姚玲玲 ,  杨敏 ,  孟得龙 ,  杨苗

    IPC分类号： C12N5/10

    摘要： 本发明公开了一种人类诱导性多能干细胞专用的复苏试剂及复苏方法，其中，复苏试剂不含有动物成分，具体由以下成分组成：重组人表皮生长因子100ng‑300ng、重组人血白蛋白1000ng‑2000ng、b‑巯基乙醇0.1ml‑0.25ml、DMEM‑F12培养基补足10.0ml。本发明的有益之处在于：(1)可保证人类诱导性多能干细胞具有较高的成活率(复苏率)和较好的活性，并且保证细胞仍然保持很好的多功能性；(2)不含有动物成分，成分完全明确、可控，使用起来安全性较高；(3)复苏方法操作方便，容易实施，可广泛推广使用。

    一种细胞冻存液
    8.
    发明公开
    一种细胞冻存液 无效

    公开(公告)号：CN106489913A

    公开(公告)日：2017-03-15

    申请号：CN201610907443.8

    申请日：2016-10-18

    申请人： 北京焕生汇生物技术研究院

    发明人： 姚玲玲 ,  杨敏 ,  孟得龙 ,  杨苗

    IPC分类号： A01N1/02

    CPC分类号： A01N1/0221

    摘要： 本发明公开了一种细胞冻存液，以质量百分比计，各组成成分及用量分别为：人血白蛋白5-9％、二甲基亚砜8-9％、右旋糖酐40 1-3％、基础培养基82-84％。本发明的有益之处在于：(1)冻存液中含有二甲基亚砜和右旋糖酐40，其中，前者是有效的渗透保护剂，后者可以平衡细胞渗透压，降低细胞冰点，有效减少结晶对细胞的伤害；细胞的复苏率；(3)冻存液中不含非人源的血清和蛋白质，避免了细胞污染和过敏的风险，提高了临床安全性，可在临床上安全使用；(4)适用范围广，可用于外周血单核细胞、脐带血干细胞、骨髓血干细胞、脂肪干细胞等多种人源细胞的冻存；(5)可现配现用，也可低温或室温保存三个月。(2)冻存液中含有人血白蛋白，可大大提高冻存

    一种NK细胞体外扩增方法
    9.
    发明授权
    一种NK细胞体外扩增方法 有权 转让

    公开(公告)号：CN106967682B

    公开(公告)日：2020-08-07

    申请号：CN201710375838.2

    申请日：2017-05-25

    申请人： 北京焕生汇生物技术研究院

    发明人： 姚玲玲 ,  杨苗 ,  杨敏 ,  孟得龙 ,  宋丹 ,  刘得娟

    IPC分类号： C12N5/0783

    摘要： 本发明公开了一种NK细胞体外扩增方法，包括：(1)配制主要成分为50ng/ml抗CD3单克隆抗体+50ng/ml抗CD16单克隆抗体的试剂A、主要成分为300IU/ml IL‑2的试剂B和主要成分为20ng/ml IL‑12+20ng/ml IL‑15的试剂C，准备淋巴细胞分离液40ml作为试剂D；(2)取试剂A于T‑175培养瓶包被，4℃过夜；(3)处理外周血，得到细胞和血清；(4)重悬细胞，添加试剂D后离心收集PBMC；(5)将PBMC重悬于X‑VIVO15培养基中，添加试剂B、试剂C和自体血清，孵育；(6)分别在第3、6、9、12天补加培养基、试剂B、试剂C和自体血清，第14天收集细胞。本发明的有益之处在于：通过提前接种抗CD3单克隆抗体和抗CD16单克隆抗体，先对细胞进行筛选，所以在体外培养时提高了NK细胞的扩增倍数和纯度。

    一种细胞复苏试剂
    10.
    发明授权
    一种细胞复苏试剂 有权 转让

    公开(公告)号：CN106635952B

    公开(公告)日：2019-04-19

    申请号：CN201610851439.4

    申请日：2016-09-26

    申请人： 北京焕生汇生物技术研究院

    发明人： 姚玲玲 ,  杨敏 ,  孟得龙 ,  杨苗

    IPC分类号： C12N5/07

    摘要： 本发明公开了一种细胞复苏试剂，各组成成分及用量分别为：重组人表皮生长因子100ng、重组人碱性成纤维细胞生长因子200ng、维生素D3000ng、重组人血白蛋白2ml、RPMI‑1640培养基8ml。本发明的有益之处在于：(1)不含动物成分，使用安全可靠；(2)成分完全明确，便于质量控制；(3)即用型，操作更加方便；(4)适用的细胞类型不限；(5)可以在细胞复苏时获得更好的细胞活性和复苏率。