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公开(公告)号:CN109652380A
公开(公告)日:2019-04-19
申请号:CN201910075913.2
申请日:2019-01-25
申请人: 苏州茂行生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/85 , A61K35/17 , A61P35/00
CPC分类号: C07K14/70521 , A61K35/17 , A61P35/00 , C07K14/7051 , C07K16/2896 , C07K2317/622 , C07K2319/33 , C12N5/0636 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N2310/10 , C12N2501/515 , C12N2510/00 , C12N2800/22
摘要: 本发明属于免疫治疗领域,公开了一种PD-1基因敲除且靶向Lewis Y的CAR-T细胞,并公开了通过BE-Plus系统进行基因敲除的同时将表达LewisY-CAR的质粒载体导入T细胞的制备方法,以及该CAR-T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明公开的PD-1基因敲除且靶向Lewis Y的CAR-T细胞可以解除PD-1/PD-L1的抑制通路,有助于改良靶向LewisY的CAR-T细胞的功效,且制备工艺简单,在肿瘤的细胞治疗中拥有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN109535241A
公开(公告)日:2019-03-29
申请号:CN201811549161.0
申请日:2018-12-18
申请人: 北昊干细胞与再生医学研究院有限公司 , 冠昊生物科技股份有限公司
IPC分类号: C07K14/47 , C12N5/0783 , C12N5/0784 , A61K35/17 , A61P35/00
CPC分类号: C07K14/4748 , A61K35/17 , A61P35/00 , C12N5/0638 , C12N2501/02 , C12N2501/22 , C12N2501/2301 , C12N2501/2302 , C12N2501/2304 , C12N2501/24 , C12N2501/25 , C12N2501/51 , C12N2501/515 , C12N2502/1121
摘要: 本发明公开了一种DC-CIK共培养细胞及其制备方法、致敏抗原和应用。该DC-CIK共培养细胞通过将分离的单个核细胞分别诱导培养成DC细胞和CIK细胞,其中DC细胞在培养过程中添加自行构建的经过验证在多种肿瘤细胞中都广泛表达的多肽致敏抗原来进行诱导刺激,可以提高对肿瘤杀伤效果。通过该方法培养得到的DC-CIK共培养细胞可以对多种肿瘤细胞均有非常好的杀伤效果,而且培养的DC-CIK细胞活性高,扩增能力强,释放的IFN-γ等细胞因子多,杀伤力强。该共培养细胞可以广泛用于多种癌症的治疗,包括肾癌、前列腺癌、乳腺癌、膀胱癌、黑色素瘤、结肠癌、卵巢癌、骨癌、肺癌、神经母细胞瘤等,适应面广泛。
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公开(公告)号:CN109486761A
公开(公告)日:2019-03-19
申请号:CN201910045777.2
申请日:2019-01-17
申请人: 汇麟生物科技(北京)有限公司
发明人: 施琳
IPC分类号: C12N5/0783
CPC分类号: C12N5/0638 , C12N2501/2301 , C12N2501/2302 , C12N2501/2307 , C12N2501/24 , C12N2501/51 , C12N2501/515 , C12N2533/50
摘要: 本发明涉及一种外周血CTL细胞的培养方法。该方法包括:1)将由外周血分离得到的PBMC接种于包被有CD3抗体及CD28抗体的培养容器中进行培养;培养体系中的细胞因子为IFN-γ900U/mL~1100U/mL;2)向培养体系中加入IL-1α和IL-2,终浓度均为900U/mL~1100U/mL;培养体系中还加入有IL-7,终浓度为4~6ng/mL;3)换液,新的培养体系中的细胞因子为IL-2 900U/mL~1100U/mL,IL-7,2~3ng/mL,基础培养基为含4%~6%自体血浆的VIVO培养基。该方法CTL扩增效果好,且活化的CTL占比更高、T-reg细胞占比更低。
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公开(公告)号:CN109022363A
公开(公告)日:2018-12-18
申请号:CN201810926459.2
申请日:2018-08-15
申请人: 马晓冬
CPC分类号: C07K16/2896 , A61K35/17 , A61P35/00 , C07K14/7051 , C07K2319/33 , C12N15/63 , C12N2501/2302 , C12N2501/24 , C12N2501/515 , C12N2510/00
摘要: 本发明涉及CD‑133‑CAR‑T系统构建技术,特别是涉及一种基于PiggyBac载体的CD‑133‑CAR‑T系统构建方法,其是通过设计合成CD‑133‑CAR基因片段,然后将CD‑133‑CAR基因片段连接到Piggybac载体上得到Piggybac‑CAR‑CD‑133,再将Piggybac‑CAR‑CD‑133转入大肠杆菌中进行扩增,然后从大肠杆菌中提取质粒,并加入到人血清中分离的淋巴细胞中进行扩展培养,采用Nucleofector细胞转染系统转染共转染质粒Piggybac‑CAR‑CD‑133和Piggybac Transposase到T淋巴细胞,得到带有CD‑133‑CAR基因片段的T淋巴细胞。本发明采用非病毒类载体PiggyBac系统,避免了使用病毒载体存在的安全隐患,具有更高的安全性和有效性,更加适用于临床治疗;采用的Nucleofector细胞核技术,能够将外源基因直接导入到细胞核,克服了脂质体转染和普通电穿孔,必须依赖细胞分裂时才有可能使外源基因入核表达的缺陷,细胞具有更高的存活率和增殖效率。
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公开(公告)号:CN108753718A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810639633.5
申请日:2018-06-20
申请人: 淮安诺康生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/0783
CPC分类号: C12N5/0636 , C12N2500/30 , C12N2501/51 , C12N2501/515
摘要: 本发明公开了肿瘤浸润淋巴细胞TIL的体外扩增方法,步骤为:步骤S1、TIL细胞分离:取癌旁组织剪碎浸入胶原酶溶液消化,过滤,PBS冲洗,收集滤液,离心,弃上清,加入PBS制成细胞悬液,用淋巴细胞分离液作不连续密度梯度离心,离心结束后收取下层界面的淋巴细胞,经PBS清洗后,按1×106/mL的浓度悬浮于含10%人AB型血清和IL‑2的培养基内培养,每3~5d换液一次;步骤S2、培养和扩增:当孔里的淋巴细胞生长至1×107时,将其转入含抗CD3单抗、抗CD28单抗和药物的培养瓶内孵育,24h后加入IL‑2连续培养,每隔2~3d半量更换含同等浓度IL‑2的新鲜培养基培养22~25d。
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公开(公告)号:CN108707580A
公开(公告)日:2018-10-26
申请号:CN201810639632.0
申请日:2018-06-20
申请人: 淮安诺康生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/0783
CPC分类号: C12N5/0636 , C12N2501/2302 , C12N2501/51 , C12N2501/515 , C12N2501/999
摘要: 本发明公开了一种肿瘤浸润淋巴细胞TIL的体外扩增方法,步骤为:步骤S1、TIL细胞分离:取癌旁组织剪碎浸入胶原酶溶液消化,过滤,PBS冲洗,收集滤液,离心,弃上清,加入PBS制成细胞悬液,用淋巴细胞分离液作不连续密度梯度离心,离心结束后收取下层界面的淋巴细胞,经PBS清洗后,按1×106/mL的浓度悬浮于含10%人AB型血清和IL‑2的培养基内培养,每3~5d换液一次;步骤S2、培养和扩增:当孔里的淋巴细胞生长至1×107时,将其转入含抗CD3单抗、抗CD28单抗和药物的培养瓶内孵育,24h后加入IL‑2连续培养,每隔2~3d半量更换含同等浓度IL‑2的新鲜培养基培养22~25d。
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公开(公告)号:CN108474791A
公开(公告)日:2018-08-31
申请号:CN201680075273.X
申请日:2016-10-20
申请人: 朱诺治疗学有限公司
IPC分类号: G01N33/569 , C12N5/0775 , C12N5/00
CPC分类号: C12N5/0636 , C12N2501/51 , C12N2501/515 , C12N2501/599 , C12N2501/998
摘要: 本文提供了培养细胞的方法,包括刺激或扩增(增殖)细胞组合物中的多个细胞,例如淋巴细胞群。在一些方面中,提供了用于培养细胞(例如用于刺激或扩增(增殖)细胞群)的方法和反应剂,涉及使作用剂结合细胞表面上的分子,从而向细胞提供一种或多种信号。在一些情况下,反应剂是多聚化反应剂,一个或多个作用剂通过与反应剂的可逆结合而多聚化。在一些方面,多聚化的作用剂能用于细胞群的扩增或增殖或其他刺激,随后此类刺激剂可通过可逆键的破坏被移除。还提供了其使用方法、组合物和设备。
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公开(公告)号:CN108474002A
公开(公告)日:2018-08-31
申请号:CN201680075275.9
申请日:2016-10-20
申请人: 朱诺治疗学有限公司
IPC分类号: C12N15/86
CPC分类号: C12N15/86 , A61K48/00 , A61K2039/625 , C12N5/0634 , C12N2500/32 , C12N2501/515 , C12N2740/10043 , C12N2740/13043
摘要: 本文提供在含有病毒颗粒的细胞组合物(例如淋巴细胞群)中转导多个细胞的方法。某些方面,本文转导细胞群的方法和反应剂涉及将作用剂与细胞表面分子结合。某些情形中,反应剂是多聚化的,一种或多种作用剂能够通过与可作用剂可逆结合而多聚化。某些方面,多聚反应剂能用于对细胞群的转导和/或扩增或增殖或其他刺激,随后此类反应剂可通过可逆连键的破坏被去除。还提供了其使用方法、组合物和设备。
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公开(公告)号:CN108245673A
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201810168834.1
申请日:2011-08-22
申请人: 免疫创新治疗有限公司
发明人: 迈克尔·哈-诺伊
CPC分类号: C12N5/0636 , A61K35/17 , A61K2039/5158 , A61K2039/57 , C12N5/0638 , C12N2501/51 , C12N2501/515
摘要: 已经产生具有Th1特性和溶细胞活性的新细胞类型。这些Th1/杀伤细胞为CD4+细胞,CD4+细胞从外周血纯化且被操作以具有Th1特性,例如类似于细胞毒性T‑细胞(CTL)的、结合溶细胞活性的产生IFN‑γ的。CTL活性以病变细胞为目标,而不以正常细胞为目标。Th1/杀伤细胞的溶细胞活性通过粒酶B‑穿孔素机制介导且导致病变细胞的凋亡性死亡。生产和使用这些Th1/杀伤细胞的方法包括从外周血分离出CD4+细胞,激活CD4+T‑细胞以形成Th1/杀伤细胞,以及向患者给药具有溶细胞活性的Th1/杀伤细胞,其中Th1/杀伤细胞对于该患者是同种异体的。
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公开(公告)号:CN108138148A
公开(公告)日:2018-06-08
申请号:CN201680057371.0
申请日:2016-10-08
申请人: 上海斯丹赛生物技术有限公司
CPC分类号: C12N5/0636 , A61K35/17 , C12N2501/515 , C12N2501/599 , C12N2510/00
摘要: 本公开涉及用于选择性地激活和/或扩增用于治疗的T细胞群的组合物、方法和系统。例如,该方法可以包括使T细胞群与能够结合在T细胞群表面上表达的嵌合抗原受体(CAR)的胞外结构域的试剂接触。
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