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公开(公告)号:CN116656742A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310772680.8
申请日:2023-06-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/866 , C12N15/45 , C07K14/115 , A61K39/155 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种牛副流感病毒3A型(BPIV‑3A)病毒样颗粒制备方法,属于动物传染病防治技术领域,此方法是以BPIV‑3A的cDNA为模板,设计引物PCR扩增出M,HN核酸片段,通过同源重组将目的片段连接到pFastBac Dual质粒,经过杆状病毒昆虫细胞表达系统,分别成功表达了M和HN蛋白。本发明制备的病毒样颗粒在免疫动物后能提高动物体内的抗体滴度,并且能够有效预防BPIV‑3A的感染,在BPIV‑3A免疫防制领域具有应用前景。
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公开(公告)号:CN112301041B
公开(公告)日:2022-05-24
申请号:CN202011073306.1
申请日:2020-10-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/31 , C12N15/10 , C07K14/30 , C07K16/12 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了牛支原体Mbov_0461基因及其编码的蛋白,属于动物传染病防治与生物技术领域。申请人以牛支原体(M.bovis)HB0801株为模板,设计引物,克隆和表达了Mbov_0461基因编码的蛋白P21,验证其具有免疫原性和反应原性,此外,该蛋白还可黏附胚胎牛肺上皮细胞(EBL)以及与纤连蛋白(Fn)结合,确定该蛋白是一种黏附蛋白,并且抗重组蛋白P21(rP21)的多克隆抗体能明显抑制M.bovis黏附EBL细胞,黏附功能与细菌毒力相关,因此M.bovis P21蛋白也是一种毒力相关蛋白。鉴于以上特性,P21蛋白有望成为M.bovis疫苗、诊断和治疗制剂研发的重要候选靶标。
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公开(公告)号:CN111635880B
公开(公告)日:2021-12-07
申请号:CN202010372788.4
申请日:2020-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体VspX基因突变株,命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T8.101,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20191038,所述VspX基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还公开了该突变株的构建方法及其在牛支原体致病机制和免疫防控领域中的应用。该突变株不表达突变基因编码的蛋白,生长曲线、菌落形态和大小与野生菌株无明显差异。但对牛肺上皮细胞系和纤连蛋白的结合能力却显著下降,有作为毒力致弱菌株在牛支原体致病机制研究和防制药物研发领域应用的潜力。
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公开(公告)号:CN110257405A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910541509.X
申请日:2019-06-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体乙醇脱氢酶基因,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,本发明还公开了一种牛支原体乙醇脱氢酶基因编码的蛋白,具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,属于动物传染病防治与生物技术领域。本发明的重组蛋白具有乙醇脱氢酶活性,能够黏附牛肺上皮细胞系细胞(EBL),能与牛纤连蛋白(Fn)结合,同时还具有良好的免疫原性和反应原性,是牛支原体的一种毒力相关蛋白,在牛支原体致病机制研究、疫苗和诊断试剂研发中具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN110257405B
公开(公告)日:2020-10-27
申请号:CN201910541509.X
申请日:2019-06-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体乙醇脱氢酶基因,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,本发明还公开了一种牛支原体乙醇脱氢酶基因编码的蛋白,具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,属于动物传染病防治与生物技术领域。本发明的重组蛋白具有乙醇脱氢酶活性,能够黏附牛肺上皮细胞系细胞(EBL),能与牛纤连蛋白(Fn)结合,同时还具有良好的免疫原性和反应原性,是牛支原体的一种毒力相关蛋白,在牛支原体致病机制研究、疫苗和诊断试剂研发中具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111635880A
公开(公告)日:2020-09-08
申请号:CN202010372788.4
申请日:2020-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体VspX基因突变株,命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T8.101,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20191038,所述VspX基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还公开了该突变株的构建方法及其在牛支原体致病机制和免疫防控领域中的应用。该突变株不表达突变基因编码的蛋白,生长曲线、菌落形态和大小与野生菌株无明显差异。但对牛肺上皮细胞系和纤连蛋白的结合能力却显著下降,有作为毒力致弱菌株在牛支原体致病机制研究和防制药物研发领域应用的潜力。
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公开(公告)号:CN118846030A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202410849354.7
申请日:2024-06-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/39 , A61P31/14 , C12N15/866 , C12N15/45 , C07K14/135 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种由牛副流感病毒3A与3C型(BPIV‑3A,BPIV‑3C)病毒样颗粒组成的二价疫苗,属于兽用疫苗领域。BPIV‑3A和BPIV‑3C是在我国流行的主要基因型,现有的疫苗对其缺乏交叉保护力,本发明利用杆状病毒昆虫细胞表达系统对BPIV‑3中的M和HN蛋白进行自组装,成功构建了BPIV‑3A型和BPIV‑3C型病毒样颗粒并制成二价疫苗,它不仅可以有效控制我国的BPIV‑3流行,同时还提高了疫苗的免疫保护效力,能更加高效地激发动物的体液免疫和细胞免疫反应,降低动物体内组织的病毒载量。
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公开(公告)号:CN112301041A
公开(公告)日:2021-02-02
申请号:CN202011073306.1
申请日:2020-10-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/31 , C12N15/10 , C07K14/30 , C07K16/12 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了牛支原体Mbov_0461基因及其编码的蛋白,属于动物传染病防治与生物技术领域。申请人以牛支原体(M.bovis)HB0801株为模板,设计引物,克隆和表达了Mbov_0461基因编码的蛋白P21,验证其具有免疫原性和反应原性,此外,该蛋白还可黏附胚胎牛肺上皮细胞(EBL)以及与纤连蛋白(Fn)结合,确定该蛋白是一种黏附蛋白,并且抗重组蛋白P21(rP21)的多克隆抗体能明显抑制M.bovis黏附EBL细胞,黏附功能与细菌毒力相关,因此M.bovis P21蛋白也是一种毒力相关蛋白。鉴于以上特性,P21蛋白有望成为M.bovis疫苗、诊断和治疗制剂研发的重要候选靶标。
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