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公开(公告)号：CN115927763B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202211741366.5
申请日：2022-12-31
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6851 , C12R1/93
摘要： 本发明属于动物病毒学分子技术领域，具体涉及同时检测A、B、C和H型猪轮状病毒核酸的引物探针组合、试剂盒及应用。本发明针对猪轮状病毒核酸血清型的多样性，设计了针对不同血清型的探针组合物如A型，B型，C型和H型基因的探针引物。各探针标记了荧光基团且荧光基团彼此互不相同且互不干扰，组合物以混合的形式存在。其中：A型探针PoRVA‑P的5’端用FAM修饰；3’端用MGB修饰；B型探针PoRVB‑P的5’端用ROX修饰，3’端用MGB修饰；C型探针PoRVC‑P的5’端用HEX修饰，3’端用BHQ1修饰；H型探针PoRVH‑P的5’端用CY5修饰，3’端用BHQ3修饰。本发明灵敏度高、特异性强、操作简单方便。
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公开(公告)号：CN104597255A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510059481.8
申请日：2015-02-04
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/531
CPC分类号： G01N33/56983 , G01N33/577
摘要： 本发明公开了一种检测猪血清中伪狂犬病病毒gE蛋白抗体的试纸卡及其制备方法和应用，试纸卡是由免疫胶体金试纸条和卡体组成。免疫胶体金试纸条是将硝酸纤维素膜粘贴在纸条底板上，在硝酸纤维膜的一端粘贴有金标结合垫和样品垫，硝酸纤维素膜的另一端粘贴有吸水垫；硝酸纤维膜上设有包被有猪伪狂犬病病毒鄂A株的检测线和包被有羊抗鼠IgG质控线，检测线与质控线相互平行，检测线靠近金标结合垫一端，质控线靠近吸水垫一端。免疫胶体金试纸条放置于试纸卡的卡体中，检测线和质控线设置在其检测窗孔所对应的位置。该试纸卡用于猪血清中伪狂犬病病毒gE蛋白抗体的快速检测，其结构简单，操作方便，灵敏度高、结果清晰。
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公开(公告)号：CN103421728A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210205663.8
申请日：2012-06-20
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N1/21 , A61K39/116 , A61K39/102 , A61K39/10 , A61P31/04 , C12R1/01
摘要： 本发明属于动物细菌学和基因工程疫苗制备技术领域，具体涉及一种不含抗性标记的表达猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段的重组支气管败血波氏杆菌菌株、含有该重组菌的疫苗，其制备方法与应用。本发明得到一株不含抗性标记的表达猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段重组支气管败血波氏杆菌QH0814ΔaroA/toxA-N，该菌株缺失了支气管败血波氏杆菌的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶aroA基因，该菌株含有猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段。本发明还公开了该重组菌的制备方法及疫苗的应用。本发明的基因工程疫苗可以刺激猪产生抵抗猪产毒多杀性巴氏杆菌和猪源支气管败血波氏杆菌野毒株的保护性免疫反应，能有效防止猪产毒多杀性巴氏杆菌和猪源支气管败血波氏杆菌的双重感染。
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公开(公告)号：CN102199571A
公开(公告)日：2011-09-28
申请号：CN201110085153.7
申请日：2011-04-06
申请人： 华中农业大学 , 武汉科前动物生物制品有限责任公司
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/34 , A61K39/295 , A61P31/20 , A61P31/04 , C12R1/01 , A61K39/02 , A61K39/12
摘要： 一种不含抗性标记的表达猪2型圆环病毒ORF2基因片段的重组支气管败血波氏杆菌株的构建、疫苗的制备与应用，属基因工程领域。得到一株不含抗性标记的表达猪2型圆环病毒ORF2基因片段的重组支气管败血波氏杆菌株QH0814ΔaroA/ORF2。该菌株缺失了支气管败血波氏杆菌的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶(aroA)基因，含有猪2型圆环病毒ORF2基因片段。公开了该重组株及疫苗的制备以及在制备猪2型圆环病毒和猪源支气管败血波氏杆菌疫苗中的应用。本发明的基因工程疫苗可以刺激猪产生抵抗猪2型圆环病毒和猪源支气管败血波氏杆菌野毒株的保护性免疫反应，能有效防止猪2型圆环病毒和猪源支气管败血波氏杆菌的感染。
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公开(公告)号：CN101012446A
公开(公告)日：2007-08-08
申请号：CN200710063651.5
申请日：2007-02-07
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/543 , C12R1/19
摘要： 本发明属于动物细菌学与动物传染病学检测技术领域，具体涉及一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及其在防治猪进行性萎缩性鼻炎(progressive atrophic rhinitis，PAR)中的应用。该试剂盒包括盒体、盒体内包被有以纯化的表达毒素toxA基因C’端rPMT－C蛋白作为抗原的酶标板、阴、阳性标准血清、兔抗猪IgG酶标二抗、样品稀释液、底物显色A液、底物显色B液、终止液和洗涤液。还公开了一种表达猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素toxA基因C’端rPMT－C蛋白的重组大肠菌BL21/pET28b－C2115(保藏号为CCTCC NO：M207012)的制备和rPMT－C蛋白的表达与纯化方法。本发明的试剂盒具有操作简便，诊断快速、准确，费用低等优点，适合于临床大规模对T+Pm进行血清学调查，可为PAR在猪群中的净化提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN103421728B
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201210205663.8
申请日：2012-06-20
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N1/21 , A61K39/116 , A61K39/102 , A61K39/10 , A61P31/04 , C12R1/01
摘要： 本发明属于动物细菌学和基因工程疫苗制备技术领域，具体涉及一种不含抗性标记的表达猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段的重组支气管败血波氏杆菌菌株、含有该重组菌的疫苗，其制备方法与应用。本发明得到一株不含抗性标记的表达猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段重组支气管败血波氏杆菌QH0814ΔaroA/toxA-N，该菌株缺失了支气管败血波氏杆菌的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶aroA基因，该菌株含有猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段。本发明还公开了该重组菌的制备方法及疫苗的应用。本发明的基因工程疫苗可以刺激猪产生抵抗猪产毒多杀性巴氏杆菌和猪源支气管败血波氏杆菌野毒株的保护性免疫反应，能有效防止猪产毒多杀性巴氏杆菌和猪源支气管败血波氏杆菌的双重感染。
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公开(公告)号：CN101575586A
公开(公告)日：2009-11-11
申请号：CN200910062245.6
申请日：2009-05-31
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明属于动物基因工程疫苗制备技术领域。具体涉及一种支气管败血波氏杆菌aroA(5－烯醇丙酮酰莽草酸－3－磷酸合成酶)基因缺失菌株的构建，基因缺失疫苗的制备与应用。所述支气管败血波氏杆菌支气管败血波氏杆基因缺失菌株(Bordetella bronchiseptica)QH0814ΔaroA，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCCNO：M208018，该菌株的缺失了5－烯醇丙酮酰莽草酸－3－磷酸合成酶(aroA)基因全长1340bp，导致该菌株对芳香族氨基酸的代谢出现障碍。本发明利用该基因缺失菌株制备了支气管败血波氏杆菌基因缺失疫苗。本发明还公开了所述基因缺失菌株在制备支气管败血波氏杆菌基因缺失疫苗(弱毒活疫苗)的应用。
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公开(公告)号：CN100523173C
公开(公告)日：2009-08-05
申请号：CN200710063651.5
申请日：2007-02-07
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/543 , C12R1/19
摘要： 本发明属于动物细菌学与动物传染病学检测技术领域，具体涉及一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及其在防治猪进行性萎缩性鼻炎(progressive atrophic rhinitis，PAR)中的应用。该试剂盒包括盒体、盒体内包被有以纯化的表达毒素toxA基因C’端rPMT-C蛋白作为抗原的酶标板、阴、阳性标准血清、兔抗猪IgG酶标二抗、样品稀释液、底物显色A液、底物显色B液、终止液和洗涤液。还公开了一种表达猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素toxA基因C’端rPMT-C蛋白的重组大肠菌BL21/pET28b-C2115(保藏号为CCTCC NO：M207012)的制备和rPMT-C蛋白的表达与纯化方法。本发明的试剂盒具有操作简便，诊断快速、准确，费用低等优点，适合于临床大规模对T+Pm进行血清学调查，可为PAR在猪群中的净化提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN115927763A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211741366.5
申请日：2022-12-31
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6851 , C12R1/93
摘要： 本发明属于动物病毒学分子技术领域，具体涉及同时检测A、B、C和H型猪轮状病毒核酸的引物探针组合、试剂盒及应用。本发明针对猪轮状病毒核酸血清型的多样性，设计了针对不同血清型的探针组合物如A型，B型，C型和H型基因的探针引物。各探针标记了荧光基团且荧光基团彼此互不相同且互不干扰，组合物以混合的形式存在。其中：A型探针PoRVA‑P的5’端用FAM修饰；3’端用BHQ1修饰；B型探针PoRVB‑P的5’端用ROX修饰，3’端用MGB修饰；C型探针PoRVC‑P的5’端用HEX修饰，3’端用BHQ1修饰；H型探针PoRVH‑P的5’端用CY5修饰，3’端用BHQ3修饰。本发明灵敏度高、特异性强、操作简单方便。
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公开(公告)号：CN104597255B
公开(公告)日：2017-07-21
申请号：CN201510059481.8
申请日：2015-02-04
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/531
摘要： 本发明公开了一种检测猪血清中伪狂犬病病毒gE蛋白抗体的试纸卡及其制备方法和应用，试纸卡是由免疫胶体金试纸条和卡体组成。免疫胶体金试纸条是将硝酸纤维素膜粘贴在纸条底板上，在硝酸纤维膜的一端粘贴有金标结合垫和样品垫，硝酸纤维素膜的另一端粘贴有吸水垫；硝酸纤维膜上设有包被有猪伪狂犬病病毒鄂A株的检测线和包被有羊抗鼠IgG质控线，检测线与质控线相互平行，检测线靠近金标结合垫一端，质控线靠近吸水垫一端。免疫胶体金试纸条放置于试纸卡的卡体中，检测线和质控线设置在其检测窗孔所对应的位置。该试纸卡用于猪血清中伪狂犬病病毒gE蛋白抗体的快速检测，其结构简单，操作方便，灵敏度高、结果清晰。
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