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公开(公告)号：CN116144631B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202310086152.7
申请日：2023-01-17
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12Q1/6816
摘要： 本发明公开了一种高活性和耐热性高的核酸内切酶及其介导的基因编辑系统，具体地，本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的温度适用范围广的核酸内切酶Gs12‑7，其优点在于蛋白温度耐受性高，识别含有BTYV的PAM序列，因而具有更大基因编辑空间且在基因组中高活性高特异切割靶标DNA。本发明建立了基于CRISPR/Gs12‑7系统介导的核酸可视化检测与基因组靶向编辑技术，在基因组定点修饰与核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112501171B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202011415603.X
申请日：2020-12-02
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/10 , C40B50/06
摘要： 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及两条特异性靶向猪Pax7基因的sgRNA导向序列及应用。本发明在猪Pax7基因起始密码子ATG附近位置设计了4个sgRNA导向序列，利用CRISPR/Cas9系统，从中挑选出能够特异性靶向猪Pax7基因起始密码子ATG附近的两条sgRNA。通过将本发明提供的sgRNA序列以及CRISPR/Cas9系统的结合起来使用，可以实现猪中Pax7基因的编辑或敲除，进而实现Pax7基因的标记或低表达，为制备Pax7转基因猪奠定了技术基础。
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公开(公告)号：CN118600081A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410772138.7
申请日：2024-06-16
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了番茄黄化曲叶病抗病基因Ty‑2的CAPS分子标记及应用，其中，番茄黄化曲叶病抗病基因Ty‑2的CAPS分子标记中，CAPS分子标记包括如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。本发明针对Ty‑2基因，即TYNBS1基因编码序列保守结构域内的功能性SNP突变位点开发了区分番茄黄化曲叶病抗病材料纯合基因型，易感材料纯合基因型和杂合基因型的CAPS功能标记，开发成本低廉、操作简单、条带清晰容易分辨、准确度更高，对于抗TYLCV的番茄品种选育具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112522269A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011508193.3
申请日：2020-12-19
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/861
摘要： 本发明属于动物基因组编辑技术领域，具体涉及特异性靶向鸡TYR基因的sgRNA导向序列及应用。本发明涉及鸡TYR基因的第一外显子上设计4个sgRNA，利用CRISPR/Cas9系统，从中挑选出能够特异性靶向鸡TYR基因第一外显子的一条sgRNA。通过将本发明提供的sgRNA序列以及CRISPR/Cas9系统的结合使用，可以实现鸡中TYR基因的编辑或敲除，进而实现TYR的标记辅助选择或基因的低表达，为制备TYR转基因鸡奠定了技术基础。
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公开(公告)号：CN118910293A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411077113.1
申请日：2024-08-07
申请人： 武汉尚码生物科技有限公司 , 华中农业大学
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/01
摘要： 本发明提供了一种布鲁氏菌CRISPR核酸可视化检测试剂盒及应用，其中，布鲁氏菌CRISPR核酸可视化检测试剂盒包括特异RPA引物，所述RPA引物包括F和R，所述F的核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示；所述R的核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示，特异crRNA序列如SEQ ID NO.14所示。本发明能快速、灵敏、高特异的检测布鲁氏菌基因组核酸，具有极大的应用价值。
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公开(公告)号：CN112553202A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011460628.1
申请日：2020-12-12
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/10 , C40B50/06
摘要： 本发明属于动物基因组编辑技术领域，具体涉及三对特异性识别猪GDF11基因的sgRNA及应用。本发明利用CRISPR/Cas9系统敲除猪GDF11基因的sgRNA导向序列，该特异性sgRNA导向序列靶向猪GDF11基因TGFB区域的起始密码子ATG。通过将本发明提供的sgRNA导向序列以及CRISPR/Cas9系统的结合使用，可以实现猪中GDF11基因TGFB区域的编辑或敲除，进而实现GDF1基因的标记或低表达，为制备GDF11转基因猪奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116144631A
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202310086152.7
申请日：2023-01-17
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12Q1/6816
摘要： 本发明公开了一种高活性和耐热性高的核酸内切酶及其介导的基因编辑系统，具体地，本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的温度适用范围广的核酸内切酶Gs12‑7，其优点在于蛋白温度耐受性高，识别含有BTYV的PAM序列，因而具有更大基因编辑空间且在基因组中高活性高特异切割靶标DNA。本发明建立了基于CRISPR/Gs12‑7系统介导的核酸可视化检测与基因组靶向编辑技术，在基因组定点修饰与核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN113249303B
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202110497403.1
申请日：2021-05-07
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N5/0735
摘要： 本发明属于家禽养殖与生殖管理技术领域，具体涉及血管内皮细胞生长因子在促进鸡原始生殖细胞增殖和迁移中的应用。比较了血管内皮细胞生长因子(VEGF)对鸡原始生殖细胞增殖和迁移能力的影响。在现有鸡原始生殖细胞培养液基础上添加适宜浓度的VEGF，可促进鸡原始生殖细胞的增殖，加入VEGF浓度不同，对鸡原始生殖细胞增殖促进作用不相同，当血管内VEGF浓度为25ng/mL和处理3天时应用效果最佳。本发明能有效地促进鸡原始生殖细胞在体外的增殖，基础培养液中适宜浓度VEGF对鸡原始生殖细胞可显著提高迁移定植到性腺的能力，生物学特性维持不变。
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公开(公告)号：CN113249303A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110497403.1
申请日：2021-05-07
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N5/0735
摘要： 本发明属于家禽养殖与生殖管理技术领域，具体涉及血管内皮细胞生长因子在促进鸡原始生殖细胞增殖和迁移中的应用。比较了血管内皮细胞生长因子(VEGF)对鸡原始生殖细胞增殖和迁移能力的影响。在现有鸡原始生殖细胞培养液基础上添加适宜浓度的VEGF，可促进鸡原始生殖细胞的增殖，加入VEGF浓度不同，对鸡原始生殖细胞增殖促进作用不相同，当血管内VEGF浓度为25ng/mL和处理3天时应用效果最佳。本发明能有效地促进鸡原始生殖细胞在体外的增殖，基础培养液中适宜浓度VEGF对鸡原始生殖细胞可显著提高迁移定植到性腺的能力，生物学特性维持不变。
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公开(公告)号：CN112501171A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011415603.X
申请日：2020-12-02
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/10 , C40B50/06
摘要： 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及两条特异性靶向猪Pax7基因的sgRNA导向序列及应用。本发明在猪Pax7基因起始密码子ATG附近位置设计了4个sgRNA导向序列，利用CRISPR/Cas9系统，从中挑选出能够特异性靶向猪Pax7基因起始密码子ATG附近的两条sgRNA。通过将本发明提供的sgRNA序列以及CRISPR/Cas9系统的结合起来使用，可以实现猪中Pax7基因的编辑或敲除，进而实现Pax7基因的标记或低表达，为制备Pax7转基因猪奠定了技术基础。
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