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公开(公告)号:CN114874991B
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202210438460.7
申请日:2022-04-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种I型干扰素受体(type I interferon alpha receptor,IFNAR1)基因敲除牛肾细胞系,是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对牛肾细胞进行基因编辑,并经过单克隆挑选而得到。经表型验证表明IFNAR1敲除的牛肾细胞系不表达IFNAR1且感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和3型牛副流感病毒(BPIV‑3)后,病毒滴度均可显著提高,从而可用于牛源病毒临床株的分离鉴定并提高病毒的增殖效率。
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公开(公告)号:CN119019529A
公开(公告)日:2024-11-26
申请号:CN202411327051.5
申请日:2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了WNT5A基因在调控宿主抗牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV‑3)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建了WNT5A基因敲除的MDBK细胞系和抗BPIV‑3感染的细胞模型,发现基因敲除细胞对BPIV‑3感染表现出显著抗性,BPIV‑3在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞,而回补WNT5A基因则导致细胞的抗病毒作用消失。以上结果表明,WNT5A基因在调控宿主抗病毒中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了WNT5A基因的抗病毒调节功能,首次发现该基因可以作为基因编辑细胞和动物设计的潜在靶点应用于抗病育种和牛抗BPIV‑3感染预防与治疗药物的研发,对减少药物滥用,避免疫情发生具有重大意义。
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公开(公告)号:CN119285738A
公开(公告)日:2025-01-10
申请号:CN202411327055.3
申请日:2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了SELENON基因在调控宿主抗牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV‑3)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建了SELENON基因敲除的MDBK细胞系和抗BPIV‑3感染的细胞模型,发现基因敲除细胞对BPIV‑3感染表现出显著抗性,BPIV‑3在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞,而回补SELENON基因则导致细胞的抗病毒作用消失。以上结果表明,SELENON基因在调控宿主抗病毒中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了SELENON基因的抗病毒调节功能,首次发现该基因可以作为基因编辑细胞和动物设计的潜在靶点应用于抗病育种和牛抗BPIV‑3感染预防与治疗药物的研发,对减少药物滥用,避免疫情发生具有重大意义。
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公开(公告)号:CN119019530A
公开(公告)日:2024-11-26
申请号:CN202411327052.X
申请日:2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了SLC16A13基因在调控宿主抗牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV‑3)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建了SLC16A13基因敲除的MDBK细胞系和抗BPIV‑3感染的细胞模型,发现基因敲除细胞对BPIV‑3感染表现出显著抗性,BPIV‑3在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞,而回补SLC16A13基因则导致细胞的抗病毒作用消失。以上结果表明,SLC16A13基因在调控宿主抗病毒中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了SLC16A13基因的抗病毒调节功能,首次发现该基因可以作为基因编辑细胞和动物设计的潜在靶点应用于抗病育种和牛抗BPIV‑3感染预防与治疗药物的研发,对减少药物滥用,避免疫情发生具有重大意义。
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公开(公告)号:CN119082090A
公开(公告)日:2024-12-06
申请号:CN202411327049.8
申请日:2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/48 , C12N15/57 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了羧肽酶6(CPA6)基因在调控宿主抗牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建了CPA6基因敲除的牛肾细胞系和抗BEV病毒感染的细胞模型,病毒学检测结果表明,BEV在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞,而回补CPA6基因则导致细胞的抗病毒作用消失,表明CPA6基因在调控宿主抗BEV感染中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了CPA6基因的功能,首次发现该基因可以作为基因编辑动物设计的潜在靶点应用于BEV感染的抗病育种、预防与治疗,对减少药物滥用,避免疫情发生具有重大意义。
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公开(公告)号:CN117683142A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311665648.6
申请日:2023-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,公开了融合蛋白LSDV090‑133及其在检测牛结节性皮肤病病毒(LSDV)感染抗体和鉴别疫苗免疫抗体中的应用。本发明利用噬菌体展示文库筛选针对牛结节性皮肤病病毒感染血清和山羊痘弱毒疫苗免疫血清的特异性多肽,经生物信息学分析,选取牛结节性皮肤病病毒感染血清特有的3条多肽,通过柔性肽串联至pET28a载体,送公司进行基因合成,原核表达得到LSDV090‑133融合蛋白,分子量约为20 kDa。经验证,该蛋白与LSDV感染牛阳性血清有很强的反应原性,其灰度值明显强于与山羊痘弱毒疫苗免疫60dpi后的免疫血清,是一种潜在的鉴别诊断新靶标,能用于鉴别诊断LSDV感染和山羊痘弱毒疫苗免疫的抗体反应,为牛结节性皮肤病的血清学诊断和防控提供参考工具。
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公开(公告)号:CN114874991A
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN202210438460.7
申请日:2022-04-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种I型干扰素受体(type I interferon alpha receptor,IFNAR1)基因敲除牛肾细胞系,是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对牛肾细胞进行基因编辑,并经过单克隆挑选而得到。经表型验证表明IFNAR1敲除的牛肾细胞系不表达IFNAR1且感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和3型牛副流感病毒(BPIV‑3)后,病毒滴度均可显著提高,从而可用于牛源病毒临床株的分离鉴定并提高病毒的增殖效率。
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