公开(公告)号：CN108753775B

公开(公告)日：2021-08-24

申请号：CN201810421083.X

申请日：2018-05-04

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨世华 ,  方志浩 ,  邓英华

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种靶向APOBEC3G基因的sgRNA及食蟹猴APOBEC3G基因敲除的方法。本发明针对食蟹猴APOBEC3G基因的mRNA确立靶序列并合成相应的sgRNA，然后构建敲除载体，共转染食蟹猴胚胎成纤维细胞，获得APOBEC3G基因敲除的食蟹猴胚胎成纤维细胞，或将sgRNA和Cas9 mRNA混合注射入食蟹猴胚胎，得到APOBEC3G基因敲除的食蟹猴胚胎。本发明经敲除效果检测鉴定，能有效在食蟹猴细胞和食蟹猴胚胎上实现APOBEC3G基因的基因敲除，为建立艾滋病动物模型奠定了坚实基础。

公开(公告)号：CN108753775A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810421083.X

申请日：2018-05-04

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨世华 ,  方志浩 ,  邓英华

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22

CPC classification number: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/907 ,  C12N2310/10

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种靶向APOBEC3G基因的sgRNA及食蟹猴APOBEC3G基因敲除的方法。本发明针对食蟹猴APOBEC3G基因的mRNA确立靶序列并合成相应的sgRNA，然后构建敲除载体，共转染食蟹猴胚胎成纤维细胞，获得APOBEC3G基因敲除的食蟹猴胚胎成纤维细胞，或将sgRNA和Cas9 mRNA混合注射入食蟹猴胚胎，得到APOBEC3G基因敲除的食蟹猴胚胎。本发明经敲除效果检测鉴定，能有效在食蟹猴细胞和食蟹猴胚胎上实现APOBEC3G基因的基因敲除，为建立艾滋病动物模型奠定了坚实基础。

公开(公告)号：CN105779495A

公开(公告)日：2016-07-20

申请号：CN201610154665.7

申请日：2016-03-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨世华 ,  李加宇 ,  吴绮琪 ,  方志浩 ,  黄群山

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/113

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/66 ,  C12N2310/14 ,  C12N2800/107

Abstract: 本发明公开了一种卵巢原位注射实现RNA过表达的方法及应用，属于生物技术领域。本发明通过体内转染的方法实现RNA在小鼠卵巢中的过表达，为进一步研究RNA在卵巢中的功能提供技术支持。本发明的方法避免了尾静脉过表达基因无靶向性的缺点；转染试剂的用量比尾静脉注射减少了几十倍，节约了实验成本；过表达效果很好，与空白对照组相比，RNA表达水平显著升高；本发明使用的微创的方法，对小鼠生存没有影响。