公开(公告)号：CN114645008A

公开(公告)日：2022-06-21

申请号：CN202210276737.0

申请日：2022-03-21

Applicant: 华南农业大学 ,  广东永顺生物制药股份有限公司

Inventor： 代绘琳 ,  曾知为 ,  秦苗苗 ,  许斯祺 ,  谢倩梅 ,  江金飞 ,  陈爱华 ,  冯赛祥 ,  涂玉蓉 ,  韩翡

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C12N15/90 ,  C12N15/113 ,  C12N15/31 ,  C12P21/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种微菌素J25重组整合工程菌及其构建方法与应用。本发明利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将微菌素J25的全基因重组整合进了大肠杆菌MG1655的基因组中，而非质粒整合，使微菌素J25基因稳定存在于工程菌基因组中，构建得到微菌素J25重组整合工程菌。与现有的表达微菌素J25的重组菌株相比，该微菌素J25重组整合工程菌为基因组定向重组菌，非质粒整合，没有质粒横向转移的风险和危害，无任何标记基因，使用时不会对环境产生污染，无需任何诱导剂的参与，可稳定持续地表达微菌素J25并对沙门氏菌有明显的防控效果。

公开(公告)号：CN117264984A

公开(公告)日：2023-12-22

申请号：CN202310489923.7

申请日：2023-04-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 曹伟胜 ,  曾知为 ,  代绘琳 ,  李文静 ,  周迪 ,  冯赛祥

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  A61K35/741 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种微菌素MccH47和MccM表达优化工程菌及其构建及抗菌应用。该工程菌保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2023417。该工程菌是通过pREDCas9大肠杆菌基因编辑技术，以EcN菌株为底盘菌，将组成型启动子219p、表达转录后修饰基因mchA序列整合至EcN基因组中得到的，具有无抗性标记基因、具有良好生长活性、遗传稳定性、高效表达MccH47和MccM的显著特点。相比野生型EcN和现有工程菌具有更强以及更广的抑菌效果，使其在微生态制剂方面具有潜在的应用价值。

公开(公告)号：CN114634945B

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202210452692.8

申请日：2022-04-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 代绘琳 ,  秦苗苗 ,  曾知为 ,  江金飞 ,  谢倩梅 ,  冯赛祥 ,  许斯祺 ,  张广文 ,  陈爱华

IPC: C12N15/70 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N1/21 ,  C07K14/255 ,  C12N15/31 ,  A61K38/16 ,  A61K35/74 ,  A61P31/04 ,  A23K20/147 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种MccY重组整合工程菌及其构建方法与应用。该MccY重组整合工程菌的构建方法包括如下步骤：(1)将sgRNA片段(SEQ ID NO.2)与T载体连接，得到pHsgRNA质粒；(2)将pCas9质粒转化大肠杆菌，并制成感受态细胞；然后将优化后的MccY的修复片段(SEQ ID NO.1)和pHsgRNA质粒转入感受态细胞中，经鉴定、培养、连续传代筛选消除双质粒的菌株，得到所述的MccY重组整合工程菌。本发明中构建得到的MccY重组整合工程菌无质粒无抗性基因，无需诱导剂，能够持续高效地分泌表达MccY，对鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、宋内志贺氏菌、痢疾志贺氏菌等有明显的抑制效果。

公开(公告)号：CN114634945A

公开(公告)日：2022-06-17

申请号：CN202210452692.8

申请日：2022-04-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 代绘琳 ,  秦苗苗 ,  曾知为 ,  江金飞 ,  谢倩梅 ,  冯赛祥 ,  许斯祺 ,  张广文 ,  陈爱华

IPC: C12N15/70 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N1/21 ,  C07K14/255 ,  C12N15/31 ,  A61K38/16 ,  A61K35/74 ,  A61P31/04 ,  A23K20/147 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种MccY重组整合工程菌及其构建方法与应用。该MccY重组整合工程菌的构建方法包括如下步骤：(1)将sgRNA片段(SEQ ID NO.2)与T载体连接，得到pHsgRNA质粒；(2)将pCas9质粒转化大肠杆菌，并制成感受态细胞；然后将优化后的MccY的修复片段(SEQ ID NO.1)和pHsgRNA质粒转入感受态细胞中，经鉴定、培养、连续传代筛选消除双质粒的菌株，得到所述的MccY重组整合工程菌。本发明中构建得到的MccY重组整合工程菌无质粒无抗性基因，无需诱导剂，能够持续高效地分泌表达MccY，对鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、宋内志贺氏菌、痢疾志贺氏菌等有明显的抑制效果。

公开(公告)号：CN119113133A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411115001.0

申请日：2024-08-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 曹伟胜 ,  李昱 ,  张金玉 ,  曾知为 ,  韩雨 ,  魏科

IPC: A61K47/61 ,  A23L3/3562 ,  A23K20/163 ,  A23P10/20 ,  A23L3/3526 ,  A23K20/142 ,  A61K47/69 ,  A61K47/54 ,  A61K38/10 ,  A61K38/16 ,  A61P31/04 ,  A61P17/02 ,  A01N25/10 ,  A01P1/00

Abstract: 本发明公开了一种多效微菌素壳聚糖纳米粒及其制备方法与应用，所述壳聚糖纳米粒包括一种以上套索肽，具有多效协同抗菌作用，实现了广谱抗菌效果。本发明制备获得的壳聚糖纳米粒中还可以包括精氨酸，从而提高了套索肽的酸碱耐受性，突破了畜禽饲用添加套索肽的应用瓶颈。此外，本发明制备获得的壳聚糖纳米粒还具有较高的安全性。