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公开(公告)号：CN118389484B
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202410843945.3
申请日：2024-06-27
申请人： 吉林大学
IPC分类号： C12N11/18 , C12N11/089 , C12N9/42 , C12N9/10
摘要： 本发明适用于生物技术领域，提供了一种固定化双酶及其制备方法和应用，本发明选用ZIF‑8作为载体，采用包埋法成功固定CbCBP酶，继而通过在ZIF‑8骨架的2‑甲基咪唑上共价键结合Ni2+，并利用Ni2+的亲和性将带有His标签的AcCel9A酶特异性地固定在表面，从而实现双酶共固定。本发明提供的方法合成了一种新型的区室化固定化双酶，不仅有效解决了糖供体成本高昂的问题，同时也为转糖基修饰领域开辟了新的研究路径。本发明有效提高了酶的重复利用性及稳定性，提高了酶催化反应的经济效益。同时能够在更广泛的底物范围内实现精准的转糖基调控。本发明合成了氟代脱氧纤维二糖（FDC），是一种具有潜力的新型示踪剂。
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公开(公告)号：CN105368856B
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201510901182.4
申请日：2015-12-09
申请人： 吉林大学
摘要： 一种比活提高的突变型嗜热碱性果胶裂解酶基因、工程菌酶及其应用，属于生物工程技术领域。该工程菌的保藏编号为CGMCC No.11461，分类命名为大肠埃希氏菌Escherichia coli，保藏地址为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为：2015年9月29日。本发明主要公开突变型嗜热碱性果胶裂解酶，最适反应温度为70℃，最适Ca2+浓度为0.8mM，底物为0.2％(w/v)多聚半乳糖醛酸，pH 9.5。该酶在最适pH 9.5、Ca2+0.8mM、70℃时酶比活为5300U/mg；在70℃保温下，半衰期为6h；经过镍柱纯化处理后CbPelC‑CD可达到40mg/L(1L发酵液)。本发明所述突变型嗜热碱性果胶裂解酶的比活力相对原酶CbPelC(900U/mg)有大幅度挺高，更加适应现代工业生产要求，也为工业大规模生产碱性果胶酶提供了有效地方法。
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公开(公告)号：CN118389484A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410843945.3
申请日：2024-06-27
申请人： 吉林大学
IPC分类号： C12N11/18 , C12N11/089 , C12N9/42 , C12N9/10
摘要： 本发明适用于生物技术领域，提供了一种固定化双酶及其制备方法和应用，本发明选用ZIF‑8作为载体，采用包埋法成功固定CbCBP酶，继而通过在ZIF‑8骨架的2‑甲基咪唑上共价键结合Ni2+，并利用Ni2+的亲和性将带有His标签的AcCel9A酶特异性地固定在表面，从而实现双酶共固定。本发明提供的方法合成了一种新型的区室化固定化双酶，不仅有效解决了糖供体成本高昂的问题，同时也为转糖基修饰领域开辟了新的研究路径。本发明有效提高了酶的重复利用性及稳定性，提高了酶催化反应的经济效益。同时能够在更广泛的底物范围内实现精准的转糖基调控。本发明合成了氟代脱氧纤维二糖（FDC），是一种具有潜力的新型示踪剂。
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公开(公告)号：CN112359033B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202011282328.9
申请日：2020-11-17
申请人： 吉林大学
摘要： 本发明公开了一种几丁质结合域，通过将该几丁质结合域构建到通用表达载体上，用于融合表达目的蛋白，并实现目标蛋白的纯化与固定化同步完成。本发明通过利用几丁质与融合蛋白的特异性亲和性能，实现β‑葡萄糖苷酶的高效固定化，并以人参皂苷Rb1为底物，利用该固定化酶高效率的制备获得人参皂苷Rd。采用本发明的固定化方法具有成本低廉、酶固定化效率高、酶活损失小、特异性强等优点，从根本上解决了游离酶的不可回收、稳定性差以及传统全细胞固定化方法的重复率低下等问题。
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公开(公告)号：CN112359033A
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN202011282328.9
申请日：2020-11-17
申请人： 吉林大学
摘要： 本发明公开了一种几丁质结合域，通过将该几丁质结合域构建到通用表达载体上，用于融合表达目的蛋白，并实现目标蛋白的纯化与固定化同步完成。本发明通过利用几丁质与融合蛋白的特异性亲和性能，实现β‑葡萄糖苷酶的高效固定化，并以人参皂苷Rb1为底物，利用该固定化酶高效率的制备获得人参皂苷Rd。采用本发明的固定化方法具有成本低廉、酶固定化效率高、酶活损失小、特异性强等优点，从根本上解决了游离酶的不可回收、稳定性差以及传统全细胞固定化方法的重复率低下等问题。
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公开(公告)号：CN110218662A
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201910558819.2
申请日：2019-06-26
申请人： 吉林大学
摘要： 一种嗜低温产香特性突出的美极梅奇酵母及其在冰葡萄酒酿造中的应用，属于微生物应用技术领域。该酵母菌于2019年4月12日保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60631，分类命名为Metschnikowia pulcherrima Y6，该菌株26S rDNA基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。该酵母菌的菌株分离自吉林省集安市冰冻维达尔葡萄的表面，在15℃下经过YPD固体培养基48h培养后的菌落为圆形、浅红色、有光泽，其边缘整齐，菌体粘稠，易挑起。细胞呈卵圆形，单极出芽。该酵母菌具有在低温下发酵速度快，而且产香特性突出的特点，可应用于冰葡萄酒和其它葡萄酒的酿制。
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公开(公告)号：CN105441467A
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201510901096.3
申请日：2015-12-09
申请人： 吉林大学
CPC分类号： C12N9/88 , C12Y402/0201
摘要： 一种嗜热碱性果胶裂解酶基因、工程菌、嗜热碱性果胶裂解酶及其应用，属于生物工程技术领域。该工程菌的保藏编号为CGMCC No.11460，分类命名为大肠埃希氏菌Escherichia coli，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2015年9月29日。本发明主要公开嗜热碱性果胶裂解酶，最适反应温度为70℃，最适Ca2+浓度为0.8mM，底物为0.2％(w/v)多聚半乳糖醛酸，pH9.5。该酶在最适pH9.5、Ca2+0.8mM、70℃时酶比活为900U/mg；在70℃保温下，半衰期为6h；经过镍柱纯化处理后CbPelC可达到50mg/L(1L发酵液)。本发明所述嗜热碱性果胶裂解酶的耐热性和产量有大幅度挺高，更加适应现代工业生产要求，也为工业大规模生产碱性果胶酶提供了有效地方法。
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公开(公告)号：CN1552892A
公开(公告)日：2004-12-08
申请号：CN200310115964.2
申请日：2003-12-19
申请人： 吉林大学
摘要： 本发明涉及一种应用复合蛋白酶催化的方法水解鹿肉制备具有生理活性的鹿肽产品，以及该鹿肽产品在提高机体免疫力、增强抗疲劳能力及耐缺氧能力等方面的应用。该鹿肽产品是以处理过的过80目标准筛的肉浆为原料，在恒温反应罐中加热至48－52℃，用NaOH溶液调节pH值到6.8－7.2，搅拌下加入中性蛋白酶、木瓜蛋白酶或胰蛋白酶，待蛋白质水解度达28～33％后再加入风味蛋白酶，继续用标准的2MNaOH溶液控制反应进程，使蛋白质水解度达34～42％；然后将酶解液升温至114－116℃，维持10－15分钟后迅速将温度降低到室温，经固液分离、浓缩及干燥后得淡黄色到黄色的粉末或者颗粒鹿肽产品。
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公开(公告)号：CN105368856A
公开(公告)日：2016-03-02
申请号：CN201510901182.4
申请日：2015-12-09
申请人： 吉林大学
摘要： 一种比活提高的突变型嗜热碱性果胶裂解酶基因、工程菌酶及其应用，属于生物工程技术领域。该工程菌的保藏编号为CGMCC No.11461，分类命名为大肠埃希氏菌Escherichia coli，保藏地址为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为：2015年9月29日。本发明主要公开突变型嗜热碱性果胶裂解酶，最适反应温度为70℃，最适Ca2+浓度为0.8mM，底物为0.2％(w/v)多聚半乳糖醛酸，pH 9.5。该酶在最适pH 9.5、Ca2+0.8mM、70℃时酶比活为5300U/mg；在70℃保温下，半衰期为6h；经过镍柱纯化处理后CbPelC-CD可达到40mg/L(1L发酵液)。本发明所述突变型嗜热碱性果胶裂解酶的比活力相对原酶CbPelC(900U/mg)有大幅度挺高，更加适应现代工业生产要求，也为工业大规模生产碱性果胶酶提供了有效地方法。
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公开(公告)号：CN101372693A
公开(公告)日：2009-02-25
申请号：CN200810050903.5
申请日：2008-07-01
申请人： 吉林大学
摘要： 本发明属于生物工程领域，具体涉及来源于闪烁杆菌属(Fervidobacterium)细菌的耐热纤维素酶基因、重组载体、纤维素酶基因工程菌、耐热纤维素酶及应用。我们获得的耐热纤维素酶(FnCel5A、FnNHCel5A)能在高温条件(70～80℃)下高效催化反应，而且酶的稳定性非常好，运用到生产中，有储运成本低、加快动力学反应、对反应器冷却系统要求标准低等优点。同时FnCel5A、FnNHCel5A是具有单一内切酶活性的耐热纤维素酶，在纤维素加工领域具有广泛的应用。也可以将该重组耐热纤维素酶应用到洗涤剂、废水处理、动物饲料等方面，或者应用在纺织工业、再生纸生产、植物有效成分提取、果汁加工等工业。
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