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公开(公告)号：CN108106894A
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201711358221.6
申请日：2017-12-17
申请人： 吉林大学 , 长春恒晓生物科技有限责任公司
摘要： 本发明属于生物技术领域。公开了用昆虫细胞表达可溶性生长刺激表达蛋白2做为ELISA测定血清中sST2浓度的校准品过程，此方法步骤如下：提取T47D细胞 RNA,用于合成cDNA，用PCR扩增出sST2DNA；用sST2 DNA构成pFastBac‑Flag‑sST2载体，再转导入HD10Bac 细菌株，产生重组Flag‑sST2昆虫病毒质粒；把Flag‑sST2AcNPV质粒DNA转导进昆虫细胞，产生重组Flag‑sSt2AcNPV；用Flag‑sST2 AcNPV感染SF9细胞，表达出Flag‑sST2蛋白，用Anti‑Flag M2 affinity agarose纯化出具有自然结构和抗原性Flag‑sST2；用Flag‑sST2作为校准品，建立双夹心酶联免疫法，测定血清或其它液体中sST2 浓度,此发明制备出具有蛋白自然结构和抗原性Flag‑sST2，做为测定液体中sST2浓度的校准品，用于临床检测血清中sST2浓度。
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公开(公告)号：CN108106894B
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN201711358221.6
申请日：2017-12-17
申请人： 吉林大学 , 长春恒晓生物科技有限责任公司
摘要： 本发明属于生物技术领域。公开了用昆虫细胞表达可溶性生长刺激表达蛋白2做为ELISA测定血清中sST2浓度的校准品过程，此方法步骤如下：提取T47D细胞RNA,用于合成cDNA，用PCR扩增出sST2DNA；用sST2 DNA构成pFastBac‑Flag‑sST2载体，再转导入HD10Bac细菌株，产生重组Flag‑sST2昆虫病毒质粒；把Flag‑sST2AcNPV质粒DNA转导进昆虫细胞，产生重组Flag‑sSt2AcNPV；用Flag‑sST2 AcNPV感染SF9细胞，表达出Flag‑sST2蛋白，用Anti‑Flag M2 affinity agarose纯化出具有自然结构和抗原性Flag‑sST2；用Flag‑sST2作为校准品，建立双夹心酶联免疫法，测定血清或其它液体中sST2浓度,此发明制备出具有蛋白自然结构和抗原性Flag‑sST2，做为测定液体中sST2浓度的校准品，用于临床检测血清中sST2浓度。
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公开(公告)号：CN108181472B
公开(公告)日：2020-07-21
申请号：CN201711358462.0
申请日：2018-03-05
申请人： 吉林大学 , 长春恒晓生物科技有限责任公司
发明人： 张蕾 , 李宝民 , 刘斌 , 王珺楠 , 史永丰 , 王贺 , 王玉华 , 隋宝真 , 赵青 , 刘思言 , 张金玲 , 黄景林 , 关恒 , 林林 , 朱道林 , 仇淑园 , 孙玉峰 , 张超
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/96 , C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/866
摘要： 一种昆虫细胞表达PSP为校准品的检测PSP试剂盒，属于生物技术领域。本发明公开了用昆虫细胞表达胰石蛋白，纯化出PSP作为校准品，建立侧向免疫层析法试纸条，时间分辨荧光法测定试纸条荧光强度，检测血液或液体中PSP浓度过程，此方法步骤如下：提取胃癌细胞(AGS)中RNA，合成cDNA，重组Flag‑PSP AcNPV质粒转入此昆虫细胞，纯化PSP蛋白，作为校准品，标记羧基修饰微粒上，组装成侧向免疫层析法试纸条，建立PSP浓度自动显示系统。本发明优点是灵敏度高、特异性强、操作简便、用于快速诊断细菌感染和脓毒血症发生。
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公开(公告)号：CN108181472A
公开(公告)日：2018-06-19
申请号：CN201711358462.0
申请日：2018-03-05
申请人： 吉林大学 , 长春恒晓生物科技有限责任公司
发明人： 张蕾 , 李宝民 , 刘斌 , 王珺楠 , 史永丰 , 王贺 , 王玉华 , 隋宝真 , 赵青 , 刘思言 , 张金玲 , 黄景林 , 关恒 , 林林 , 朱道林 , 仇淑园 , 孙玉峰 , 张超
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/96 , C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/866
摘要： 一种昆虫细胞表达PSP为校准品的检测PSP试剂盒，属于生物技术领域。本发明公开了用昆虫细胞表达胰石蛋白，纯化出PSP作为校准品，建立侧向免疫层析法试纸条，时间分辨荧光法测定试纸条荧光强度，检测血液或液体中PSP浓度过程，此方法步骤如下：提取胃癌细胞(AGS)中RNA，合成cDNA，重组Flag-PSP AcNPV质粒转入此昆虫细胞，纯化PSP蛋白，作为校准品，标记羧基修饰微粒上，组装成侧向免疫层析法试纸条，建立PSP浓度自动显示系统。本发明优点是灵敏度高、特异性强、操作简便、用于快速诊断细菌感染和脓毒血症发生。
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公开(公告)号：CN106290190A
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201610636169.5
申请日：2016-08-05
申请人： 长春恒晓生物科技有限责任公司
CPC分类号： G01N21/31 , G01N1/28 , G01N1/30 , G01N1/34 , G01N2021/3185
摘要： 一种测定MPO卤化酶活性的方法，本发明的目的是用离子层析法从HL-60细胞中分离出具有自然蛋白结构和酶活性MPO，建立测定MPO卤化酶活性方法，用纯化MPO作为校准品，测定人血清/浆中MPO卤化酶活性单位。本发明测定的MPO卤化酶从HL-60细胞中分离。本发明建立NaI-TMB（3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine，四甲基联苯胺）法，直接测定血清/浆中MPO卤化酶活性，用于预测心脑血管疾病发生可能性及疾病预后。
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公开(公告)号：CN108761092A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810788709.0
申请日：2018-07-18
申请人： 长春恒晓生物科技有限责任公司
发明人： 刘斌 , 李宝民 , 关恒 , 张蕾 , 刘戈 , 赵青 , 史永丰 , 刘宁 , 李添伟 , 隋宝真 , 仇淑园 , 孙净 , 张金玲 , 黄景林 , 高敏 , 孙晓婷 , 林林 , 朱道林 , 孙玉峰 , 王贺
IPC分类号： G01N33/68
CPC分类号： G01N33/68
摘要： 本发明公开了建立侧向免疫层析法（LateralFlowImmunoassay，LFIA），时间分辨荧光法（Time‑resolved fluoroimmunoassay，TRFIA)检测和肽素（Copeptin,CPP）试剂盒过程。本发明试剂盒有试纸卡：底板上依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，加外壳后形成试纸卡；其中结合垫上吸附稀土元素荧光微球标记抗CPP抗体；硝酸纤维素膜上喷涂有CPP抗体（检测线）和抗IgG抗体（质控线）。所述稀土元素荧光微球的直径为100‑500nm，在波长420nm激发光作用下，发射出波长615nm荧光，用相配套TRFIA分析仪测定荧光强度。本发明试剂盒具有操作简便、反应快速、灵敏度高、特异性强等优点,用于检测血液或液体样品中CPP浓度，用于早期判定脑血管栓塞发生。
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