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公开(公告)号：CN104561283B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201410823091.9
申请日：2014-12-24
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司 , 华南农业大学
摘要： 本发明通过比较副猪嗜血杆菌荚膜合成基因簇上的保守基因，并分析各血清型之间保守基因的差别，为15个血清型各设计多对引物，并从中各筛选一对作为血清分型PCR引物，并建立鉴别副猪嗜血杆菌15个血清分型PCR方法。本发明提供了一种准确度高、灵敏度高、特异性强的副猪嗜血杆菌血清分型PCR方法。
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公开(公告)号：CN104667269B
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201510053897.9
申请日：2015-02-02
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC分类号： A61K39/215 , A61K39/39 , A61K9/00 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒PEDV鼻腔免疫疫苗及其制备方法，本发明疫苗由猪流行性腹泻病毒的疫苗原液、佐剂溶液和叠氮钠溶液按特定的比例混合制得，其中所述的佐剂溶液含有TLR的激动剂、NOD样受体的激动剂、卡波姆和PVPK。本发明制备的PEDV鼻腔免疫疫苗相比现有的相关疫苗，其效价高、免疫效果好。本发明的疫苗通过鼻腔黏膜组织进行疫苗免疫，可以同时激发机体黏膜免疫和系统免疫，在母猪乳汁中产生大量的sIgA，通过乳汁将母源抗体传递给仔猪，使仔猪获得有效的免疫保护，预防仔猪流行性腹泻的危害。
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公开(公告)号：CN105713085A
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201610150997.8
申请日：2016-03-16
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
CPC分类号： C07K16/04 , C07K14/47 , C07K2317/12
摘要： 本发明公开了一种猪初乳中分泌型免疫球蛋白A和分泌片蛋白质的提取及纯化方法。本发明简化了猪初乳分泌型免疫球蛋白A的纯化步骤，逐级盐析后直接选择凝胶过滤，凝胶过滤的柱子为Superdex 200TM Increase 10/300 GL，经后续western-blot实验及质谱实验证明，该方法可以得到较纯的分泌型免疫球蛋白A，使纯化猪初乳免疫球蛋白A的过程简单化，减少生产成本，提高生产效率。同时，将盐析后的初乳进行聚丙烯酰胺凝胶电泳后，已经确认分子量为80KD左右的蛋白质为分泌片蛋白，利用这种方法，可以得到较多的分泌片蛋白。
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公开(公告)号：CN105274102A
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201510776701.9
申请日：2015-11-12
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
摘要： 一种辅助鉴定猪链球菌2型、猪链球菌7型和猪链球菌9型的引物组及其应用，该引物组由如下引物对组成：由如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌2型的引物对；由如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列和如SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌7型的引物对；由如SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列和如SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌9型的引物对。本发明将引物组制备成试剂盒，建立了猪链球菌2、7、9型PCR定型方法，实现了1次PCR同时检测3个血清型，大大缩短了工作内容。
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公开(公告)号：CN104561283A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410823091.9
申请日：2014-12-24
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2565/125
摘要： 本发明通过比较副猪嗜血杆菌荚膜合成基因簇上的保守基因，并分析各血清型之间保守基因的差别，为15个血清型各设计多对引物，并从中各筛选一对作为血清分型PCR引物，并建立鉴别副猪嗜血杆菌15个血清分型PCR方法。本发明提供了一种准确度高、灵敏度高、特异性强的副猪嗜血杆菌血清分型PCR方法。
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公开(公告)号：CN106366188B
公开(公告)日：2019-04-30
申请号：CN201610793184.0
申请日：2016-08-31
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC分类号： C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , C12N5/20 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体及其细胞株和应用。所述细胞株PEDV‑J11E保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C2016145。其分泌的单克隆抗体对PEDV具有高特异性和高亲和力，能特异性结合PEDV的不同抗原表位，可用于建立双抗体夹心ELISA检测方法对PEDV进行定量检测。本发明建立的双抗体夹心ELISA方法具有很好的检测特异性和灵敏度，且具有很好的线性检测范围，说明本发明双抗体夹心ELISA试剂盒具有很好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN106366188A
公开(公告)日：2017-02-01
申请号：CN201610793184.0
申请日：2016-08-31
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC分类号： C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , C12N5/20 , C12R1/91
CPC分类号： C07K16/10 , C07K2317/51 , C07K2317/515
摘要： 本发明公开了抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体及其细胞株和应用。所述细胞株PEDV-J11E保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C2016145。其分泌的单克隆抗体对PEDV具有高特异性和高亲和力，能特异性结合PEDV的不同抗原表位，可用于建立双抗体夹心ELISA检测方法对PEDV进行定量检测。本发明建立的双抗体夹心ELISA方法具有很好的检测特异性和灵敏度，且具有很好的线性检测范围，说明本发明双抗体夹心ELISA试剂盒具有很好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104804082A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510152757.7
申请日：2015-04-01
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC分类号： C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N21/64
摘要： 本发明公开了一种快速定量检测猪流行性腹泻病毒的免疫荧光检测试纸条及其制备方法，本发明试纸条含有样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫，结合垫上含有荧光微球标记的抗PEDV单域抗体，该单域抗体对抗原PEDV具有高特异性和高灵敏性。本发明基于新发现的特异性单域抗体与抗原的免疫学原理检测养殖猪粪便中的PEDV病毒或饲料血浆蛋白中PEDV的污染，可用于进行现场快速检测或实验室检测，只需5-10min；若与荧光定量检测仪连用，可实现定量检测；操作简单方便，操作人员不需要专业培训，且不需要专门实验室，克服了现有检测方法的局限性，具有良好的市场前景。
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公开(公告)号：CN103992989B
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410111066.8
申请日：2014-03-20
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC分类号： C12N7/00 , C07K16/10 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种流行性腹泻病毒，其保藏编号为CCTCC NO：V201407。在电镜下观察，该病毒颗粒直径范围在90-190nm，表面有囊膜，囊膜上有花瓣状纤突，从核心向四周放射性分布。本发明还涉及猪流行性腹泻病毒的应用。本发明中的病毒可在vero细胞中高效增殖，病毒浓度可达107TCID50/mL，无外源病毒污染，对仔猪具有较强的致病力，病毒滴度10TCID50即能引起仔猪发病，有良好的免疫原性；根据本发明中的病毒制备的疫苗对猪的流行性腹泻具有较好的保护效果；根据本发明中的病毒制备的高滴度的血清抗体，具有较好的血清效价。
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公开(公告)号：CN104804082B
公开(公告)日：2018-04-27
申请号：CN201510152757.7
申请日：2015-04-01
申请人： 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC分类号： C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N21/64
摘要： 本发明公开了一种快速定量检测猪流行性腹泻病毒的免疫荧光检测试纸条及其制备方法，本发明试纸条含有样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫，结合垫上含有荧光微球标记的抗PEDV单域抗体，该单域抗体对抗原PEDV具有高特异性和高灵敏性。本发明基于新发现的特异性单域抗体与抗原的免疫学原理检测养殖猪粪便中的PEDV病毒或饲料血浆蛋白中PEDV的污染，可用于进行现场快速检测或实验室检测，只需5‑10min；若与荧光定量检测仪连用，可实现定量检测；操作简单方便，操作人员不需要专业培训，且不需要专门实验室，克服了现有检测方法的局限性，具有良好的市场前景。
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