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公开(公告)号:CN107988329A
公开(公告)日:2018-05-04
申请号:CN201711118485.4
申请日:2017-11-13
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要: 本发明涉及一种鉴定人诱导多能干细胞多能性基因的引物组合物、试剂盒及检测方法,其引物组合物包括A引物组、B引物组和内参引物,所述A引物组包含扩增人诱导多能干细胞内源基因Oct4、Sox2和Nanog的引物对中的一种或多种,所述B引物组为扩增Oct4、Sox2和Nanog总基因的引物对的一种或多种,所述内参引物为扩增GAPDH基因的引物。具体的是从多能干细胞中提取核糖核酸(RNA),应用实时多聚酶链式反应(Real-Time PCR)技术对其多能性基因进行定量检测以鉴定内源和外源多能性基因表达差异的检测方法和试剂盒。采用本发明的鉴定方法操作简单、成本低,且准确性和灵敏度高。
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公开(公告)号:CN107937347A
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201711170381.8
申请日:2017-11-20
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12N5/10
CPC分类号: C12N5/0696 , C12N2500/12 , C12N2500/32 , C12N2500/34 , C12N2500/44 , C12N2501/115 , C12N2501/602 , C12N2501/603 , C12N2501/604 , C12N2501/606 , C12N2506/02 , C12N2510/00
摘要: 本发明涉及一种能快速有效诱导小鼠体细胞重编程为多能性干细胞的无动物外源性的培养基,诱导培养基由DMEM基础培养基、NEAA、KSR、LIF以及多种小分子和无机盐所组成,培养基成分明确,无动物外源性污染。本发明的诱导培养基具有诱导效率高、诱导时间短等优点。对大量获得诱导多功能干细胞、促进干细胞临床应用的发展具有重大意义。
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公开(公告)号:CN107937346A
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201711169918.9
申请日:2017-11-20
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12N5/10 , C12N15/867
CPC分类号: C12N5/0696 , C12N15/86 , C12N2501/602 , C12N2501/603 , C12N2501/604 , C12N2501/606 , C12N2502/1323 , C12N2510/00 , C12N2740/10043
摘要: 本发明提供了一种用人尿液细胞作为饲养层培养人诱导多能干细胞的方法。用传代培养、冻存复苏后培养的第三至第十二代的人尿液细胞作为滋养层细胞培养由成年男性包皮成纤维细胞重编的人多能干细胞(hiPS)。本发明使用的人尿液细胞代替传统方法中用的小鼠胚胎成纤维细胞或鼠胚成纤维细胞系,培养人诱导多能干细胞,减少了培养体系中异源细胞的污染,且比间充质干细胞更易获得。并证明了该培养体系可使人诱导多能干细胞在体外扩增,且长期维持了hiPS细胞的生物学特性和多能干性,为hiPS进入临床应用提供了可能。
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公开(公告)号:CN106520687B
公开(公告)日:2019-12-27
申请号:CN201610888257.4
申请日:2016-10-12
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12N5/0775 , C12N5/071
摘要: 本发明公开一种诱导多能干细胞(iPSC)分化为间充质干细胞(MSC)的方法,该方法是将诱导形成的多能干细胞解离为单个细胞,在I型胶原蛋白包被的细胞板中采用iPSC培养基和含血小板衍生因子的分化培养基进行培养,然后更换为分化培养基获得MSC‑like细胞,最后使用MSC培养基使细胞成熟获得MSC。本诱导途径将iPSC直接分化为MSC,具有周期短、效率高和安全稳定等优点。
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公开(公告)号:CN108552156A
公开(公告)日:2018-09-21
申请号:CN201711126234.0
申请日:2017-11-13
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: A01N1/02
摘要: 本发明提供了一种诱导多功能干细胞冻存液及其冻存方法,其中冻存液由DMEM基础培养基、NEAA、KSR、DMSO和羟乙基淀粉等组成,冻存液成分明确,无动物血清污染,极具应用价值。冻存方法操作简便,不需要反复冻融和现配现用。采用本发明的冻存液及冻存方法冻存的细胞具有细胞活力好,增殖速度快等优点。对促进诱导多功能干细胞研究、建立诱导多功能干细胞库具有重大意义。
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公开(公告)号:CN108004203A
公开(公告)日:2018-05-08
申请号:CN201711170148.X
申请日:2017-11-20
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12N5/074
摘要: 本发明提供了一种用于诱导多能干细胞的培养基及其用途,该培养基以DMEM/F12为基础培养基,含有KSR、NEAA、Glutamine、β-Mercaptoethanol、bFGF、Rock抑制剂和HDAC抑制剂。本发明的多能干细胞诱导培养基中不含动物血清,避免了动物源性病原体的污染,提高了应用安全性。本诱导培养基可在无饲养层细胞的条件下将体细胞重编程为多能干细胞,具有高效、操作简单等优点。通过本发明获得的诱导多能干细胞能稳定传代培养、核型正常和具有多能性特征。
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公开(公告)号:CN107760654A
公开(公告)日:2018-03-06
申请号:CN201711170282.X
申请日:2017-11-20
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12N5/10
CPC分类号: C12N5/0696 , C12N2500/25 , C12N2500/32 , C12N2500/44 , C12N2501/235 , C12N2501/602 , C12N2501/603 , C12N2501/604 , C12N2501/606 , C12N2501/81 , C12N2506/02
摘要: 本发明提供了一种无血清、无饲养层的小鼠诱导多能干细胞诱导培养基和培养的方法。该培养基为无血清、无饲养层的培养基,可用于小鼠体细胞诱导形成iPSCs时作为诱导培养基,其能提高iPS细胞的诱导效率和缩短诱导时间。也可用于培养小鼠诱导多能干细胞。在该培养体系中,将小鼠iPS细胞经过20代的传代后,其仍能维持干细胞的多能性且维持着正常的细胞核型。此外,体内畸胎瘤实验进一步验证了在该培养体系中经20代的培养后,小鼠iPS细胞仍保持着多能干细胞的三胚层分化潜能。
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公开(公告)号:CN107937346B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201711169918.9
申请日:2017-11-20
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12N5/10 , C12N15/867
摘要: 本发明提供了一种用人尿液细胞作为饲养层培养人诱导多能干细胞的方法。用传代培养、冻存复苏后培养的第三至第十二代的人尿液细胞作为滋养层细胞培养由成年男性包皮成纤维细胞重编的人多能干细胞(hiPS)。本发明使用的人尿液细胞代替传统方法中用的小鼠胚胎成纤维细胞或鼠胚成纤维细胞系,培养人诱导多能干细胞,减少了培养体系中异源细胞的污染,且比间充质干细胞更易获得。并证明了该培养体系可使人诱导多能干细胞在体外扩增,且长期维持了hiPS细胞的生物学特性和多能干性,为hiPS进入临床应用提供了可能。
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公开(公告)号:CN108034580A
公开(公告)日:2018-05-15
申请号:CN201711126231.7
申请日:2017-11-13
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12M1/26
摘要: 本发明提供了一种无需用到解剖显微镜,只需在普通的倒置显微镜配合玻璃拉针和枪头即可进行多能干细胞克隆挑取的方法。该方法主要包括如下步骤:挑取多能干细胞克隆的玻璃拉针的制备;挑取多能干细胞克隆前的细胞换液和对克隆位置的标记;利用玻璃拉针从其他细胞和培养板中剥离出多能干细胞和利用200μL枪头吸取多能干细胞克隆。该方法简便易行,对于普通实验室可以节省购买解剖显微镜的成本。同时本发明提供的方法也适用于胚胎干细胞克隆的挑取和去除干细胞中分化的或者不纯的细胞,能作为一种纯化干细胞株,建立均一的、高纯度和高品质的干细胞株的方法。
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公开(公告)号:CN107904207A
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201711126491.4
申请日:2017-11-13
申请人: 广东艾时代生物科技有限责任公司
IPC分类号: C12N5/10
CPC分类号: C12N5/067 , C12N2501/115 , C12N2501/12 , C12N2501/155 , C12N2501/16 , C12N2501/39 , C12N2501/415 , C12N2501/998 , C12N2506/45 , C12N2510/00 , C12N2513/00
摘要: 本发明提供一种利用三维培养系统高效、均质地将人诱导性多能干细胞诱导分化为肝细胞的方法,是利用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制成的三维立体细胞培养支架,和/或联合多种诱导因子包括定型内胚层诱导因子、肝细胞生长因子等诱导人诱导性多能干细胞分化为成熟的肝细胞。本发明建立了一种新的获得人成熟肝细胞的方法,首次使用三维立体培养系统和/或联合多种诱导因子高效诱导人诱导性多能干细胞分化为成熟的肝细胞,为人诱导性多能干细胞诱导分化为肝细胞提供技术支持,并为肝病机理性研究、药物筛选等领域的研究提高细胞材料。
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