一种诱导多能干细胞向间充质干细胞分化的方法

    公开(公告)号:CN106520687B

    公开(公告)日:2019-12-27

    申请号:CN201610888257.4

    申请日:2016-10-12

    IPC分类号: C12N5/0775 C12N5/071

    摘要: 本发明公开一种诱导多能干细胞(iPSC)分化为间充质干细胞(MSC)的方法,该方法是将诱导形成的多能干细胞解离为单个细胞,在I型胶原蛋白包被的细胞板中采用iPSC培养基和含血小板衍生因子的分化培养基进行培养,然后更换为分化培养基获得MSC‑like细胞,最后使用MSC培养基使细胞成熟获得MSC。本诱导途径将iPSC直接分化为MSC,具有周期短、效率高和安全稳定等优点。

    一种用于诱导多能干细胞的培养基及其方法

    公开(公告)号:CN108004203A

    公开(公告)日:2018-05-08

    申请号:CN201711170148.X

    申请日:2017-11-20

    IPC分类号: C12N5/074

    摘要: 本发明提供了一种用于诱导多能干细胞的培养基及其用途,该培养基以DMEM/F12为基础培养基,含有KSR、NEAA、Glutamine、β-Mercaptoethanol、bFGF、Rock抑制剂和HDAC抑制剂。本发明的多能干细胞诱导培养基中不含动物血清,避免了动物源性病原体的污染,提高了应用安全性。本诱导培养基可在无饲养层细胞的条件下将体细胞重编程为多能干细胞,具有高效、操作简单等优点。通过本发明获得的诱导多能干细胞能稳定传代培养、核型正常和具有多能性特征。

    一种用人尿液细胞作为饲养层培养诱导多能干细胞的方法

    公开(公告)号:CN107937346B

    公开(公告)日:2021-02-19

    申请号:CN201711169918.9

    申请日:2017-11-20

    IPC分类号: C12N5/10 C12N15/867

    摘要: 本发明提供了一种用人尿液细胞作为饲养层培养人诱导多能干细胞的方法。用传代培养、冻存复苏后培养的第三至第十二代的人尿液细胞作为滋养层细胞培养由成年男性包皮成纤维细胞重编的人多能干细胞(hiPS)。本发明使用的人尿液细胞代替传统方法中用的小鼠胚胎成纤维细胞或鼠胚成纤维细胞系,培养人诱导多能干细胞,减少了培养体系中异源细胞的污染,且比间充质干细胞更易获得。并证明了该培养体系可使人诱导多能干细胞在体外扩增,且长期维持了hiPS细胞的生物学特性和多能干性,为hiPS进入临床应用提供了可能。

    一种利用玻璃拉针挑取多能干细胞克隆的方法

    公开(公告)号:CN108034580A

    公开(公告)日:2018-05-15

    申请号:CN201711126231.7

    申请日:2017-11-13

    IPC分类号: C12M1/26

    摘要: 本发明提供了一种无需用到解剖显微镜,只需在普通的倒置显微镜配合玻璃拉针和枪头即可进行多能干细胞克隆挑取的方法。该方法主要包括如下步骤:挑取多能干细胞克隆的玻璃拉针的制备;挑取多能干细胞克隆前的细胞换液和对克隆位置的标记;利用玻璃拉针从其他细胞和培养板中剥离出多能干细胞和利用200μL枪头吸取多能干细胞克隆。该方法简便易行,对于普通实验室可以节省购买解剖显微镜的成本。同时本发明提供的方法也适用于胚胎干细胞克隆的挑取和去除干细胞中分化的或者不纯的细胞,能作为一种纯化干细胞株,建立均一的、高纯度和高品质的干细胞株的方法。