一种副猪嗜血杆菌5型500L发酵罐的高密度培养方法

    公开(公告)号:CN106434479B

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN201610948591.4

    申请日:2016-10-26

    IPC分类号: C12N1/20 C12R1/21

    摘要: 本发明涉及一种副猪嗜血杆菌5型500L发酵罐的高密度培养方法。该方法步骤如下:A、将冻干副猪嗜血杆菌5型用TSA平板活化18~24h,至单菌落长出;B、挑取4~8个单菌落至TSB摇瓶一级种子培养基中,培养6~14h至OD600值达到0.8~1.6;C、以1%~5%V/V接种量将一级种子液转接自配二级摇瓶种子培养基,培养8~14h至OD600值达到2.0~3.5;D、将二级种子液以1%~5%V/V接种量接种于500L发酵罐的灭菌培养基中,发酵罐中盛有发酵罐培养基,培养条件为:温度35~39℃、罐压0.02~0.1Mpa、溶氧20~50%、pH7.3~7.8,培养至pH值稳定及溶氧回升时,放罐收菌得到。该方法原料制备简单,成本低廉,既能保证副猪嗜血杆菌生长旺盛,进行正常代谢,又能提高生长速度,生产周期短,活菌数较高,一般活菌数为72~80亿/毫升,完全能适应于副猪嗜血杆菌5型疫苗生产。

    一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN111635876A

    公开(公告)日:2020-09-08

    申请号:CN202010548417.7

    申请日:2020-06-16

    IPC分类号: C12N1/20 C12R1/35

    摘要: 本发明涉及微生物技术领域,具体公开了一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法与应用。本发明的猪肺炎支原体培养基,包括肌醇,并进一步包括配合所述肌醇添加的PPLO肉汤、脑心浸粉、胰蛋白胨和丙酮酸钠。本发明发现,当在猪肺炎支原体培养基中加入肌醇,并配合特定的营养物质选择时,可部分替代血清在培养基中的作用,从而在降低血清用量的情况下,仍提升了增殖效率,实现了低血清下的高密度培养。极大地降低了生产成本,提高了产品纯度,减轻了血清对猪体的过敏应激反应,提高了抗原的效价,适于应用于猪肺炎支原体疫苗的生产。