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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110982769B
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN201911338988.1
申请日：2019-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种强化丙酮酸有效利用提高亮氨酸产量的谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，敲除谷氨酸棒杆菌中参与胞内草酰乙酸回补途径的丙酮酸羧化酶基因pyc、参与丙氨酸合成的丙氨酸转氨酶基因avtA；同时为弱化竞争支路丙氨酸合成能力，在alaT基因前添加T3终止子弱化其表达水平，实现重组菌胞内丙酮酸的有效利用，获得了L‑亮氨酸产量提高的重组谷氨酸棒杆菌。该重组谷氨酸棒杆菌的亮氨酸产量比出发菌株提高了15.3％。此发明成功强化了丙酮酸的利用，提高了丙酮酸到L‑亮氨酸的合成通量，这也为选育丙酮酸族氨基酸高产菌提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN110982768A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911337548.4
申请日：2019-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种强化谷氨酸棒杆菌中丙酮酸合成L-亮氨酸能力的方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，为调控L-亮氨酸合成代谢通量，在ilvBNC操纵子和leuA基因的启动子序列位点替换为Ptuf启动子；同时为进一步强化丙酮酸合成亮氨酸代谢通量，过表达关键酶基因异丙基苹果酸合成酶IPMS。构建了高效的L-亮氨酸合成途径并弱化了谷氨酸棒杆菌L-亮氨酸产生菌中L-缬氨酸的合成通量。重组菌经发酵摇瓶实验，重组菌株WL-14产28.47±0.36g/L亮氨酸，比出发菌株WL-8的亮氨酸产量提高56.8％，而菌株WL-14中缬氨酸积累量降低到1.78±0.21g/L。
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公开(公告)号：CN110643648A
公开(公告)日：2020-01-03
申请号：CN201911024821.8
申请日：2019-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效利用淀粉生产L-亮氨酸的方法，属于生物催化技术领域。本发明通过对棒杆菌属的L-亮氨酸产生菌进行温度诱导的适应性进化处理，提高菌株对高温的耐受性。随后，在此突变菌株基础上异源表达来源于芽孢杆菌属微生物(如B.amyloliquefaciens)中α-淀粉酶编码基因，在棒杆菌属的L-亮氨酸产生菌中构建了可高效利用淀粉的代谢途径，从而改善了最适菌体生长温度与α-淀粉酶最适作用温度不一致的的缺点，获得了高效利用淀粉生产L-亮氨酸的重组谷氨酸棒杆菌。
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公开(公告)号：CN110982769A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911338988.1
申请日：2019-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种强化丙酮酸有效利用提高亮氨酸产量的谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，敲除谷氨酸棒杆菌中参与胞内草酰乙酸回补途径的丙酮酸羧化酶基因pyc、参与丙氨酸合成的丙氨酸转氨酶基因avtA；同时为弱化竞争支路丙氨酸合成能力，在alaT基因前添加T3终止子弱化其表达水平，实现重组菌胞内丙酮酸的有效利用，获得了L-亮氨酸产量提高的重组谷氨酸棒杆菌。该重组谷氨酸棒杆菌的亮氨酸产量比出发菌株提高了15.3％。此发明成功强化了丙酮酸的利用，提高了丙酮酸到L-亮氨酸的合成通量，这也为选育丙酮酸族氨基酸高产菌提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN110982768B
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN201911337548.4
申请日：2019-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种强化谷氨酸棒杆菌中丙酮酸合成L‑亮氨酸能力的方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，为调控L‑亮氨酸合成代谢通量，在ilvBNC操纵子和leuA基因的启动子序列位点替换为Ptuf启动子；同时为进一步强化丙酮酸合成亮氨酸代谢通量，过表达关键酶基因异丙基苹果酸合成酶IPMS。构建了高效的L‑亮氨酸合成途径并弱化了谷氨酸棒杆菌L‑亮氨酸产生菌中L‑缬氨酸的合成通量。重组菌经发酵摇瓶实验，重组菌株WL‑14产28.47±0.36g/L亮氨酸，比出发菌株WL‑8的亮氨酸产量提高56.8％，而菌株WL‑14中缬氨酸积累量降低到1.78±0.21g/L。
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