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公开(公告)号：CN114220492B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202111546549.7
申请日：2021-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种基于等温压缩系数扰动对酶进行再设计的方法、应用及通过此方法筛选出的突变体，属于计算化学，生物信息学，基因工程以及蛋白质工程技术领域。该方法包括以下步骤：通过等温压缩系数扰动筛选出位于蛋白质表面远离活性中心的高波动区域，对筛选出的高波动区域上的氨基酸进行虚拟饱和突变，筛选出突变后吉布斯自由能变小的突变体，得到再设计后的酶；其中，等温压缩系数的扰动模式为加压。本发明的方法克服了现有技术中筛选高波动区域缺乏全局性的问题，以及酶的稳定性和活性不能同时提高的问题，为酶的设计优化提供了一种能够广泛适用的方法，提高了酶在工业上的应用价值。
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公开(公告)号：CN114027458A
公开(公告)日：2022-02-11
申请号：CN202111410412.9
申请日：2021-11-23
Applicant: 江南大学
IPC: A23L13/40
Abstract: 本发明公开了一种以脂质泡包埋肉味香精制备羊肉专用块状脂肪的方法，属于食品油脂加工领域。本发明以脂质泡为载体，对添加有4‑烷基支链脂肪酸组分的羊肉味香精进行包埋，采用溶剂注入法制备类脂囊泡体系；再将其与魔芋复配凝胶结合，添加乳化植物油，经过混合、均质、交联形成具有粘弹性的块状脂肪模拟物。本发明将脂质泡和魔芋复配凝胶结合制备了羊肉专用块状脂肪模拟物，弥补了羊肉脂肪模拟物研究的空缺。该块状脂肪具有与羊肉脂肪相似的细嫩质地以及稳定逼真的特征风味，提升脂肪食用时的滋味口感，可以替代羊肉脂肪应用到人造肉食品的加工中，增加人造肉产品的仿真度和可接受度。
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公开(公告)号：CN110982769B
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN201911338988.1
申请日：2019-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种强化丙酮酸有效利用提高亮氨酸产量的谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，敲除谷氨酸棒杆菌中参与胞内草酰乙酸回补途径的丙酮酸羧化酶基因pyc、参与丙氨酸合成的丙氨酸转氨酶基因avtA；同时为弱化竞争支路丙氨酸合成能力，在alaT基因前添加T3终止子弱化其表达水平，实现重组菌胞内丙酮酸的有效利用，获得了L‑亮氨酸产量提高的重组谷氨酸棒杆菌。该重组谷氨酸棒杆菌的亮氨酸产量比出发菌株提高了15.3％。此发明成功强化了丙酮酸的利用，提高了丙酮酸到L‑亮氨酸的合成通量，这也为选育丙酮酸族氨基酸高产菌提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN110982768A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911337548.4
申请日：2019-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种强化谷氨酸棒杆菌中丙酮酸合成L-亮氨酸能力的方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，为调控L-亮氨酸合成代谢通量，在ilvBNC操纵子和leuA基因的启动子序列位点替换为Ptuf启动子；同时为进一步强化丙酮酸合成亮氨酸代谢通量，过表达关键酶基因异丙基苹果酸合成酶IPMS。构建了高效的L-亮氨酸合成途径并弱化了谷氨酸棒杆菌L-亮氨酸产生菌中L-缬氨酸的合成通量。重组菌经发酵摇瓶实验，重组菌株WL-14产28.47±0.36g/L亮氨酸，比出发菌株WL-8的亮氨酸产量提高56.8％，而菌株WL-14中缬氨酸积累量降低到1.78±0.21g/L。
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公开(公告)号：CN110643648A
公开(公告)日：2020-01-03
申请号：CN201911024821.8
申请日：2019-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效利用淀粉生产L-亮氨酸的方法，属于生物催化技术领域。本发明通过对棒杆菌属的L-亮氨酸产生菌进行温度诱导的适应性进化处理，提高菌株对高温的耐受性。随后，在此突变菌株基础上异源表达来源于芽孢杆菌属微生物(如B.amyloliquefaciens)中α-淀粉酶编码基因，在棒杆菌属的L-亮氨酸产生菌中构建了可高效利用淀粉的代谢途径，从而改善了最适菌体生长温度与α-淀粉酶最适作用温度不一致的的缺点，获得了高效利用淀粉生产L-亮氨酸的重组谷氨酸棒杆菌。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109294966A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811256384.8
申请日：2018-10-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产L-亮氨酸的谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，替换谷氨酸棒杆菌中NADP依赖型支链氨基酸转氨酶为来源于球形芽孢杆菌NAD依赖型亮氨酸脱氢酶LeuDH，构建新的、高效的L-亮氨酸合成途径并解决谷氨酸棒杆菌L-亮氨酸产生菌中NADH积累量过多，NADPH供应量不足的缺点，增强重组菌株中L-亮氨酸合成能力并提高菌株积累NADPH的能力。重组菌经摇瓶发酵实验，L-亮氨酸积累量达16.7g·L-1，最大比生长速率为0.23g·L-1·h-1，高于出发菌株的13.2g·L-1和0.18g·L-1·h-1。此发明成功改造了谷氨酸棒杆菌中L-亮氨酸合成途径，改善了胞内辅因子不平衡的缺点，为选育L-亮氨酸高产菌提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN117503789A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202311291955.2
申请日：2023-10-08
Applicant: 江南大学附属医院
IPC: A61K31/7068 , A61P19/08 , A61P19/10 , A23L33/13
Abstract: 本发明公开了CMP‑Neu5Ac在制备促进骨生长的食品及药物中的应用，属于生物医药食品领域。本发明首次发现CMP‑Neu5Ac对于预防或治疗骨质疏松具有一定的效果：本发明发现CMP‑Neu5Ac能够：(1)增强人骨髓间充质干细胞H‑BMSC和小鼠颅顶前骨细胞的ALP活性；(2)增强人骨髓间充质干细胞H‑BMSC和小鼠颅顶前骨细胞往成骨细胞分化的能力；(3)上调成骨相关基因ALP、OCN和BSP的表达；(4)增加骨质疏松模型组小鼠的血清骨形成标志物含量，同时降低血清骨吸收标志物含量，且增加骨量及骨小梁厚度与数量，降低骨小梁间隙。本发明证明了CMP‑Neu5Ac具有促进骨骼发育、对抗骨质疏松症的功能。本发明为研究促进骨形成、防治骨质疏松的策略提供了新的理论依据，为制备新的预防和治疗骨质疏松的药物或者功能食品提供了新的方案。
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公开(公告)号：CN114330025A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210059055.4
申请日：2022-01-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种空腔工程化技术提高酶热稳定性和催化活性的方法，属于生物信息学、计算化学、生物工程、生物物理及蛋白质工程等领域。本发明首先以分子动力学模拟(MD)蛋白运动，通过聚类分析挑选出代表性构象后通过AQUA‑DUCT分析模拟轨迹并筛选出蛋白内部关键空腔，再筛选出组成关键内部空腔附近的氨基酸残基同时排除结合活性位点一定范围的氨基酸残基，再结合多尺度自由能计算软件以能量为指标对上述残基位点执行饱和突变，经筛选获得潜在的阳性突变体。利用本发明方法得到的阳性突变率最高达到90％，酶的热稳定性和催化活性均得到增强，具有非常高的应用潜力。
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公开(公告)号：CN110982768B
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN201911337548.4
申请日：2019-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种强化谷氨酸棒杆菌中丙酮酸合成L‑亮氨酸能力的方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，为调控L‑亮氨酸合成代谢通量，在ilvBNC操纵子和leuA基因的启动子序列位点替换为Ptuf启动子；同时为进一步强化丙酮酸合成亮氨酸代谢通量，过表达关键酶基因异丙基苹果酸合成酶IPMS。构建了高效的L‑亮氨酸合成途径并弱化了谷氨酸棒杆菌L‑亮氨酸产生菌中L‑缬氨酸的合成通量。重组菌经发酵摇瓶实验，重组菌株WL‑14产28.47±0.36g/L亮氨酸，比出发菌株WL‑8的亮氨酸产量提高56.8％，而菌株WL‑14中缬氨酸积累量降低到1.78±0.21g/L。
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公开(公告)号：CN118001291A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202311805597.2
申请日：2023-12-25
Applicant: 江南大学附属医院
IPC: A61K31/7068 , A61P3/04 , A61P3/10 , A61P3/06 , A61P1/16 , A23L33/125 , A23L19/00 , A23L11/00 , A23C9/152
Abstract: 本发明公开了CMP‑Neu5Ac在制备降脂降糖药物和食品中的应用，属于生物医药食品领域。本发明首次发现CMP‑Neu5Ac对于预防或治疗糖脂代谢障碍具有一定的效果：本发明发现CMP‑Neu5Ac能够：(1)抑制HepG2及3T3‑L1细胞内脂质堆积；(2)抑制皮下、附睾和/或肝脏脂肪堆积，和/或降低体重；(3)降低血清中的甘油三脂、胆固醇、高密度脂蛋白和/或低密度脂蛋白含量；(4)增加胰岛素的敏感性；(5)促进棕色脂肪产热，增加能量消耗。本发明为研究糖脂代谢障碍的治疗策略提供了新的理论依据，为制备新的预防和治疗糖脂代谢障碍的药物或者功能食品提供了新的方案。
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