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公开(公告)号：CN115927527B
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202310040445.1
申请日：2023-01-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种MK‑7高产菌的筛选方法，属于微生物育种技术领域。本发明通过组合使用ARTP诱变和原生质体融合技术，结合六种结构类似物抗性特征进行菌株筛选。本发明选择的六种结构类似物抗性特征，能够快速的帮助筛选到高产MK‑7的目的菌株。经过两轮育种最终得到一株同时具有磺胺胍、1‑羟基‑2‑萘甲酸、甲萘醌、2‑脱氧‑D‑葡萄糖、利福平抗性和β‑氟丙酮酸敏感型的菌株，并且该菌的MK‑7产量得到大幅提升。该菌在摇瓶发酵6d后的MK‑7产量达到了73.57±1.61mg/L，相比出发菌株H.β.D.R.‑5提升了1.36倍。
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公开(公告)号：CN115927527A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202310040445.1
申请日：2023-01-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种MK‑7高产菌的筛选方法，属于微生物育种技术领域。本发明通过组合使用ARTP诱变和原生质体融合技术，结合六种结构类似物抗性特征进行菌株筛选。本发明选择的六种结构类似物抗性特征，能够快速的帮助筛选到高产MK‑7的目的菌株。经过两轮育种最终得到一株同时具有磺胺胍、1‑羟基‑2‑萘甲酸、甲萘醌、2‑脱氧‑D‑葡萄糖、利福平抗性和β‑氟丙酮酸敏感型的菌株，并且该菌的MK‑7产量得到大幅提升。该菌在摇瓶发酵6d后的MK‑7产量达到了73.57±1.61mg/L，相比出发菌株H.β.D.R.‑5提升了1.36倍。
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公开(公告)号：CN115786153A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211512854.9
申请日：2022-11-28
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12P5/02 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种高产法尼烯的毕赤酵母重组菌及其构建方法与应用，本发明以毕赤酵母菌株X33中代谢改造三个模块的途径来增强α‑法尼烯合成途径来增加α‑法尼烯的产量：主要的MVA生物合成模块、法尼基焦磷酸(FPP)分支模块和胞质乙酰辅酶A供应模块。主要选择了合适的启动子来控制关键酶的表达水平，以加强主要MVA生物合成模块和胞质乙酰辅酶A供应模块，并结合强化法尼烯合酶的表达和削弱巴斯德毕赤酵母X33中的FPP竞争基因的表达。最终，获得了一株能以葡萄糖为底物高产α‑法尼烯的重组菌株。
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公开(公告)号：CN110982768B
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN201911337548.4
申请日：2019-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种强化谷氨酸棒杆菌中丙酮酸合成L‑亮氨酸能力的方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，为调控L‑亮氨酸合成代谢通量，在ilvBNC操纵子和leuA基因的启动子序列位点替换为Ptuf启动子；同时为进一步强化丙酮酸合成亮氨酸代谢通量，过表达关键酶基因异丙基苹果酸合成酶IPMS。构建了高效的L‑亮氨酸合成途径并弱化了谷氨酸棒杆菌L‑亮氨酸产生菌中L‑缬氨酸的合成通量。重组菌经发酵摇瓶实验，重组菌株WL‑14产28.47±0.36g/L亮氨酸，比出发菌株WL‑8的亮氨酸产量提高56.8％，而菌株WL‑14中缬氨酸积累量降低到1.78±0.21g/L。
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公开(公告)号：CN112481244A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011423170.2
申请日：2020-12-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种天冬氨酸酶突变体及其编码基因、载体、重组菌与应用。本发明通过对来自Bacillus sp.YM55‑1的天冬氨酸酶进行突变，将318位Ser突变成Thr，能够使天冬氨酸脱氨反应效率极大降低，也使富马酸胺化反应变化不大，这可能解决工业上富马酸转化率低的问题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109554410B
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN201811535465.1
申请日：2018-12-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用于锁掷酵母高密度发酵的流加补料方法，属于微生物发酵技术领域。本发明的氮源采用流加补料的方式加入，并降低初糖浓度，达到降低发酵液中蛋白质浓度和粘度的目的，来减少泡沫的产生量和其稳定性。与原有分批发酵工艺相比，本发明有效的改善了锁掷酵母高密度发酵过程中由严重起泡引起的逃液现象，且消泡剂的加入量降低67％，放罐体积增加了77％，显著提高了单位产量，降低了单位成本。本发明的流加补料分批发酵方法在有效控制泡沫的同时显著提高了菌体产量，菌体干重由58g/L增长为68g/L，油脂产量由29g/L增长为34g/L，且菌体转化率和油脂转化率有所提高，在工业化发酵中具有降本增效作用，给其他酵母的高密度发酵技术工艺提供相关启示。
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公开(公告)号：CN117904068A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410098983.0
申请日：2024-01-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种针对L‑色氨酸甲基化的甲基转移酶突变体及其编码基因、载体、重组菌与应用。本发明通过对来自Mycolicibacterium smegmatis ATCC700084的甲基转移酶进行突变，将163位Thr突变为Gly,252位Met突变成Val和282位Glu突变成Ala，使其能以L‑色氨酸为底物经三次迭代甲基化催化合成L‑刺桐碱，有望实现利用E.coli全细胞合成L‑刺桐碱，为建立生产成本低、生产强度高和环境污染小的工业化生产L‑刺桐碱工艺提供理论和技术基础。
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公开(公告)号：CN113564138A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202111034043.8
申请日：2021-09-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用。本发明通过对来自C.glutamicum XQ‑5的二氨基庚二酸脱氢酶进行突变，将36位Arg突变成Glu，酶以NADH为辅酶的活力大于以NADPH为辅酶的活力，一定程度上实现了辅酶偏好性转变。辅酶NAD(H)和NADP(H)相比而言，NAD(H)有稳定性好、价格低廉及更广的辅酶循环再生方法等优势，可以推进该酶的工业化应用。
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公开(公告)号：CN111411067A
公开(公告)日：2020-07-14
申请号：CN202010279913.7
申请日：2020-04-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产2,5-二甲基吡嗪的大肠杆菌重组菌及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明应用基因工程方法，在一种高产L-苏氨酸的大肠杆菌K-12中过表达L-苏氨酸脱氢酶TDH并异源表达来源于乳球菌属微生物的NADH氧化酶NoxE和来源于链球菌属微生物的氨基丙酮氧化酶AAOSO，同时敲除2-氨基-3-酮丁酸CoA连接酶KBL和伯胺氧化酶TynA。从而构建出新的、高效的2,5-二甲基吡嗪合成途径，并解决重组菌中辅因子不平衡问题。以大肠杆菌E.coli THR为例，重组菌经36h摇瓶发酵实验，2,5-二甲基吡嗪积累量达1.2±0.2g/L。此发明以L-苏氨酸高产菌为出发菌，成功重建了大肠杆菌中2,5-二甲基吡嗪合成途径，改善了胞内辅因子不平衡的缺点，为选育2,5-二甲基吡嗪提供了新的思路。
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