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公开(公告)号：CN102392037A
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN201110410537.1
申请日：2011-12-12
申请人： 江南大学
摘要： 本发明提出了一种源自黑曲霉(Aspergillus niger)LW-1菌株的新型的酸性β-甘露聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该木聚糖酶属于糖苷水解酶第5家族，命名为An Man5A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为An man5A。本发明还公开了An Man5A工程菌的构建以及重组GS115/man5A的高效表达和纯化的方法，制备的重组Man5A的最适作用温度和pH分别为70℃和4.0，在pH 2.5-7.5、60℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102154251A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010602818.2
申请日：2010-12-24
申请人： 江南大学
摘要： 一种利用黑曲霉生产羧肽酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明采用麸皮、豆饼粉和玉米粉等农副产品为发酵基料，通过适当改变培养基中碳源和氮源的比例，优化酶液提取时间，利用黑曲霉(Aspergillus niger)LW-1菌株固态发酵生产羧肽酶。本发明提供了实验室小试生产的固态发酵培养基配方和培养条件，成熟发酵曲料的羧肽酶活性达到3194.4U/g～5584.2U/g。本发明具有设备简单、投入少、见效快、生产成本低廉、对环境友好以及羧肽酶活性较高等特点，有利于羧肽酶的开发和利用，具有较高的经济和实用价值。
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公开(公告)号：CN102154240A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010550873.1
申请日：2010-11-19
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N9/42
摘要： 一种利用宇佐美曲霉生产壳聚糖酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明以麸皮、豆饼粉和菜籽饼粉等农副产品为发酵基料，并添加适量的无机氮源、壳聚糖、无机盐和表面活性剂等，利用宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株固态发酵生产壳聚糖酶。本发明提供了宇佐美曲霉E001菌株实验室小试生产壳聚糖酶的固态发酵培养基配方和培养条件，其成熟发酵曲料的壳聚糖酶活性达到1942～2461U/g干曲。本发明具有设备简单、投入少、见效快、生产成本低廉、对环境友好以及壳聚糖酶发酵酶活性较高等特点，有利于壳聚糖酶的开发和利用，具有较高的经济和实用价值。
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公开(公告)号：CN102127560A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201010581407.X
申请日：2010-12-10
申请人： 江南大学
摘要： 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型β-1，4-内切木聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆和分析方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该β-1，4-内切木聚糖酶是在A.usamii E001中发现的第四种11家族的木聚糖酶，所以命名为Aus Xyn11D，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus xyn11D。这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础，有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值，也为其它β-1，4-内切木聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号：CN103642768A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310666412.4
申请日：2013-12-10
申请人： 江南大学
CPC分类号： C12N9/18 , C12N15/815 , C12Y301/01072
摘要： 本发明提出了一种源于Aspergillus usamii E001的新型乙酰木聚糖酯酶成熟肽cDNA序列的克隆及表达方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1，相应的氨基酸序列为SEQ ID NO：2，相应的基因命名为Auaxe。本发明还公开了产乙酰木聚糖酯酶工程菌的构建以及重组乙酰木聚糖酯酶的高效表达方法，该酶能有效地消除乙酰基团对木聚糖酶作用时的空间阻碍作用，在提高纤维资源的生物降解性，开发为饲料酶制剂投入工业化生产及生物漂白等方面显示出良好的效果，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102492675A
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201110410434.5
申请日：2011-12-12
申请人： 江南大学
摘要： 本发明提出了一种底物亲和力强、催化效率高的AusMan5A-TviCBM融合酶的设计与构建的方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO：2，相应的基因命名为man5A-cbm。本发明还公开了融合酶工程菌的构建以及高效表达和纯化的方法，制备的融合酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102169532A
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN201010581438.5
申请日：2010-12-10
申请人： 江南大学
摘要： 本发明基于34条微生物脂肪酶氨基酸序列以及多元逐步回归分析法，提出了一种与脂肪酶最适温度相关的氨基酸及其二肽的计算方法。结果显示：与酶最适温度呈正相关性的氨基酸是Y，呈负相关性的有I、S、K；呈正相关性的氨基酸二肽有IR、KS、NY、SA、ST和YR，负相关性的有DK、DY、IS、KA、WS、YS和QI。通过最优回归方程检验，发现用相关氨基酸二肽计算出的最适温度与实验最适温度更接近。由此结果不仅能确定与脂肪酶最适温度相关的氨基酸，而且还可根据氨基酸二肽确定相关氨基酸与邻近氨基酸的相互作用对热稳定性的影响。能为脂肪酶热稳定机制的阐明、热稳定性的蛋白质工程改造等奠定理论基础。
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公开(公告)号：CN102140500A
公开(公告)日：2011-08-03
申请号：CN201010550843.0
申请日：2010-11-19
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明是一种涉及限制性内切酶酶切、pUCm-T载体和巢式PCR扩增等技术，基于已知DNA序列确定其5′端侧翼未知DNA序列的方法。该方法通过选用限制性内切酶酶切基因组DNA，纯化的酶切产物用Taq酶或Ex Taq酶进行补齐和3′端加A反应，与pUCm-T载体连接；利用引物设计软件选定T载体上T/A克隆位点上游的一段序列作为5′端引物，选定两条靠近未知序列端的已知DNA序列上的互补序列作为3′端引物；以pUCm-T载体连接物为模板，采用设计的引物进行巢式PCR扩增，并对其扩增片段进行克隆和测序。本发明具有操作简便、应用范围广、操作限制少、结果验证简捷、未知序列长度不限和成本低廉等特点。
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公开(公告)号：CN103642875A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310666360.0
申请日：2013-12-10
申请人： 江南大学
摘要： 本发明提供了一种从魔芋粉中制备低聚甘露糖的方法。利用来源于本实验室的重组β-甘露聚糖酶(reAuMan5AN3C3)和重组β-内切葡聚糖酶(reAuCell2A)协同作用对魔芋粉进行酶解，得到低聚甘露糖。该方法所用的关键酶的催化效率较高、酶的生产和使用成本较低、周期短、无污染，有较大的工业化生产、应用潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102703403A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210181372.X
申请日：2012-06-05
申请人： 江南大学
摘要： 本发明提出了一种源于Aspergillus usamii E001的新型A类阿魏酸酯酶基因成熟肽cDNA序列的克隆及表达的方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1，相应的氨基酸序列为SEQ ID NO：2，相应的基因命名为Aus Fae-A。本发明还公开了产阿魏酸酯酶工程菌的构建以及重组阿魏酸酯酶的高效表达的方法，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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