通过N端增加二硫键提高米曲霉木聚糖酶热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN102978223A

    公开(公告)日:2013-03-20

    申请号:CN201210562539.7

    申请日:2012-12-24

    申请人: 江南大学

    摘要: 通过N端增加二硫键提高米曲霉木聚糖酶热稳定性的方法。本发明提出了一种新型的利用计算机技术与生物信息学方法对常温的木聚糖酶进行定向改造的方法,运用基因工程的方法构建具有高效表达能力的杂合木聚糖酶工程菌。将来源于米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 40186菌株的常温木聚糖酶基因进行热稳定性定向改造,获得了一种杂合木聚糖酶,其热稳定性有了一定的提高,相对于原酶而言活性没有降低,作为一种耐热型的酶制剂,该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

    一种截短的甘露聚糖酶的设计与制备

    公开(公告)号:CN102994531A

    公开(公告)日:2013-03-27

    申请号:CN201210562588.0

    申请日:2012-12-24

    申请人: 江南大学

    摘要: 一种截短的甘露聚糖酶的设计与制备。本发明提出了一种催化效率和表达水平较高的dAus Man5A截短酶的设计与构建的方法,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1,氨基酸序列为SEQ ID NO:2,相应的基因命名为dAusman5A。本发明还公开了截短酶工程菌的构建以及高效表达的方法,制备的截短酶具有表达水平和催化效率高的特性,具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

    β-1,4-内切木聚糖酶(AorXyn10B)基因的克隆及序列分析

    公开(公告)号:CN102492708A

    公开(公告)日:2012-06-13

    申请号:CN201110410508.5

    申请日:2011-12-12

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12N15/56 C12N9/42 C12N15/10

    摘要: 本发明提出了一种源自米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 40186的新型10家族木聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法及分析,其核苷酸序列分别为SEQ IDNO:1和SEQ ID NO:2。生物信息学分析表明该木聚糖酶属于糖苷水解酶第10家族,命名为Aor Xyn10B,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aor xyn10B。这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础。作为一种新型酶制剂,该木聚糖酶具有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值,也为其它木聚糖酶的研究奠定了理论基础。

    β-1,4-内切壳聚糖酶(AusCsnA)基因的克隆及重组酶的制备

    公开(公告)号:CN102392035A

    公开(公告)日:2012-03-28

    申请号:CN201110410463.1

    申请日:2011-12-12

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型壳聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。生物信息学分析表明该壳聚糖酶属于糖苷水解酶第75家族,命名为Aus CsnA,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aus csnA。本发明还公开了Aus CsnA工程菌的构建以及重组Aus CsnA的高效表达和纯化的方法,制备的重组Aus CsnA的最适作用温度和pH分别为50℃和5.0,在pH 4.0-7.0、50℃以下稳定,具有较大的工业化生产潜力和经济价值。