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公开(公告)号：CN110499300B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201910777811.5
申请日：2019-08-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑异丙基苹果酸脱氢酶及其在脂质合成中的应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的β‑异丙基苹果酸脱氢酶具有促进微生物产脂肪酸的功能，将含有本发明β‑异丙基苹果酸脱氢酶的重组高山被孢霉摇床培养7d，可使含有本发明β‑异丙基苹果酸脱氢酶的高山被孢霉中的脂肪酸含量达细胞干重的46.4％，较不含本发明β‑异丙基苹果酸脱氢酶的高山被孢霉提升20.2％，该结果为通过基因工程手段进一步提升高山被孢霉等产油微生物产脂肪酸的能力，进而为提高脂肪酸的生物合成能力提供了充实的理论支持。
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公开(公告)号：CN115838641A
公开(公告)日：2023-03-24
申请号：CN202211634866.9
申请日：2022-12-19
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/15 , C12N15/80 , C12N15/52 , C12P7/64 , C12P7/6463 , C12P7/6409 , C12P7/6427 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种利用乙酰‑CoA合成酶(ACS)提高产油微生物乙酸盐耐受度和脂质积累的方法，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明在高山被孢霉中对其内源组成型MaACS进行过表达，提高了重组菌对乙酸盐的耐受度、脂质产量和以花生四烯酸(ARA)为代表的多不饱和脂肪酸(PUFAs)比例，并采用了一种以乙酸铵为氮源的培养基进一步提高其脂质积累。本发明还利用CRISPR/Cpf1多基因操作系统进一步优化乙酰‑CoA代谢途径，在过表达所述MaACS的同时组合表达柠檬酸裂解酶(ACL1)进一步强化乙酰‑CoA供应，或表达葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶(G6PD2)平衡还原力NADPH的供给避免乙酰‑CoA外溢，或敲低对脂质积累有负调控的蔗糖非发酵型蛋白激酶复合体SNF1γ亚基提高乙酰‑CoA羧化酶1(ACC1)活性。
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公开(公告)号：CN113604459A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202111023465.5
申请日：2021-08-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明披露了磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶是糖异生途径的限速酶，参与胞内碳通量的分配，该基因对总脂质积累和多不饱和脂肪酸积累均有负调控作用。本发明通过抑制高山被孢霉的Mapepck基因的表达，可以降低糖异生水平并导致总糖水平下降从而促进脂质的积累，并在发酵后期显著提高花生四烯酸ARA产量，还能使菌株提前到达脂质最大积累时间，相比于出发菌株更具有产脂优势。本发明在工业生产中具备广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN112592926A
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN202011576687.5
申请日：2020-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种CRISPR系统及其在高山被孢霉中的应用，属于生物工程技术领域技术领域。本发明采用的核酸酶为毛螺科菌(Lachnospiraceae bacterium)的LbCpf1，所使用的诱导型启动子为里氏木霉(Trichoderma reesei)中的cbh1，所选靶向基因为尿嘧啶基因ura5，所用的出发菌株为高山被孢霉尿嘧啶营养缺陷型MAU1，本发明提供的基于CRISPR技术的高山被孢霉系统，可实现生物量和产脂含量与野生菌无显著性差异，并可以实现多基因表达，此方法将为构建高工业价值的重组高山被孢霉提供技术手段。
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公开(公告)号：CN110656097B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201910870749.4
申请日：2019-09-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖非发酵型蛋白激酶调节亚基及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蔗糖非发酵型蛋白激酶调节亚基具有响应胞外营养水平并调控脂质代谢的功能，参与了菌体对胞外葡萄糖水平的响应。该基因对生长和脂质积累均有负调控作用，在葡萄糖限制的条件下可通过抑制高山被孢霉生长和增强脂肪酸的分解代谢为菌体供能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110656097A
公开(公告)日：2020-01-07
申请号：CN201910870749.4
申请日：2019-09-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖非发酵型蛋白激酶调节亚基及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蔗糖非发酵型蛋白激酶调节亚基具有响应胞外营养水平并调控脂质代谢的功能，参与了菌体对胞外葡萄糖水平的响应。该基因对生长和脂质积累均有负调控作用，在葡萄糖限制的条件下可通过抑制高山被孢霉生长和增强脂肪酸的分解代谢为菌体供能。
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公开(公告)号：CN110331099A
公开(公告)日：2019-10-15
申请号：CN201910704265.2
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产油丝状真菌遗传改造菌株的快速筛选方法，属于微生物技术领域。本发明以表征脱氢酶活性的氯化三苯基四氮唑(TTC)为筛选指示剂并在筛选培养基中进行应用，确定了这一培养基的配方和使用方法，建立了一种在产油微生物遗传改造实验中快速区分及挑选转化子的培养基和实验方法。所述筛选方法能够准确且高效地区分转化子与非转化子，缩短重组菌株筛选的时间，所获转化子均为阳性，可正常生长及产脂，为产油微生物的遗传改造实验提供了极大便利。
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公开(公告)号：CN117660453A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311587257.7
申请日：2023-11-27
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12P7/6454 , C12P7/6481 , C12P7/6432 , C12P7/6427 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种响应氮饥饿信号的启动子在定向调控基因转录用中的应用，属于微生物代谢工程和分子生物学研究领域。本发明利用外源报告基因对候选启动子的自诱导功能与转录强度进行了考察。随后，利用所选启动子对氮信号的响应特点，通过ω‑3脂肪酸脱饱和酶oPpFADS17和自噬相关基因ATG8的定向调控表达实现了高山被孢霉二十碳五烯酸(EPA)生产和总脂肪酸积累量的提升。
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公开(公告)号：CN113604459B
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202111023465.5
申请日：2021-08-31
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/88 , C12N15/113 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12P7/6427 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明披露了磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶是糖异生途径的限速酶，参与胞内碳通量的分配，该基因对总脂质积累和多不饱和脂肪酸积累均有负调控作用。本发明通过抑制高山被孢霉的Mapepck基因的表达，可以降低糖异生水平并导致总糖水平下降从而促进脂质的积累，并在发酵后期显著提高花生四烯酸ARA产量，还能使菌株提前到达脂质最大积累时间，相比于出发菌株更具有产脂优势。本发明在工业生产中具备广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN116515917A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310607236.0
申请日：2023-05-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12P7/6427 , C12N9/10 , C12N1/19 , C12N15/81 , C12P7/6409 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种来源于高山被孢霉的C16/18延长酶及其应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了编码核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因MaELO4，并将该基因插入到酿酒酵母中，进一步证实了筛选的MaELO4具有较高的将C16脂肪酸延长为C18脂肪酸的活性，还具有将反式LA异构为顺式LA的功能。本发明提供了该基因编码的C16/18延长酶在转化LC‑PUFAs方面的应用，得到了高产C18脂肪酸尤其是顺式油酸的酿酒酵母。
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