公开(公告)号：CN114107270B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202111485153.6

申请日：2021-12-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 周哲敏 ,  刘中美 ,  郝明珠 ,  朱小青 ,  崔睿智 ,  周丽 ,  崔文璟 ,  郭军玲

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种L‑天冬氨酸β‑脱羧酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的L‑天冬氨酸β‑脱羧酶突变体E88R的比酶活相对野生型提高了2.1倍，比酶活达481±3.7U/mg。突变体E88R在50℃处理30分钟仍有59％残留酶活性，在pH 7.0和pH 8.0条件下，残余酶活分别为88％和82％。相比野生型酶，该突变体酶E88R的热稳定性与pH稳定性都有很大的提高，有利于以后的工业生产。在pH 7.5条件下，突变体E88R比酶活达到199±2.1U/mg，比野生型高1.9倍。以2.5M马来酸作为底物，全细胞催化制备L‑丙氨酸，生产速率达35.66g/(L·h)，比野生型提高1.68倍。

公开(公告)号：CN114107270A

公开(公告)日：2022-03-01

申请号：CN202111485153.6

申请日：2021-12-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 周哲敏 ,  刘中美 ,  郝明珠 ,  朱小青 ,  崔睿智 ,  周丽 ,  崔文璟 ,  郭军玲

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种L‑天冬氨酸β‑脱羧酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的L‑天冬氨酸β‑脱羧酶突变体E88R的比酶活相对野生型提高了2.1倍，比酶活达481±3.7U/mg。突变体E88R在50℃处理30分钟仍有59％残留酶活性，在pH 7.0和pH 8.0条件下，残余酶活分别为88％和82％。相比野生型酶，该突变体酶E88R的热稳定性与pH稳定性都有很大的提高，有利于以后的工业生产。在pH 7.5条件下，突变体E88R比酶活达到199±2.1U/mg，比野生型高1.9倍。以2.5M马来酸作为底物，全细胞催化制备L‑丙氨酸，生产速率达35.66g/(L·h)，比野生型提高1.68倍。

公开(公告)号：CN112941003A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110418599.0

申请日：2021-04-19

Applicant: 江南大学

Inventor： 周哲敏 ,  刘中美 ,  崔睿智 ,  朱小青 ,  周丽 ,  崔文璟 ,  郭军玲

IPC: C12N1/21 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种双酶偶联全细胞催化马来酸合成L‑丙氨酸的方法，属于生物工程领域。本发明通过统建一种偶联表达马来酸顺反异构酶和L‑天冬氨酸β脱羧酶的重组菌株，并对该重组菌株进行宿主菌改造优化，获得能够全细胞高转化率催化马来酸生成L‑丙氨酸的重组菌。该重组菌株能够利用价格相对便宜的马来酸生成L‑丙氨酸，几乎没有中间产物富马酸和L‑天冬氨酸的积累，转化率到达96％以上，最高生产速率达28.43g/(L·h)，最高产量达261.2g/L。