公开(公告)号：CN115992124A

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202111217385.3

申请日：2021-10-19

申请人： 江南大学

发明人： 陈建欢 ,  任春艳 ,  刘彦山 ,  饶义剑 ,  潘佳琪 ,  何雨珊

IPC分类号： C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/64 ,  C12N15/62 ,  C12N15/113 ,  C12N15/10

摘要： 本发明公开了一种基于食蟹猴APOBEC3A及其突变体的胞嘧啶碱基编辑器，属于基因工程技术领域。本发明构建的一系列CBE单碱基编辑器主要包含sgRNA、mA3A或其突变体、nCas9(D10A)、红色荧光蛋白、尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂、高拷贝复制起点以及氨苄青霉素抗性筛选标记基因。本发明构建的单碱基编辑器的编辑窗口为C3‑C14位点，编辑效率最高可达75％，产物纯度最高可达95％，本发明首次采用非人灵长类动物食蟹猴的APOBEC3A作为CBE系统的胞嘧啶脱氨酶，丰富了基因编辑工具包，为今后胞嘧啶碱基编辑器的优化提供了一个很好的思路和方向。