一种强化光滑球拟酵母合成丙酮酸方法

    公开(公告)号:CN106544285B

    公开(公告)日:2019-07-02

    申请号:CN201611112789.5

    申请日:2016-12-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种强化光滑球拟酵母合成丙酮酸方法,属于发酵工程技术领域。本发明通过在光滑球拟酵母菌株中过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶和丙酮酸羧化酶引入ATP无效循环,降低胞内ATP水平,从而增强光滑球拟酵母菌株丙酮酸的产量和生产强度,通过基因工程技术,将来源于酿酒酵母的PYC2基因和PCK1基因融合过表达于TgU‑中,获得了一株高产丙酮酸和高丙酮酸发酵强度的工程菌株TgU‑(pY26‑PYC2‑PCK1),相对于对照菌株,工程菌TgU‑(pY26‑PYC2‑PCK1)的葡萄糖消耗速率、丙酮酸的产量、底物转化率和丙酮酸生产强度分别提高了15.6%、50.0%、54.5%和81.5%。

    一种从微生物发酵液或酶转化液中提取丙酮酸的方法

    公开(公告)号:CN106496022B

    公开(公告)日:2019-04-23

    申请号:CN201610893332.6

    申请日:2016-10-13

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种从微生物发酵液或酶转化液中提取丙酮酸的方法,属于生物分离提取技术领域。本发明经离心去菌体和其他可见固型物、超滤去除大分子杂质、减压蒸发浓缩后用乙酸乙酯或乙酸丁酯等非水溶性有机溶剂萃取、减压蒸馏萃取剂乙酸乙酯和或乙酸丁酯等非水溶性有机溶剂及其中的水,继续采用高真空减压蒸馏或分子蒸馏获取合格的丙酮酸产品。本发明具有工艺操作简单高效、费用低、产品纯度高等优点,适合于丙酮酸的工业化生产。

    一种提高丙酮酸产量和生产强度的方法

    公开(公告)号:CN105462868A

    公开(公告)日:2016-04-06

    申请号:CN201510907318.2

    申请日:2015-12-10

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C07K14/395 C12P7/40

    Abstract: 本发明公开了一种提高丙酮酸产量和生产强度的方法,属于发酵工程技术领域。本发明通过在光滑球拟酵母菌株中过表达线粒体丙酮酸载体蛋白,加强丙酮酸进入线粒体,进一步加强菌体的生长,从而提高生长偶联型产物丙酮酸的产量和生产强度,通过基因工程技术,将来源于酿酒酵母的MPC1基因过了表达于TgU-中,获得了一株高产丙酮酸的工程菌株TgU-(pY26-MPC1),相对于对照菌株TgU-(pY26),工程菌TgU-(pY26-MPC1)的细胞干重、葡萄糖消耗速率、丙酮酸的产量和丙酮酸生产强度相对于对照菌(TgU-(pY26))分别提高了24.9%、28.2%、91.9%和94.1%。

    一种丙酮酸生产强度提高的重组菌及其应用

    公开(公告)号:CN105368884A

    公开(公告)日:2016-03-02

    申请号:CN201510907232.X

    申请日:2015-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种丙酮酸生产强度提高的重组菌及其应用,属于发酵工程技术领域。本发明通过在光滑球拟酵母菌株中定位表达线粒体丙酮酸载体蛋白于细胞膜上,加强丙酮酸出细胞的速率和缓解丙酮酸对糖酵解途径关键酶的反馈抑制作用,进而提高丙酮酸的产量和生产强度,通过基因工程技术,将来源于酿酒酵母的MPC1和信号肽序列Shrew1p定位整合到pY26表达载体上,构建酵母重组表达质粒pY26-Shrew1p-MPC1,并将其电转进受体菌TgU-中获得一株一株高产丙酮酸的工程菌株TgU-(pY26-Shrew1p-MPC1),相对于对照菌株TgU-(pY26),工程菌TgU-(pY26-Shrew1p-MPC1)的细胞干重、葡萄糖消耗速率、丙酮酸的产量和丙酮酸生产强度相对于对照菌(TgU-(pY26))分别提高了58.3%、68.1%、154.4%和152.6%。

    一种联产丙酮酸和α‑酮戊二酸的重组光滑球拟酵母

    公开(公告)号:CN106635852A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201611112770.0

    申请日:2016-12-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种联产丙酮酸和α‑酮戊二酸的重组光滑球拟酵母,属于发酵工程技术领域。通过基因工程技术,将来源于酿酒酵母的CDC19整合到pY26‑TEF‑GPD表达载体上,构建酵母重组表达质粒pY26‑CDC19,并将其电转进受体菌TgU‑中获得一株高产丙酮酸的工程菌株TgU‑(pY26‑CDC19),相对于对照菌,总酸产量(丙酮酸和α‑酮戊二酸)、总酸转化率和总酸生产强度分别提高了112.2%、115.6%和155.6%,最重要的是重组菌TgU‑(pY26‑CDC19)的α‑酮戊二酸产量从其改造之前的0g/L增加到了30.1g/L。

    一种减少多糖积累强化光滑球拟酵母生产丙酮酸的方法

    公开(公告)号:CN106544286B

    公开(公告)日:2019-05-10

    申请号:CN201611112791.2

    申请日:2016-12-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种减少多糖积累强化光滑球拟酵母生产丙酮酸的方法,属于发酵工程技术领域。本发明通过在光滑球拟酵母菌株中敲除掉多糖合成相关基因CAGL0H02695g和CAGL0K10626g,获得了一株高产丙酮酸的工程菌株TGΔarg8Δura3(CAGL0H02695g::ARG8;CAGL0K10626g::URA3),相对于对照菌T.glabrata,其丙酮酸的产量、丙酮酸生产强度和底物转化率分别提高了12.8%、13.6%和34.8%,而细胞干重、葡萄糖消耗速率和副产物多糖分别降低了12.5%、17.9%和16.6%。

    一种提高丙酮酸产量和生产强度的方法

    公开(公告)号:CN105462868B

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201510907318.2

    申请日:2015-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高丙酮酸产量和生产强度的方法,属于发酵工程技术领域。本发明通过在光滑球拟酵母菌株中过表达线粒体丙酮酸载体蛋白,加强丙酮酸进入线粒体,进一步加强菌体的生长,从而提高生长偶联型产物丙酮酸的产量和生产强度,通过基因工程技术,将来源于酿酒酵母的MPC1基因过了表达于TgU‑中,获得了一株高产丙酮酸的工程菌株TgU‑(pY26‑MPC1),相对于对照菌株TgU‑(pY26),工程菌TgU‑(pY26‑MPC1)的细胞干重、葡萄糖消耗速率、丙酮酸的产量和丙酮酸生产强度相对于对照菌(TgU‑(pY26))分别提高了24.9%、28.2%、91.9%和94.1%。

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