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公开(公告)号：CN107904248A
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201711228405.0
申请日：2017-11-29
申请人： 江汉大学
IPC分类号： C12N15/31 , C12N1/13 , C07K14/405 , C12Q1/02 , C02F3/32 , C12R1/89 , C02F101/20
摘要： 本发明公开了莱茵衣藻VMPL1基因在调控莱茵衣藻镉耐受性中的应用，属于生物技术领域和污水治理领域。本发明通过将含巴龙霉素抗性基因的aphⅧ片段（SEQ ID NO:3）随机插入衣藻中得到了明显抗氯化镉的莱茵衣藻突变藻株，进一步鉴定发现突变藻株的抗镉性是由于aphⅧ片段插入到VMPL1基因（CDS序列如SEQ ID NO:1所示）中造成的。通过降低莱茵衣藻VMPL1基因的表达、使VMPL1基因失活或缺失VMPL1基因能够提高莱茵衣藻的镉耐受性；通过基因工程手段获得的镉耐受性增强的莱茵衣藻藻株可应用于镉污染水域的监控与治理中。本发明为污水治理提供新的思路与生物材料。
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公开(公告)号：CN107828801A
公开(公告)日：2018-03-23
申请号：CN201711231270.3
申请日：2017-11-29
申请人： 江汉大学
IPC分类号： C12N15/31 , C07K14/405 , C12N1/13 , C02F3/32 , C12R1/89 , C02F101/20
摘要： 本发明公开了莱茵衣藻RFC1基因在调控莱茵衣藻镉耐受性中的应用，属于生物技术领域和环境污染治理领域。本发明通过将含巴龙霉素抗性基因的aphⅧ片段（SEQ ID NO:3）随机插入衣藻中得到了明显抗氯化镉的莱茵衣藻突变藻株，进一步鉴定发现突变藻株的抗镉性是由于aphⅧ片段插入到RFC1基因（CDS序列如SEQ ID NO:1所示）中造成的。通过降低莱茵衣藻RFC1基因的表达、使RFC1基因失活或缺失RFC1基因能够提高莱茵衣藻的镉耐受性；通过基因工程手段获得的镉耐受性增强的莱茵衣藻藻株可应用于镉污染水域的监控与治理中，为污水的治理提供新的方向。
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公开(公告)号：CN107760693A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201711228404.6
申请日：2017-11-29
申请人： 江汉大学
IPC分类号： C12N15/31 , C12N1/13 , C07K14/405 , C12R1/89
摘要： 本发明公开了莱茵衣藻LRR基因在调控莱茵衣藻镉耐受性中的应用，属于生物技术领域与环境污染治理领域。本发明通过将含巴龙霉素抗性基因的aphⅧ片段随机插入衣藻中得到了明显抗氯化镉的莱茵衣藻突变藻株，进一步鉴定发现突变藻株的抗镉性是由于aphⅧ片段（SEQ ID NO:3）插入到LRR基因（CDS序列如SEQ ID NO:1所示）中造成的。通过降低莱茵衣藻LRR基因的表达、使LRR基因失活或缺失LRR基因能够提高莱茵衣藻的镉耐受性；通过基因工程手段获得的镉耐受性增强的莱茵衣藻藻株可应用于镉污染水域的监控与治理中，使用镉耐受性增强的莱茵衣藻藻株来治理镉污染水环境，操作简单易行，成本低。
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公开(公告)号：CN104388455B
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201410591912.0
申请日：2014-10-29
申请人： 江汉大学
摘要： 本发明公开了一种莱茵衣藻相关基因的RNAi载体及其构建方法和应用，所述RNAi载体含有一个莱茵衣藻嵌合组成型表达启动子HSP70A/RBCS2、内含子和3’UTR和潮霉素筛选标记表达框序列，莱茵衣藻嵌合组成型表达启动子HSP70A/RBCS2的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，3’UTR的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，潮霉素筛选标记表达框序列的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明利用PCR技术把目的基因的部分cDNA片段先构建到中间载体pEASY‑T1上，然后再通过两次酶切相继把目标基因的正向和反向片段连接到莱茵衣藻RNAi骨架载体上，简化了载体构建步骤，缩短了载体构建时间，提高了效率，同时可以直接应用到衣藻其它基因的功能研究方面。
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公开(公告)号：CN105603082A
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201610063949.5
申请日：2016-01-29
申请人： 中国科学院遗传与发育生物学研究所 , 江汉大学
摘要： 本发明公开了一种水稻微生物定性与定量的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：确定待测样品中的目标微生物类群、目标微生物和非目标生物、以及不存在于所述待测样品中的参考微生物；设计目标微生物类群与目标微生物的特征区域；设计特征区域的多重扩增引物；在待测样品中加入参考微生物与外源核酸后，提取待测样品中的微生物的核酸；利用设计的多重引物扩增微生物核酸，扩增获得特征测序片段；利用特征测序片段定性、定量分析待测样品中微生物。本发明不需要对微生物进行预培养与增殖，可以一次性地对待测样品中的多种已知微生物进行高通量、高准确度、高分辨率的检测，检测过程简单、快速且流程规范。
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公开(公告)号：CN105567835A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201610066274.X
申请日：2016-01-29
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6869 , C12Q2535/122 , C12Q2537/143
摘要： 本发明公开了一种棉花转基因成分的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括：确定转基因成分、内源标准基因和外源标准基因；制备多重扩增引物；进行抽样并混合，得到混合样品；提取混合样品的基因组并加入外源标准基因，得到混合核酸；构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；获得待测样品中转基因成分的测序片段的数量、内源标准基因的测序片段的数量和外源标准基因的测序片段的数量；根据外源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功并计算待测样品种中转基因成分的含量；根据转基因成分的含量判断待测样品中是否含有转基因成分。该方法能够同时定量检测待测样品中的任意多种转基因成分。
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公开(公告)号：CN105567834A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201610064116.0
申请日：2016-01-29
申请人： 中国科学院遗传与发育生物学研究所 , 江汉大学
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6869 , C12Q2535/122 , C12Q2545/101 , C12Q2545/113
摘要： 本发明公开了一种大米转基因成分的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括：确定转基因成分、内源标准基因和外源标准基因；制备多重扩增引物；进行抽样并混合，得到混合样品；提取混合样品的基因组并加入外源标准基因，得到混合核酸；构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；获得待测样品中转基因成分的测序片段的数量、内源标准基因的测序片段的数量和外源标准基因的测序片段的数量；根据外源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功并计算待测样品种中转基因成分的含量；根据转基因成分的含量判断待测样品中是否含有转基因成分。该方法能够同时定量检测待测样品中的多种转基因成分。
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公开(公告)号：CN104141008A
公开(公告)日：2014-11-12
申请号：CN201410309783.1
申请日：2014-06-30
申请人： 江汉大学
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q2600/158 , C12Q2600/178
摘要： 本发明公开了miRNA169h基因预报水稻白叶枯病的方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：选取待测水稻和对照水稻，选取的所述对照水稻为未感染白叶枯病但与待测水稻在相同条件下栽培的水稻；分别分离所述待测水稻和所述对照水稻中的总miRNA基因；分别检测所述待测水稻和所述对照水稻中的总miRNA基因中的miRNA169h基因的表达量，所述miRNA169h基因的序列如序列表中SEQ ID NO:1所示；根据所述待测水稻和所述对照水稻中的miRNA169h基因的表达量，判断实验是否成功，若成功，进一步判定所述待测植株是否感染白叶枯病。本发明提供的预测方法获得了成功，可以在水稻白叶枯病症出现前数天实现准确预报，为早防早治赢得了时间，减少了白叶枯病对水稻造成的损失。
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公开(公告)号：CN104141008B
公开(公告)日：2016-10-05
申请号：CN201410309783.1
申请日：2014-06-30
申请人： 江汉大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了miRNA169h基因预报水稻白叶枯病的方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：选取待测水稻和对照水稻，选取的所述对照水稻为未感染白叶枯病但与待测水稻在相同条件下栽培的水稻；分别分离所述待测水稻和所述对照水稻中的总miRNA基因；分别检测所述待测水稻和所述对照水稻中的总miRNA基因中的miRNA169h基因的表达量，所述miRNA169h基因的序列如序列表中SEQ ID NO:1所示；根据所述待测水稻和所述对照水稻中的miRNA169h基因的表达量，判断实验是否成功，若成功，进一步判定所述待测植株是否感染白叶枯病。本发明提供的预测方法获得了成功，可以在水稻白叶枯病症出现前数天实现准确预报，为早防早治赢得了时间，减少了白叶枯病对水稻造成的损失。
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公开(公告)号：CN105603081A
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201610061101.9
申请日：2016-01-29
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种肠道微生物定性与定量的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：确定待测样品中的目标微生物类群、目标微生物和非目标生物、以及不存在于所述待测样品中的参考微生物；设计目标微生物类群与目标微生物的特征区域；设计特征区域的多重扩增引物；在待测样品中加入参考微生物与外源核酸后，提取待测样品中的微生物的核酸；利用设计的多重引物扩增微生物核酸，扩增获得特征测序片段；利用特征测序片段定性、定量分析待测样品中微生物。本发明不需要对微生物进行预培养与增殖，可以一次性地对待测样品中的多种已知微生物进行高通量、高准确度、高分辨率的检测，检测过程简单、快速且流程规范。
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