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公开(公告)号：CN105400910A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201511025198.X
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: Y02A50/451 , C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT-PCR检测引物：猪德尔塔冠状病毒的引物序列如下：上游引物P1：5＇- ATGGCTACTGGCTGCGTTAC-3＇下游引物P2：5＇- GCGTTTCCTGGGCTGATT-3＇扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段383 bp；猪传染性胃肠炎病毒的引物序列如下：上游引物P3：5＇- CCCTCCAGCAAGGTTCAA-3＇下游引物P4：5＇- GCAACCCAGACAACTCCA-3＇扩增猪传染性胃肠炎病毒基因部分片段229 bp。本发明多重RT-PCR对PDCoV和TGEV的最低检测量分别是4.05×101拷贝/μL和5.47×102拷贝/μL，而对猪流行性腹泻病毒，博卡病毒，猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪轮状病毒的扩增结果均为阴性。57份临床样品的多重RT-PCR检测结果显示，同时感染这2种病毒的阳性率为1.75%，感染PDCoV阳性率为19.30%，感染TGEV阳性率为1.75%。
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公开(公告)号：CN105483291B
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201511021732.X
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR检测引物。本发明多重RT‑PCR对这3种病毒的最低检测量分别是4.05×101拷贝/μL、4.52×103拷贝/μL和5.47×103拷贝/μL，而对猪细小病毒（PPV），猪伪狂犬病毒（PRV）的扩增结果均为阴性。57份临床样品的多重RT‑PCR检测结果显示，有1份同时感染这3种病毒，11份样品感染PDCoV，15份样品感染PEDV，1份样品感染TGEV，5份样品感染PDCoV和PEDV，1份样品感染PDCoV和TGEV。
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公开(公告)号：CN106676197A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201611224093.1
申请日：2016-12-27
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明属于微生物检测领域，涉及猪Delta冠状病毒和猪流行性腹泻病毒的检测，具体涉及猪Delta冠状病毒和猪流行性腹泻病毒双重荧光RT‑PCR检测方法及其应用。检测方法包括以下步骤：猪Delta冠状病毒上、下游引物和猪流行性腹泻病毒上、下游引物的设计；双重实时荧光体系的准备；双重实时荧光检测方法的实施。作为同时检测猪Delta冠状病毒和猪流行性腹泻病毒的应用。本发明建立的检测方法，能够同时快速、特异性的检测到PEDV和PDCoV两种病毒，具有良好的特异性、重复性和敏感性，为临床诊断和防治PEDV和PDCoV提供了有力的技术支持，也为该类疫病的分子流行病学和防控研究奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105400910B
公开(公告)日：2018-09-21
申请号：CN201511025198.X
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种病毒的检测方法，具体涉及一种猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR检测引物及检测方法。本发明利用引物检测猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR的方法，该方法不用于疾病的诊断和治疗，包括提取病毒的DNA后，按多重荧光定量RT‑PCR反应体系和反应条件对病毒进行检测，本发明的57份临床样品的多重RT‑PCR检测结果显示，同时感染这2种病毒的阳性率为1.75％，感染PDCoV阳性率为19.30％，感染TGEV阳性率为1.75％。结果表明，建立多重RT‑PCR方法能够对PDCoV和TGEV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN105483290A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201511018859.6
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测引物，猪德尔塔冠状病毒的引物序列如下：上游引物：5＇- TTAGTCGGGTCCTTTGCG -3＇，下游引物：5＇- ACTCTCGTTGAAAGTCCG-3＇，扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段260 bp。本发明根据GenBank中登录的PDCoV（KJ567050.1）Illinois121株的N基因序列的保守区设计一对特异性引物，经过对反应条件进行优化，建立了检测PDCoV的SYBRGreen 荧光定量PCR方法。该方法对常见的病毒均检测不到荧光信号，仅对PDCoV检测为阳性，其灵敏度为54拷贝/μL；组内和组间变异系数均小于1%。本试验建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点，可用于临床PDCoV的检测。
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公开(公告)号：CN105420412B
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201511016093.8
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种病毒的检测方法，具体涉及一种猪德尔塔冠状病毒和猪流行性腹泻病毒多重RT‑PCR检测引物及检测方法。利用所述引物检测猪德尔塔冠状病毒和猪流行性腹泻病毒多重RT‑PCR的方法，该方法不用于疾病的诊断和治疗，包括提取病毒的DNA后，按多重荧光定量RT‑PCR反应体系和反应条件对病毒进行检测,应用该方法和单重PCR对57份临床样品的多重PCR检测结果显示，同时感染这2种病毒的阳性率8.77％，感染PDCoV阳性率为19.30％，感染PEDV阳性率为26.32％。结果表明，建立多重PCR方法能够对PDCoV和PEDV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN105483291A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201511021732.X
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143 , C12Q2521/107
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒多重RT-PCR检测引物。本发明多重RT-PCR对这3种病毒的最低检测量分别是4.05×101拷贝/μL、4.52×103拷贝/μL和5.47×103拷贝/μL，而对猪细小病毒（PPV），猪伪狂犬病毒（PRV）的扩增结果均为阴性。57份临床样品的多重RT-PCR检测结果显示，有1份同时感染这3种病毒，11份样品感染PDCoV，15份样品感染PEDV，1份样品感染TGEV，5份样品感染PDCoV和PEDV，1份样品感染PDCoV和TGEV。
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公开(公告)号：CN105420412A
公开(公告)日：2016-03-23
申请号：CN201511016093.8
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒和猪流行性腹泻病毒多重RT-PCR检测引物：猪德尔塔冠状病毒的引物序列如下：上游引物P1：5＇-GCGTTTCCTGGGCTGATT-3＇下游引物P2：5＇-ATGGCTACTGGCTGCGTTAC-3＇扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段383bp。本发明多重RT-PCR对PDCoV和PEDV的最低检测量分别是4.05×101拷贝/μL和4.52×103拷贝/μL，而对猪传染性胃肠炎病毒，博卡病毒，猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪轮状病毒的扩增结果均为阴性。应用该方法和单重PCR对57份临床样品的多重PCR检测结果显示，同时感染这2种病毒的阳性率为8.77%，感染PDCoV阳性率为19.30%，感染PEDV阳性率为26.32%。
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