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公开(公告)号：CN114875036B
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202210570553.5
申请日：2022-05-24
申请人： 河南师范大学
IPC分类号： C12N15/12 , C07K14/46 , C12N15/81 , A23K20/147 , A23K50/80 , A61K38/17 , A61P31/04 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种黄河鲤抗菌肽hepcidin基因酵母表达产物及其应用，克隆黄河鲤抗菌肽hepcidin基因全长cDNA序列，扩增出基因片段，构建到毕赤酵母表达载体pPICZα A，得到重组表达载体，重组载体电转至毕赤酵母X‑33后，通过筛选获得重组毕赤酵母菌株，使用甲醇的培养基诱导表达，成功表达出重组Hepcidin蛋白，重组Hepcidin蛋白对嗜水气单胞菌、大肠杆菌、鳗弧菌、枯草芽孢杆菌均具有较好的抑菌活性。在黄河鲤基础饲料中添加重组Hepcidin蛋白，饲养周期为28d后，可以显著提高黄河鲤感染嗜水气
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公开(公告)号：CN108409850A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810089975.4
申请日：2018-01-30
申请人： 河南师范大学
CPC分类号： C07K14/461 , A61K38/00 , A61P31/04 , A61P37/04 , C12N15/70
摘要： 本发明公开了一种鱼源半乳糖凝集素CaGal重组蛋白的制备方法及其应用，属于水产动物分子生物学领域。本发明的技术方案要点为：以淇河鲫cDNA为模板，采用F/R为引物进行PCR扩增，PCR产物CaGal与载体pET-32a连接，构建pET-32a-CaGal重组表达载体；转化至大肠杆菌BL21(DE3)获得大肠杆菌表达菌株pET-32a-CaGal-BL21，即可表达半乳糖凝集素CaGal重组蛋白，经分离和纯化获得鱼源半乳糖凝集素CaGal重组蛋白。本发明制备的CaGal重组蛋白可保持其天然生物学活性，能够有效抑制嗜水气单胞菌等病原菌，抑菌效果明显，并且制备方法简单，可作为一种新型的鱼类免疫添加剂或抗菌药物。
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公开(公告)号：CN104818268A
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201510251178.8
申请日：2015-05-18
申请人： 河南师范大学
IPC分类号： C12N15/10
摘要： 本发明公开了一种动物组织DNA的保存方法，属于生物组织固定技术领域。本发明的技术方案要点为：将动物新鲜组织或冷冻组织切成组织块后用食盐干粉或氯化钠干粉沾满组织表面或者将动物新鲜组织或冷冻组织置于质量浓度为10%-36.5%的氯化钠溶液中即能实现动物组织的长期保存，其中以质量浓度为10%的食盐水固定效果为最佳。本发明除了能够实现酒精固定样品满足长期保存动物组织的目的和后续实验要求外，同时具有试剂廉价易得、试剂安全无挥发性和可用于长途运输尤其是空运的要求，优于现在采用的酒精固定的方法，尤其适用于野外动物样品的采集和固定保存。
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公开(公告)号：CN106727471B
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201710047078.2
申请日：2017-01-22
申请人： 河南师范大学
IPC分类号： A61K31/165 , A61K31/047 , A61P31/04
摘要： 本发明公开了肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用，属于医药技术领域。本发明首次发现肌醇与氟苯尼考的联合使用能极大提高氟苯尼考对两种代表性革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌‑‑嗜水气单胞菌和无乳链球菌的抗菌能力，注射或口服这两种组合物能提高鱼体嗜水气单胞菌感染的治疗效果，大幅增加鱼体存活率。因此，本发明提供的肌醇可用作水产养殖抗菌药物氟苯尼考的增效剂，当肌醇与氟苯尼考应用制备复方抗菌药剂时，既可提高抗菌药物药效，又可大幅减少药物的使用量，进而减少药物的毒副作用和药物残留。
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公开(公告)号：CN108324936B
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201711022026.6
申请日：2017-10-27
申请人： 河南师范大学
摘要： 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒VP35蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用，属于基因工程及分子免疫学技术领域。本发明的技术方案要点为：一种草鱼呼肠孤病毒VP35蛋白亚单位疫苗，该亚单位疫苗蛋白的基因序列如序列表SEQ ID No.1所示。本发明还具体公开了该草鱼呼肠孤病毒VP35蛋白亚单位疫苗的制备方法及其作为抗草鱼呼肠孤病毒感染疫苗用于提高草鱼感染草鱼呼肠孤病毒后鱼体的存活率。本发明中草鱼呼肠孤病毒VP35蛋白亚单位疫苗为新型抗原蛋白疫苗，其制备方法简单，成分明确，安全稳定，能够诱导草鱼鱼体产生较高的非特异性和特异性免疫应答，进而获得较好的免疫保护效果。
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公开(公告)号：CN109464449A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811459005.5
申请日：2018-11-30
申请人： 河南师范大学
IPC分类号： A61K31/7036 , A61K31/198 , A61P31/04 , A61P33/02
摘要： 本发明公开了一种水产抗菌药物组合物及其应用，属于水产药物制剂技术领域。本发明的技术方案要点为：一种水产抗菌药物组合物，该水产抗菌药物组合物的活性组分由以下重量百分配比的原料组成：硫酸新霉素0.2%-70.3%和精氨酸29.7%-99.8%。本发明的抗菌药物组合物具有更好的抗菌杀菌作用，扩大抗菌药物防治范围，同时减少抗菌药物的使用，促进水产动物健康养殖。
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公开(公告)号：CN107760716A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201711022072.6
申请日：2017-10-27
申请人： 河南师范大学
CPC分类号： C12N15/85 , A61K39/12 , A61K2039/53 , A61K2039/552 , C12N15/66 , C12N2720/12034
摘要： 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒S11基因真核表达重组质粒的制备方法及其作为核酸疫苗的应用，属于基因工程及分子免疫学技术领域。本发明的技术方案要点为：提取病毒基因组RNA，逆转录为cDNA，扩增出相应DNA序列，将该DNA序列构建到pcDNA-3.1(+)质粒并转化大肠杆菌DH5α，筛选出含重组质粒的阳性克隆菌并将阳性菌大量培养，提取菌体中含有的重组质粒S11-pcDNA3.1。将该重组质粒作为核酸疫苗肌肉注射草鱼，该核酸疫苗进入肌肉细胞并在肌肉细胞中表达草鱼呼肠孤病毒的VP35蛋白，从而刺激鱼体免疫细胞增殖、上调抗病毒相关基因表达以及刺激鱼体产生抗病毒抗体，有效提高草鱼抗草鱼呼肠孤病毒感染的能力，进而用于预防水产养殖中因该病毒引起的草鱼出血病。
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公开(公告)号：CN106906141A
公开(公告)日：2017-06-30
申请号：CN201710094067.X
申请日：2017-02-21
申请人： 河南师范大学
CPC分类号： C12N1/02 , A61K39/0208 , A61K2039/522 , A61K2039/552 , C12Q1/04 , C12Q1/689 , C12Q2600/158
摘要： 本发明公开了一种嗜水气单胞菌活菌疫苗菌株的筛选方法，属于水产养殖疾病防控技术领域。本发明的技术方案要点为：一种嗜水气单胞菌活菌疫苗菌株的筛选方法，从养殖环境中分离出嗜水气单胞菌，并检测其毒力基因表达情况，通过细菌攻毒和免疫保护率动物实验，筛选出用于活菌疫苗的嗜水气单胞菌。本发明通过所列的系列引物，检测嗜水气单胞菌的毒力与毒力相关基因，筛选具有广阔应用前景的活菌疫苗，可以较好的保护养殖鱼类抵抗嗜水气单胞菌的感染。应用此种方法制备的疫苗，比灭活疫苗和减毒疫苗制备程序更简单，免疫保护效果更优，并且所分离的细菌为养殖环境中的天然细菌，不用担心复壮、返祖的风险，具有更高的安全性。
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公开(公告)号：CN106906141B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201710094067.X
申请日：2017-02-21
申请人： 河南师范大学
摘要： 本发明公开了一种嗜水气单胞菌活菌疫苗菌株的筛选方法，属于水产养殖疾病防控技术领域。本发明的技术方案要点为：一种嗜水气单胞菌活菌疫苗菌株的筛选方法，从养殖环境中分离出嗜水气单胞菌，并检测其毒力基因表达情况，通过细菌攻毒和免疫保护率动物实验，筛选出用于活菌疫苗的嗜水气单胞菌。本发明通过所列的系列引物，检测嗜水气单胞菌的毒力与毒力相关基因，筛选具有广阔应用前景的活菌疫苗，可以较好的保护养殖鱼类抵抗嗜水气单胞菌的感染。应用此种方法制备的疫苗，比灭活疫苗和减毒疫苗制备程序更简单，免疫保护效果更优，并且所分离的细菌为养殖环境中的天然细菌，不用担心复壮、返祖的风险，具有更高的安全性。
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公开(公告)号：CN112575030A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202110033552.2
申请日：2021-01-12
申请人： 河南师范大学
摘要： 本发明公开了一种利用浮萍表达系统制备草鱼呼肠孤病毒口服亚单位疫苗的方法。本发明能够利用浮萍表达系统简便、高效表达草鱼呼肠孤病毒口服亚单位疫苗，本方法包括外源基因的扩增、农杆菌植物双元表达载体的构建、浮萍愈伤组织遗传转化体系的建立，并使用PCR、荧光显微观察、GUS染色和Western blotting等实验技术验证外源基因的表达。本发明能利用浮萍高效表达草鱼呼肠孤病毒亚单位疫苗，制备的疫苗可直接口服免疫草鱼，可减少因草鱼呼肠孤病毒感染而造成的经济损失，也便于操作，节省成本，更具有推广和实际应用价值。
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