禽IL-2与新城疫病毒HN基因重组融合蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN101870733B

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201010172224.2

    申请日:2010-05-14

    摘要: 本发明涉及一种重组禽白细胞介素2与新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(hemagglutinin-neuraminidase,HN)融合蛋白(chIL-2-HN融合蛋白)的制备方法和应用,属于生物工程技术领域。该融合蛋白为禽IL-2蛋白和新城疫病毒HN蛋白通过柔性Linker肽融合而成,编码该融合蛋白的DNA序列插入表达载体pPICZαA,电转化酵母菌X-33,获得高效表达重组chIL-2-HN融合蛋白的基因工程菌,通过液体培养、纯化制得的重组chIL-2-HN融合蛋白,该重组融合蛋白可作为新城疫新型基因工程疫苗,也可作为新城疫常规疫苗的新型免疫佐剂。本发明的chIL-2-HN融合蛋白经动物免疫实验证实,安全性好,无毒副作用。能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平,具有广阔的应用前景。

    一种伤寒沙门氏菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用

    公开(公告)号:CN102676419A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201110402011.9

    申请日:2011-12-06

    摘要: 本发明涉及一种伤寒沙门氏菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用,该菌株是伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)ΔcrpST-1,保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:M2011373。本发明的伤寒沙门氏菌基因缺失菌株具有很好的免疫保护性,且毒力较弱,对免疫猪无任何不良副作用,跟传统该类疫苗相比更安全。因此,用该亲本菌株构建的基因缺失菌株制成疫苗,具有广阔的市场应用前景。另外,本发明伤寒沙门氏菌基因缺失菌株保留了针对伤寒沙门氏菌感染的免疫保护效力,而且遗传背景清晰,性状稳定,因而具有更好的生物安全性。本发明伤寒沙门氏菌基因缺失菌株不含抗性标记,完全符合疫苗生物安全性要求。

    用于检测副猪嗜血杆菌的LAMP引物、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN108570510A

    公开(公告)日:2018-09-25

    申请号:CN201710150721.4

    申请日:2017-03-14

    摘要: 本发明公开了一种用于检测副猪嗜血杆菌的LAMP引物、试剂盒及检测方法,属于病原微生物检测技术领域。本发明根据GenBank登录号为CP015099的副猪嗜血杆菌的脂多糖组蛋白基因的6个不同区域设计LAMP引物,与常规PCR仅针对2个区域设计的引物相比特异性显著提高。本发明中副猪嗜血杆菌LAMP检测方法具有操作简单、结果易判断、检测时间快、灵敏度高等优点。普通PCR检测从样品DNA提取到获得检测结果,整个过程至少5h,而本发明中LAMP检测可在2h内完成。尤其当采用直接目测法判定样品感染状况时,整个操作过程仅需要恒温水浴锅、微量移液器等简单小型设备,不需要电泳,在可见光下即可准确辨别结果。

    禽IL-2与新城疫病毒HN基因重组融合蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN101870733A

    公开(公告)日:2010-10-27

    申请号:CN201010172224.2

    申请日:2010-05-14

    摘要: 本发明涉及一种重组禽白细胞介素2与新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(hemagglutinin-neuraminidase,HN)融合蛋白(chIL-2-HN融合蛋白)的制备方法和应用,属于生物工程技术领域。该融合蛋白为禽IL-2蛋白和新城疫病毒HN蛋白通过柔性Linker肽融合而成,编码该融合蛋白的DNA序列插入表达载体pPICZαA,电转化酵母菌X-33,获得高效表达重组chIL-2-HN融合蛋白的基因工程菌,通过液体培养、纯化制得的重组chIL-2-HN融合蛋白,该重组融合蛋白可作为新城疫新型基因工程疫苗,也可作为新城疫常规疫苗的新型免疫佐剂。本发明的chIL-2-HN融合蛋白经动物免疫实验证实,安全性好,无毒副作用。能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平,具有广阔的应用前景。

    I型鸭肝炎病毒血清抗体酶联免疫法检测试剂盒及其检测方法和应用

    公开(公告)号:CN101839917A

    公开(公告)日:2010-09-22

    申请号:CN201010175527.X

    申请日:2010-05-18

    摘要: 本发明涉及一种I型鸭肝炎病毒血清抗体酶联免疫法检测试剂盒,同时还涉及一种该试剂盒的检测方法和应用,其中试剂盒包括:经重组VP1蛋白包被的酶标板、辣根过氧化酶标记的兔抗鸭IgG抗体、TMB底物显色液、阳性血清、阴性血清和试剂盒说明书。本发明利用聚合酶链反应从DHV-1基因组中扩增出VP1基因,构建了含VP1基因的重组表达质粒pET32a-VP1,该质粒转化入宿主菌BL21(DE3),体外表达VP1蛋白经镍柱纯化后作为抗原,建立酶联免疫吸附试验检测试剂盒,阳性血清为I型鸭肝炎病毒标准阳性血清,阴性对照为鸭标准阴性血清。检测试剂盒特异性强、敏感性高、操作简单,易于大范围推广应用,在I型鸭病毒性肝炎的诊断、流行病学调查和免疫监测等方面具有重要应用价值。