公开(公告)号：CN117343917A

公开(公告)日：2024-01-05

申请号：CN202311261536.4

申请日：2023-09-27

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  蔡雪 ,  吴杰 ,  施雪 ,  郑裕国

IPC: C12N9/10 ,  C12P7/42 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高热稳定性的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体及应用，所述酮泛解酸羟甲基转移酶突变体是将SEQ ID NO.3所示氨基酸序列第98位、第106位或第247位进行单突变或多突变获得的。本发明高稳定性突变体可以有效促进底物a‑酮异戊酸生成酮泛解酸，催化效率大大提高，同时降低了底物对酶的反馈抑制作用，具有较好的应用价值。

公开(公告)号：CN115058401A

公开(公告)日：2022-09-16

申请号：CN202210727421.9

申请日：2022-06-24

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  蔡雪 ,  刘思琦 ,  施雪 ,  金利群 ,  张博 ,  郑裕国

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种酮泛解酸羟甲基转移酶突变体、编码基因，含有编码基因的载体、基因工程菌及应用。所述突变体是利用基因工程技术对谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum ATCC 13032)来源的酮泛解酸羟甲基转移酶KPHMT基因进行定点突变，后导入表达宿主E.coli BL21(DE3)中得到。本发明的有益效果主要体现在：本发明得到了一系列对酮泛解酸羟甲基转移酶酶活有明显改变的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体，相较野生型酮泛解酸羟甲基转移酶，本发明构建的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体通过与野生型酶比较，酶活有所提高，优于现有报道的酮泛解酸羟甲基转移酶，可有效提高终产物D‑泛酸的产量，降低生产成本。

公开(公告)号：CN115058401B

公开(公告)日：2024-07-12

申请号：CN202210727421.9

申请日：2022-06-24

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  蔡雪 ,  刘思琦 ,  施雪 ,  金利群 ,  张博 ,  郑裕国

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种酮泛解酸羟甲基转移酶突变体、编码基因，含有编码基因的载体、基因工程菌及应用。所述突变体是利用基因工程技术对谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum ATCC 13032)来源的酮泛解酸羟甲基转移酶KPHMT基因进行定点突变，后导入表达宿主E.coli BL21(DE3)中得到。本发明的有益效果主要体现在：本发明得到了一系列对酮泛解酸羟甲基转移酶酶活有明显改变的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体，相较野生型酮泛解酸羟甲基转移酶，本发明构建的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体通过与野生型酶比较，酶活有所提高，优于现有报道的酮泛解酸羟甲基转移酶，可有效提高终产物D‑泛酸的产量，降低生产成本。