公开(公告)号：CN115109793B

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202210729498.X

申请日：2022-06-24

申请人： 浙江工业大学

发明人： 柳志强 ,  赵嫚 ,  宋祥廷 ,  姜梦超 ,  金黎媛 ,  郑裕国

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/60 ,  C12N15/52 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N9/88 ,  C12N9/00 ,  C12N9/02 ,  C12N9/10 ,  C12N1/21 ,  C12P19/44 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种重组大肠杆菌，以大肠杆菌W3110为宿主细胞，通过代谢工程改造提高络缌关键前体L‑Phe，再过表达来源于粘红酵母的苯丙氨酸解氨酶(RgPAL)、链霉菌的肉桂酰CoA连接酶(Sc4CL)、拟南芥的肉桂酰CoA还原酶(AtCCR)和糖苷转移酶(AtUGT73C5)，实现了络缌(Rosin)的从头合成，该菌株在5L发酵罐分批补料发酵后，产量为4.01g/L，是目前报道的最高产量。

公开(公告)号：CN114438002B

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202111226207.7

申请日：2021-10-21

申请人： 浙江工业大学

发明人： 赵嫚 ,  成浩 ,  刘薇 ,  柳志强 ,  郑裕国

IPC分类号： C12N1/21

摘要： 本发明提供一种表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞及其应用，所述表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞为将含磷酸转移酶基因的表达质粒与含非核糖体肽合成酶基因的表达质粒转入宿主细胞中得到。本发明通过构建重组基因工程菌，使用生物酶催化的方法制备脱羧肌肽，比现有化学合成法更加绿色环保。本发明的方法通过全细胞催化法制备脱羧肌肽，是生物法制备脱羧肌肽的首次报道。

公开(公告)号：CN114350692B

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202111226469.3

申请日：2021-10-21

申请人： 浙江工业大学

发明人： 赵嫚 ,  刘薇 ,  成浩 ,  柳志强 ,  郑裕国

IPC分类号： C12N15/62 ,  C12N15/54 ,  C12N15/52 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12P17/10 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供一种磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶融合蛋白的编码序列及基于该序列的重组蛋白、表达质粒和表达菌株。本发明通过构建重组基因工程菌，使用生物酶催化的方法制备脱羧肌肽，比现有化学合成法更加绿色环保。本发明的方法通过全细胞催化法制备脱羧肌肽，是生物法制备脱羧肌肽的首次报道。

公开(公告)号：CN117660277A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311560803.8

申请日：2023-11-22

申请人： 浙江工业大学

发明人： 柳志强 ,  赵嫚 ,  刘科端 ,  郑裕国

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/61 ,  C12P19/44 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开一种代谢工程改造大肠杆菌及其在发酵制备红景天苷中的应用，本发明以大肠杆菌WTY8为底盘细胞，通过代谢改造，得到产酪醇大肠杆菌WY5菌株。在WY5菌株中表达来源于香芹的芳香醛合酶基因和来源于拟南芥的糖基转移酶基因获得WSA1菌株，实现了在大肠杆菌中能够以葡萄糖为底物从头合成红景天苷，其成本低廉，有利于工业化的生产。

公开(公告)号：CN117126794A

公开(公告)日：2023-11-28

申请号：CN202311023305.X

申请日：2023-08-15

申请人： 浙江工业大学

发明人： 柳志强 ,  赵嫚 ,  姜梦超 ,  贾晓丽 ,  郑裕国

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/61 ,  C12P19/44 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供一种代谢工程改造大肠杆菌及其在发酵制备红景天苷中的应用，以大肠杆菌W3110为底盘菌，通过代谢改造，得到高产L‑酪氨酸的大肠杆菌WTY8菌株。再以大肠杆菌WTY8为宿主菌在重组质粒上pTrc99a上表达芳香醛合酶和糖基转移酶，得到红景天苷生产菌株。本发明实现了在大肠杆菌能够以葡萄糖为底物从头合成红景天苷，其成本低廉，有利于工业化的生产。

公开(公告)号：CN115851810A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202211596170.1

申请日：2022-12-12

申请人： 浙江工业大学

发明人： 柳志强 ,  金黎媛 ,  赵嫚 ,  成浩 ,  郑裕国

IPC分类号： C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/60 ,  C12N15/52 ,  C12N15/54 ,  C12N15/61 ,  C12N9/88 ,  C12N9/00 ,  C12N9/10 ,  C12N9/90 ,  C12P17/06 ,  C12R1/865

摘要： 本发明公开了一种酿酒酵母从头合成柚皮素工程菌株及其构建方法与应用，上述工程菌按如下方法对酿酒酵母S.cerevisiae CEN.PK2‑1C基因组进行改造构建：敲除底物竞争途径基因和过表达抗反馈抑制基因等提高前体物质酪氨酸的代谢通量j异源表达酪氨酸解氨酶、4‑香豆酰：CoA‑连接酶、查尔酮合酶和查尔酮异构酶实现柚皮素的从头合成。最后，通过多拷贝位点高效表达Sc4CL和HaCHS进一步提升了柚皮素的产量。

公开(公告)号：CN115820437A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202211695502.1

申请日：2022-12-28

申请人： 浙江工业大学

发明人： 柳志强 ,  周斌 ,  赵嫚 ,  杨雨瑞 ,  郑裕国

IPC分类号： C12N1/14 ,  C12N3/00 ,  C12R1/645

摘要： 本发明提供一种中国被毛孢液体培养基，能够大规模推广使用。与传统的培养基和培养方法相比，制作方法简便，中国被毛孢芽生孢子生长更好，能高效应用于中国被毛孢芽生孢子的培养。

公开(公告)号：CN113444712A

公开(公告)日：2021-09-28

申请号：CN202110575594.9

申请日：2021-05-26

申请人： 浙江工业大学

发明人： 赵嫚 ,  刘薇 ,  彭莉 ,  王美南

IPC分类号： C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/01

摘要： 本发明提供一种L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶突变体及其在合成β‑丙氨酸中的应用。本发明通过全质粒定点突变改造L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶通过取代具有氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于Escherichia coli的L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶的第14位，44位，85位氨基酸位点，获得了影响L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶自剪切的突变菌株。本发明通过比较突变体EcoPanDK14T、EcoPanDI44V、EcoPanDV85L和野生型，发现与野生型相比，突变体自剪切水平显著增加，且在发酵后β‑丙氨酸产量均显著增加。

公开(公告)号：CN110684811B

公开(公告)日：2021-06-29

申请号：CN201911103472.9

申请日：2019-11-13

申请人： 浙江工业大学

发明人： 赵嫚 ,  魏磊 ,  应向贤 ,  汪钊

IPC分类号： C12P13/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种提高甲硫氨酸产量的方法，所述方法为：将胱硫醚‑γ‑合酶基因、同型半胱氨酸甲基转移酶基因或甲硫氨酸甲基转移酶基因中的一种或多种导入宿主菌构建重组基因工程菌，将重组基因工程菌发酵培养，获得含甲硫氨酸发酵液，发酵液分离纯化获得甲硫氨酸。本发明方法通过增加甲硫氨酸合成过程中甲基的供应和高半胱氨酸的含量，其中工程菌E.coli BL21(DE3)pBlunt‑E1‑CGS‑MMT‑HMT发酵产生甲硫氨酸的产量是0.3g/L，相对于野生型E.coli BL21(DE3)菌株，甲硫氨酸的产量增加了9倍，显著提高了反应效率。

公开(公告)号：CN117645931A

公开(公告)日：2024-03-05

申请号：CN202311560804.2

申请日：2023-11-22

申请人： 浙江工业大学

发明人： 柳志强 ,  杨雨瑞 ,  赵嫚 ,  江振豪 ,  郑裕国

IPC分类号： C12N1/14 ,  C12N1/38 ,  A01G18/40 ,  A01G18/20 ,  C12R1/645

摘要： 本发明公开一种提高中国被毛孢菌丝体产量的方法，所述方法为：将中国被毛孢种子液接种到中国被毛孢液体培养基A中第一段避光培养至OD600达0.8‑1.2，加入终浓度为1‑3mM的诱导剂，第二段避光培养，得到中国被毛孢菌丝体；所述诱导剂为蜕皮激素或N‑乙酰氨基葡萄糖中的一种或两种。本发明与传统的培养基和培养方法相比，制作方法简易，中国被毛孢菌丝体生长更好，能高效应用于中国被毛孢菌丝体的培养。