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公开(公告)号:CN114686467B
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202210362600.7
申请日:2022-04-07
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及基于蛋白反式剪接的纳米固定化方法、应用及固定化酶。该方法将基底蛋白的核苷酸序列和目标蛋白的核苷酸序列与断裂型内含肽两端的核苷酸序列分别连接,连接后分别进行融合表达;将融合表达后的基底蛋白制备成酶杂化纳米花,使基底蛋白被固定化;将固定化后的基底蛋白与融合表达后的目标蛋白混合,通过断裂型内含肽的反式自剪接功能直接进行特异性自组装,使目标蛋白被间接固定化。该方法将断裂型内含肽和酶杂化纳米花相结合,可将目标蛋白的纯酶或者粗酶液直接与固定化的基底蛋白结合,避免对蛋白构象的影响,高效便捷。该方法制备玉米赤霉烯酮降解的固定化酶,具有良好稳定性、催化效率和重复利用率。
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公开(公告)号:CN110616230A
公开(公告)日:2019-12-27
申请号:CN201911018173.5
申请日:2019-10-24
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,提供了一种融合信号肽促进玉米赤霉烯酮降解酶ZHD 518蛋白可溶性分泌表达及诱导和分泌条件优化提高分泌表达量的方法,其次是将融合表达策略与ZHD 518蛋白自身性特质相结合,获得了一种促进ZHD 518蛋白分泌表达的方法及应用,从而使蛋白分泌到胞外,简化了后续酶分离纯化的步骤,实现快速获得目的蛋白的目的。
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公开(公告)号:CN118667840A
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202410638285.5
申请日:2024-05-22
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明涉及一种萘高效降解基因、重组质粒、菌株及应用,涉及合成生物学技术领域。所述的萘高效降解基因包括P114‑nahABCDEF或P118‑nahABCDEF;所述P114‑nahABCDEF的序列如SEQ ID NO:1所示,所述P118‑nahABCDEF的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明提供的萘高效降解菌株,尤其是E.coli GM272/pMD18T‑P114‑nahABCDEF,对100μM萘在3h内能实现100%降解,与野生型相比较,降解效率显著提高。
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公开(公告)号:CN108085306A
公开(公告)日:2018-05-29
申请号:CN201810010538.9
申请日:2018-01-05
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明涉及一种玉米赤霉烯酮降解酶和突变体及其编码基因与应用,该降解酶和突变体具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列,或该降解酶和突变体是在SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列基础上缺失、替换、插入或/和添加一个至几个氨基酸的保守性突变而获得的保守性变异体。本发明所述的玉米赤霉烯酮降解酶和突变体具有酶活高、温度与pH耐受性良好等优点,可以广泛应用于玉米赤霉烯酮及其几种衍生物的酶解,底物范围广。
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公开(公告)号:CN118256414A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410427637.2
申请日:2024-04-10
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明涉及一种检测多氯联苯全细胞生物传感器的构建和应用。检测多氯联苯的全细胞生物传感器包括宿主细胞和位于所述宿主细胞中的重组降解质粒和重组传感报告质粒CBP6,所述重组降解质粒通过启动子pUTR控制降解蛋白bphA和降解蛋白bphB的表达,所述降解蛋白bphA为联苯双加氧酶,所述降解蛋白bphB为2,3‑二氢二羟基联苯脱氢酶。本发明构建的多氯联苯生物传感器能够高效检测环境中的多氯联苯有机污染物,且对2‑氯联苯、3‑氯联苯、4‑氯联苯、2,2’‑二氯联苯、2,3‑二氯联苯等低氯联苯的检测下限小于1μM。
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公开(公告)号:CN115948378A
公开(公告)日:2023-04-11
申请号:CN202310047371.4
申请日:2023-01-31
Applicant: 武汉新华扬生物股份有限公司 , 湖北大学
IPC: C12N9/88 , C12N9/96 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/64 , C12N15/66 , C12N1/21 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,具体提供了一种环化碱性果胶裂解酶cyc‑Pel3,其通过在碱性果胶裂解酶PelK47EV132FR272W的N端连接Spytag多肽,在C端连接Spycatcher多肽制备。本发明提供的环化碱性果胶裂解酶cyc‑Pel3热稳定性有显著提高,55℃处理30min,残余活性提高了1.5倍,酶活性和抗热聚集性也明显提高,在纺织工业、植物防治、食品保健等应用上具有重要的意义。此外,本发明提供了一种环化碱性果胶裂解酶重组表达菌株的制备方法,该方法操作简便,成本低,有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN108588061B
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN201810396518.X
申请日:2018-04-28
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明公开了一种比酶活及热稳定性提高的低温碱性果胶裂解酶突变体。该突变体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;或在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础上缺失、替换、插入或/和添加一个至几个氨基酸的保守性突变而获得的具有低温碱性果胶裂解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的突变体的比酶活及热稳定性均有较大幅度的提高,更加适合纺织脱胶、洗涤等领域工业化生产的需要,满足社会生产的需求。
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公开(公告)号:CN108588061A
公开(公告)日:2018-09-28
申请号:CN201810396518.X
申请日:2018-04-28
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明公开了一种比酶活及热稳定性提高的低温碱性果胶裂解酶突变体。该突变体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;或在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础上缺失、替换、插入或/和添加一个至几个氨基酸的保守性突变而获得的具有低温碱性果胶裂解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的突变体的比酶活及热稳定性均有较大幅度的提高,更加适合纺织脱胶、洗涤等领域工业化生产的需要,满足社会生产的需求。
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公开(公告)号:CN110616230B
公开(公告)日:2023-02-28
申请号:CN201911018173.5
申请日:2019-10-24
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,提供了一种融合信号肽促进玉米赤霉烯酮降解酶ZHD 518蛋白可溶性分泌表达及诱导和分泌条件优化提高分泌表达量的方法,其次是将融合表达策略与ZHD 518蛋白自身性特质相结合,获得了一种促进ZHD 518蛋白分泌表达的方法及应用,从而使蛋白分泌到胞外,简化了后续酶分离纯化的步骤,实现快速获得目的蛋白的目的。
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公开(公告)号:CN109797142B
公开(公告)日:2022-09-09
申请号:CN201910163389.4
申请日:2019-03-05
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明提供了一种降解普鲁兰糖产生单一潘糖的糖苷酶及其编码基因和应用,该酶蛋白质包含SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明的糖苷酶具有酶活高、pH耐受性良好等优点,可以广泛应用于环糊精(α‑环糊精、β‑环糊精、γ‑环糊精)、普鲁兰糖、可溶性淀粉的酶解。最重要的是,本发明的糖苷酶水解普鲁兰糖的产物是单一的潘糖,在工业中具有巨大的应用潜力。
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