基于蛋白反式剪接的纳米固定化方法、应用及固定化酶

    公开(公告)号:CN114686467B

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202210362600.7

    申请日:2022-04-07

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及基于蛋白反式剪接的纳米固定化方法、应用及固定化酶。该方法将基底蛋白的核苷酸序列和目标蛋白的核苷酸序列与断裂型内含肽两端的核苷酸序列分别连接,连接后分别进行融合表达;将融合表达后的基底蛋白制备成酶杂化纳米花,使基底蛋白被固定化;将固定化后的基底蛋白与融合表达后的目标蛋白混合,通过断裂型内含肽的反式自剪接功能直接进行特异性自组装,使目标蛋白被间接固定化。该方法将断裂型内含肽和酶杂化纳米花相结合,可将目标蛋白的纯酶或者粗酶液直接与固定化的基底蛋白结合,避免对蛋白构象的影响,高效便捷。该方法制备玉米赤霉烯酮降解的固定化酶,具有良好稳定性、催化效率和重复利用率。

    一种玉米赤霉烯酮降解酶突变体及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN108085306A

    公开(公告)日:2018-05-29

    申请号:CN201810010538.9

    申请日:2018-01-05

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明涉及一种玉米赤霉烯酮降解酶和突变体及其编码基因与应用,该降解酶和突变体具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列,或该降解酶和突变体是在SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列基础上缺失、替换、插入或/和添加一个至几个氨基酸的保守性突变而获得的保守性变异体。本发明所述的玉米赤霉烯酮降解酶和突变体具有酶活高、温度与pH耐受性良好等优点,可以广泛应用于玉米赤霉烯酮及其几种衍生物的酶解,底物范围广。

    一种检测多氯联苯全细胞生物传感器的构建和应用

    公开(公告)号:CN118256414A

    公开(公告)日:2024-06-28

    申请号:CN202410427637.2

    申请日:2024-04-10

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明涉及一种检测多氯联苯全细胞生物传感器的构建和应用。检测多氯联苯的全细胞生物传感器包括宿主细胞和位于所述宿主细胞中的重组降解质粒和重组传感报告质粒CBP6,所述重组降解质粒通过启动子pUTR控制降解蛋白bphA和降解蛋白bphB的表达,所述降解蛋白bphA为联苯双加氧酶,所述降解蛋白bphB为2,3‑二氢二羟基联苯脱氢酶。本发明构建的多氯联苯生物传感器能够高效检测环境中的多氯联苯有机污染物,且对2‑氯联苯、3‑氯联苯、4‑氯联苯、2,2’‑二氯联苯、2,3‑二氯联苯等低氯联苯的检测下限小于1μM。

    一种比酶活及热稳定性提高的低温碱性果胶酶突变体

    公开(公告)号:CN108588061B

    公开(公告)日:2022-01-28

    申请号:CN201810396518.X

    申请日:2018-04-28

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明公开了一种比酶活及热稳定性提高的低温碱性果胶裂解酶突变体。该突变体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;或在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础上缺失、替换、插入或/和添加一个至几个氨基酸的保守性突变而获得的具有低温碱性果胶裂解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的突变体的比酶活及热稳定性均有较大幅度的提高,更加适合纺织脱胶、洗涤等领域工业化生产的需要,满足社会生产的需求。

    一种比酶活及热稳定性提高的低温碱性果胶酶突变体

    公开(公告)号:CN108588061A

    公开(公告)日:2018-09-28

    申请号:CN201810396518.X

    申请日:2018-04-28

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明公开了一种比酶活及热稳定性提高的低温碱性果胶裂解酶突变体。该突变体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;或在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础上缺失、替换、插入或/和添加一个至几个氨基酸的保守性突变而获得的具有低温碱性果胶裂解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的突变体的比酶活及热稳定性均有较大幅度的提高,更加适合纺织脱胶、洗涤等领域工业化生产的需要,满足社会生产的需求。

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