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公开(公告)号：CN118256565A
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202410427777.X
申请日：2024-04-10
Applicant: 湖北大学
IPC: C12N15/87 , C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种真核生物来源的Cs_Argonaute蛋白质及其应用，所述Cs_Argonaute蛋白质为氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的蛋白质，或为与SEQ ID NO:1所示序列的非催化活性位点具有至少90％序列一致性且功能相同的蛋白质；该Cs_Argonaute蛋白质不仅具有对单链向导DNA、RNA互补配对的靶RNA具有专一性核酸酶活性，而且具有对单链向导RNA互补配对的靶DNA具有核酸酶活性，更特别之处在于具有对单链向导DNA互补配对的靶DNA具有核酸酶活性，这在之前的研究中鲜有报道。本发明为基于真核生物来源的Argonaute蛋白质的基因编辑、修饰及分子检测提供了一种新的工具。
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公开(公告)号：CN110331202A
公开(公告)日：2019-10-15
申请号：CN201910689043.8
申请日：2019-07-29
Applicant: 湖北大学
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6858
Abstract: 本发明提供了一种用于检测BRAC1基因SNP的试剂盒与方法，所述试剂盒包括(1)SNP位点的上下游引物组：分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示；(2)DNA guides：分别如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示；(3)不同荧光基团标记的分子信标：如SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16所示；(4)DNA编辑酶PfAgo；该方法特异性强，灵敏度高。
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公开(公告)号：CN113373129B
公开(公告)日：2022-07-26
申请号：CN202110581929.8
申请日：2021-05-25
Applicant: 湖北大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种原核生物来源的Mbp_Argonaute蛋白及其应用，所述Mbp_Argonaute蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1或如与SEQ ID NO：1具有至少50％或至少80％同源性的序列所示。本发明合成了一种来源于耐冷原核生物Mucilaginibacter paludis的Argonaute蛋白基因，将该蛋白命名为MbpAgo，研究发现该MbpAgo对单链向导DNA具有结合活性，并且对与单链向导DNA互补配对的靶RNA和/或靶DNA具有核酸酶活性，因此可利用所述MbpAgo进行体内外靶向RNA编辑，进而对遗传材料进行特异性位点修饰。所述MbpAgo不仅可对高级结构的RNA进行修饰，而且不会影响动植物细胞的内源RNAi途径，为RNA编辑提供了一个全新的有力工具，并且切割活性强，特异性好。
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公开(公告)号：CN108874919B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN201810543841.5
申请日：2018-05-31
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明提供规划用地自动核查方法，包括步骤：图层管理，获取遥感影像作为底图，通过底图建立图层坐标系；规划数据加载，在图层坐标系下加载规划数据，将规划数据的点、线、面要素分为不同的矢量图层加载至底图上；轨迹管理，获取实时GPS信号生成的位置点，将位置点在轨迹图层中绘制成轨迹曲线，通过轨迹曲线拟合底图中的地物轮廓，由闭合的轨迹曲线生成面要素，将面要素存储于新轨迹图层；自动核查，计算规划数据图层的面要素与轨迹曲线生成的面要素的差异大小和差异位置。本发明能够有效提高规划用地核查效率，降低核查成本，为我国规划用地的核查工作提供有效的技术支撑。
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公开(公告)号：CN119752964A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411698812.8
申请日：2024-11-26
Applicant: 湖北大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N9/16 , C12N15/113 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种基于GgeAgo的DNA分子克隆方法及其应用。该方法包括载体质粒被切割体系剪切；载体质粒切割产物与具有同源区的外源片段混合后，采用基于重组的克隆方法进行装配后转化大肠杆菌，生成重组质粒。该切割体系包括向导核酸分子和可编程核酸内切酶GgeAgo或/和其突变体，GgeAgo在向导核酸分子的引导下切割质粒使其线性化，加入带有同源区的拟插入外源片段，转化大肠杆菌后，实现将外源片段高效准确地插入目标质粒。本发明提供的分子克隆方法效率高，时间短，操作简便，有效降低由PCR带来的突变。本发明提供的分子克隆方法为基于Ago的分子克隆技术和DNA的合成与组装技术提供新思路。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118773227A
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202410806190.X
申请日：2024-06-21
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明公开了一种构像信号肽介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达的方法，具体为：将至少两个异源蛋白同时融合至构像信号肽（如sfGFP）上并构建异源重组蛋白表达载体，其中构像信号肽具有β‑桶状结构，且融合位点为构像信号肽的氨基端、羧基端以及多个Loop环中的至少两个；再将异源重组蛋白表达载体转化至大肠杆菌，对所得基因工程菌株进行培养表达。本发明方法无需通过经典信号肽介导，即可实现异源蛋白在大肠杆菌中胞外分泌表达，且sfGFP作为融合标签对目的蛋白功能无影响，能够快速表达纯化到相应的目的蛋白；本发明拓展了蛋白分泌表达的途径，可实现多种异源蛋白的同时表达，还可有效提高目的蛋白的表达量。
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公开(公告)号：CN108874919A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810543841.5
申请日：2018-05-31
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明提供规划用地自动核查方法，包括步骤：图层管理，获取遥感影像作为底图，通过底图建立图层坐标系；规划数据加载，在图层坐标系下加载规划数据，将规划数据的点、线、面要素分为不同的矢量图层加载至底图上；轨迹管理，获取实时GPS信号生成的位置点，将位置点在轨迹图层中绘制成轨迹曲线，通过轨迹曲线拟合底图中的地物轮廓，由闭合的轨迹曲线生成面要素，将面要素存储于新轨迹图层；自动核查，计算规划数据图层的面要素与轨迹曲线生成的面要素的差异大小和差异位置。本发明能够有效提高规划用地核查效率，降低核查成本，为我国规划用地的核查工作提供有效的技术支撑。
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公开(公告)号：CN119662780A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411698814.7
申请日：2024-11-26
Applicant: 湖北大学
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/686 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种靶标核酸分子的检测体系及其应用。该检测体系包括：(a)向导核酸分子：gDNA，所述的gDNA的长度为16‑20nt，并且所述的gDNA为5’磷酸化的单链DNA分子；(b)可编程核酸内切酶GgeAgo或/和其突变体，(c)靶标核酸分子；(d)荧光报告核酸，其带有荧光基团和淬灭基团。该检测体系成本相对较低，操作简单，特异性高，大大缩短核酸检测时间。检测灵敏最低核酸靶标检测限为5拷贝/反应。而且本发明开发的核酸检测方法还能在较短时间内对低丰度目标核酸样本进行有效富集和区分。本发明提供的核酸检测方法可广泛应用于分子诊断、食品检测以及环境监测等诸多领域。
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公开(公告)号：CN119060984A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411096702.4
申请日：2024-08-12
Applicant: 湖北大学
Abstract: 本发明提供了一种同时具有切割DNA和RNA的高温原核Argonaute核酸酶及其应用，属于合成生物学和生物技术领域。本发明首次发现了嗜热菌来源的Argonaute核酸酶具体为如下A1）或A2）：A1）氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；A2）在A1）的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。该酶可同时利用5’‑磷酸化的gDNA和5’‑羟基化的gDNA介导单链核酸靶标的剪切，耐高温50~85℃，且具有高特异性，有利于推进体内外DNA和RNA操作工具的开发。
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公开(公告)号：CN113373129A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110581929.8
申请日：2021-05-25
Applicant: 湖北大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种原核生物来源的Mbp_Argonaute蛋白及其应用，所述Mbp_Argonaute蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1或如与SEQ ID NO：1具有至少50％或至少80％同源性的序列所示。本发明合成了一种来源于耐冷原核生物Mucilaginibacter paludis的Argonaute蛋白基因，将该蛋白命名为MbpAgo，研究发现该MbpAgo对单链向导DNA具有结合活性，并且对与单链向导DNA互补配对的靶RNA和/或靶DNA具有核酸酶活性，因此可利用所述MbpAgo进行体内外靶向RNA编辑，进而对遗传材料进行特异性位点修饰。所述MbpAgo不仅可对高级结构的RNA进行修饰，而且不会影响动植物细胞的内源RNAi途径，为RNA编辑提供了一个全新的有力工具，并且切割活性强，特异性好。
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