用于现场检测ASFV的组合物、RAA试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN118835003A

    公开(公告)日:2024-10-25

    申请号:CN202411237702.1

    申请日:2024-09-03

    摘要: 本发明属于动物病原检测技术领域,具体涉及一种用于现场检测ASFV的组合物、RAA试剂盒及方法。本发明首次基于RAA测流层析免疫试纸条技术,提供了一种不需提取基因组,不需要特殊的设备和专业的检测人员就可以直接从环境样本、体液样本或组织样本中检测ASFV病毒的引物探针组合、RAA试剂盒和方法。该试剂盒由裂解液、冻干的反应体系、带有Biotin抗体和FAM抗体的试纸条组成,其中,冻干的反应体系包含适用于现场检测非洲猪瘟病毒的引物和探针。该方法具有操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好、准确度高等特点,适用于在养殖场、屠宰场、菜市场和生猪流通的各个环节中非洲猪瘟病毒的现场检测。

    化脓隐秘杆菌分子分型方法、装置及介质

    公开(公告)号:CN117037911A

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202310940224.X

    申请日:2023-07-28

    摘要: 本发明公开了一种化脓隐秘杆菌分子分型方法、装置及介质,该方法包括:获取化脓隐秘杆菌的包含plo全基因的PCR产物、plo全基因序列和/或PLO蛋白质全序列;对所述PCR产物进行序列测定;基于化脓隐秘杆菌plo全基因序列,将测定的序列进行拼接以获得plo全基因序列;或采用核苷酸序列翻译软件翻译所拼接的plo全基因以获得PLO蛋白质全序列。根据获取的plo全基因序列和/或PLO蛋白质全序列构建分子进化树。本发明采用构建分子进化树的方式对化脓隐秘杆菌进行分子分型,所展示的分型能反映菌株‑宿主种属关联,可用于菌株宿主溯源。

    一种化脓隐秘杆菌的检测引物及检测试剂盒

    公开(公告)号:CN108048588A

    公开(公告)日:2018-05-18

    申请号:CN201810043015.4

    申请日:2018-01-17

    摘要: 本发明属于分子生物学领域,具体涉及一种化脓隐秘杆菌的检测引物及检测试剂盒。本发明针对化脓隐秘杆菌的溶血素PLO基因序列建立特异、灵敏的PCR方法,能够准确检测化脓隐秘杆菌,区分山羊脓性感染的其他病原体。本发明提供阳性对照菌和阴性对照菌供使用者确定试剂盒质量和评估方法的准确性。本发明提供的试剂盒及方法可在基层常规动物疫病诊断实验室使用,目标条带清晰易辨,1小时即可完成PCR反应,对于监控该菌的繁殖、疾病发生与流行及疾病的及时防治均具有重要意义。

    利用肝素琼脂糖珠从化脓隐秘杆菌中提取PLO的方法

    公开(公告)号:CN118221789A

    公开(公告)日:2024-06-21

    申请号:CN202410318607.8

    申请日:2024-03-20

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种利用肝素琼脂糖珠从化脓隐秘杆菌中提取PLO的方法。该方法包括:1)化脓隐秘杆菌预处理:采用培养基复苏化脓隐秘杆菌,挑取单菌落接种于培养基中,振摇培养,得到化脓隐秘杆菌培养物;所述化脓隐秘杆菌培养物经离心、洗涤、悬浮,得到预处理的化脓隐秘杆菌;2)采用细菌膜蛋白提取试剂盒对预处理后的化脓隐秘杆菌进行分离提取,得到化脓隐秘杆菌蛋白质;3)将步骤2)制得的化脓隐秘杆菌蛋白质与肝素琼脂糖珠混合孵育,洗涤和洗脱后得到PLO。该方法成功实现了化脓隐秘杆菌中高纯度PLO的提取,利用肝素琼脂糖珠使PLO得到有效富集,PLO纯度高达98%。

    筛分病菌模型的系统及筛分方法

    公开(公告)号:CN112611864B

    公开(公告)日:2024-03-12

    申请号:CN202011395742.0

    申请日:2020-12-03

    摘要: 本发明属于病菌筛分领域,具体涉及一种筛分感染化脓隐秘杆菌或感染伪结核棒状杆菌模型的系统及方法。所述系统包括酶标板、加热器、试剂、数据库、酶标仪、数据对比输出模块;所述酶标板包括聚苯乙烯/聚氯乙烯材料标板,包括96孔或48孔;试剂包括抗原包被液、酶标抗体、显色液、病菌感染模型或免疫模型血清;数据库为健康或感染或免疫的动物模型产生不同的抗体量的吸光度,可导入和可删除;所述酶标仪设置波长为450nm。本发明提供的筛分系统的数据库完善,筛分的结果精确,可以快速筛分出感染病菌模型的病菌类型,简单方便。

    检测蜂房球菌的特异性PCR扩增引物对、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN112795670A

    公开(公告)日:2021-05-14

    申请号:CN202110134048.1

    申请日:2021-01-27

    摘要: 本发明属于生物病原体检测技术领域,具体涉及一种检测蜂房球菌的特异性PCR扩增引物对、检测方法及应用。该检测方法先提取蜜蜂幼虫DNA,然后使用引物对WxlF2:5′‑ACTGATCCAACAGATCCAAC‑3′,WxlR2:5′‑TCCCTTAAAGTCAGACAAGC‑3′;或WxlF3:5′‑AACAGATCCAACTGGTCAAA‑3′,WxlR3:5′‑CTTAAAGTCAGACAAGCCGA‑3′进行PCR扩增,最后进行电泳观察扩增情况从而判断是否携带蜂房球菌。该检测方法不用分离蜂房球菌单菌落,简单易行,而且PCR扩增时间可控制在1h以内,可满足欧洲幼虫腐臭病的快速检测需求。