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    Verfahren zur Herstellung von L-Lysin durch Fermentation von coryneformen Bakterien
    4.
    发明公开
    Verfahren zur Herstellung von L-Lysin durch Fermentation von coryneformen Bakterien 失效
    Verfahren zur Herstellung von L-Lysin durch发酵von coryneformen Bakterien。

    公开(公告)号：EP0555661A1

    公开(公告)日：1993-08-18

    申请号：EP93100693.6

    申请日：1993-01-19

    申请人： Degussa Aktiengesellschaft

    发明人： Bachmann, Bernd, Dr. ,  Kautz, Sabine ,  Thierbach, Georg, Dr. ,  Pühler, Alfred, Prof. Dr. ,  Kalinowski, Jörn, Dr.

    IPC分类号： C12P13/08 ,  C12N1/20 ,  C12N15/01

    CPC分类号： C12P13/08 ,  C12N15/01

    摘要： Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von L-Lysin durch Fermentation von coryneformen Bakterien, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man aufgrund einer Insertionsmutagenese Homoserin Dehydrogenase defekte Mutanten dieser Bakterien einsetzt, die man im allgemeinen so erhält, indem man Zellen der zu mutierenden Bakterien mit einem einen mobilisierbaren Vektor tragenden E.coli Mobilisatorstamm kreuzt, wobei in den Vektor ein DNA-Fragment eines Homoserin-Dehydrogenase-Gens (hom-Gen) inseriert ist, das in dem zu transformierenden Bakterium mit dem entsprechenden homologen Gen rekombiniert.

    摘要翻译： 该方法的特征在于使用的细菌是突变体，其由于插入诱变而在高丝氨酸脱氢酶中是有缺陷的，并且通常通过将待突变的细菌的细胞与携带可运动的大肠杆菌动员系统 载体，其中将高丝氨酸脱氢酶基因（hom基因）的DNA片段插入载体中并与要转化的细菌中的适当同源基因重组。

    Verfahren zum Auffinden von Insertionselementen (IS-Elemente) oder Transposonen
    7.
    发明公开
    Verfahren zum Auffinden von Insertionselementen (IS-Elemente) oder Transposonen 失效
    Verfahren zum Auffinden von Insertionselementen（IS-Elemente）oder Transposonen。

    公开(公告)号：EP0563527A1

    公开(公告)日：1993-10-06

    申请号：EP93101279.3

    申请日：1993-01-28

    申请人： Degussa Aktiengesellschaft

    发明人： Schäfer, Andreas ,  Seep-Feldhaus, Anna-Hildegard ,  Jäger, Wolfgang ,  Kalinowski, Jörn, Dr. ,  Wohlleben, Wolfgang, Dr. ,  Pühler, Alfred, Prof. Dr.

    IPC分类号： C12N15/77 ,  C12N15/11 ,  C12P19/34

    CPC分类号： C12N9/1055 ,  C07K14/34 ,  C12N15/11 ,  C12N15/77 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/689 ,  Y10S435/843

    摘要： Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Auffinden von Insertionselementen (IS-Elemente) oder Transposonen in coryneformen Bakterien, ein dazu geeignetes positives Selektionssystem, die so gefundenen IS-Elemente und ihre Verwendung.
    Das Verfahren umfaßt:

    1.1. die Konstruktion eines aus einem E.coli Mobilisatorstamm mobilisierbaren, nicht selbsttransferierbaren Vektors, zusammengesetzt aus
    1.1.1 einem DNA-Segment, enthaltend ein in E.coli funktionelles Replikon,
    1.1.2 einem zweiten DNA-Segment, enthaltend das für die Mobilisierungsfunktion codierende DNA-Fragment (Mob-site enthaltend den oriT),
    1.1.3 einem dritten DNA-Segment, das in Gram-positiven Bakterien homolog rekombiniert und/oder ein in coryneformen Bakterien funktionelles Replikon enthält
    1.1.4 einem das sacB-Gen enthaltenden DNA-Segment aus Bacillus subtilis,
    1.2. Übertragung dieses Vektors durch konjugativen Transfer in die coryneformen Rezipientenstämme,
    1.3. Anzucht der den Vektor enthaltenden Transkonjuganten in einem 10 % Sucrose enthaltenden Nährmedium,
    1.4. Lyse der Sucrose-resistenten Klone, Spaltung der Plasmide mit Restriktionsendonucleasen und Analyse der Fragmente.

    摘要翻译： 本发明涉及一种用于检测棒状细菌中插入元件（IS元件）或转座子，适用于此目的的正选择系统，以这种方式发现的IS元件及其用途的方法。 该过程包括：1.1。 构建可从大肠杆菌动员菌株运动的载体不是可自转的，并且由1.1.1组成，其含有在大肠杆菌中有功能的复制子的DNA片段，1.1.2含有 编码动员功能的DNA片段（含有oriT的Mob位点），1.1.3在革兰氏阳性细菌中进行同源重组的第三个DNA片段和/或含有在棒状细菌中有功能的复制子1.1.4 DNA区段 其含有sacB基因并衍生自枯草芽孢杆菌1.2。 通过共轭转移将该载体转移到棒状细胞受体菌株中，1.3。 在含有10％蔗糖的营养培养基中培养含有载体的转导结合物，1.4。 蔗糖抗性克隆的裂解，用限制性内切核酸酶切割质粒并分析片段。