一种敲除杆状杆粒病毒必需基因的方法

    公开(公告)号:WO2022236720A1

    公开(公告)日:2022-11-17

    申请号:PCT/CN2021/093175

    申请日:2021-05-11

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 苏武杰 李兵

    Abstract: 提供了一种敲除杆状病毒必需基因的方法,包括以下步骤:将转移载体和改造的杆状病毒杆粒在家蚕细胞中进行同源重组和纯化,并抽提DNA,再转化大肠杆菌感受态,挑取菌落做菌液PCR,得到含有中间敲除株的菌株,然后将中间敲除株病毒与未经改造的杆粒病毒共感染家蚕细胞进行同源重组并抽提DNA,再转化大肠杆菌感受态,挑取蓝色菌落做菌液PCR,得到含有必需基因敲除的杆粒的菌株,实现杆状病毒必需基因的敲除。

    METHOD OF PRODUCING A PRODUCTION CELL LINE
    4.
    发明申请
    METHOD OF PRODUCING A PRODUCTION CELL LINE 审中-公开
    生产细胞系的方法

    公开(公告)号:WO2017121896A1

    公开(公告)日:2017-07-20

    申请号:PCT/EP2017/050793

    申请日:2017-01-16

    Applicant: BAUER, Anton

    CPC classification number: C12N15/85

    Abstract: A method for producing a eukaryotic production cell line expressing a protein of interest (POI), comprising a) incorporating a gene of interest (GOI) encoding said POI into the chromosome of a eukaryotic host cell within an exogenous euchromatin protein expression locus by transfection, thereby obtaining a repertoire of recombinant host cells in a pool; b) selecting a single cell from said pool within 12 days after transfection, wherein selecting is at least according to the expression of said GOI or a marker indicating said expression; and c) isolating and expanding the selected single cell, thereby obtaining the production cell line.

    Abstract translation: 一种生产表达感兴趣蛋白质(POI)的真核生产细胞系的方法,包括a)将编码所述POI的感兴趣基因(GOI)并入到真核生物宿主细胞的染色体中 通过转染获得外源性常染色质蛋白质表达基因座,从而获得重组宿主细胞库中的库; b)转染后12天内从所述池中选择单细胞,其中选择至少根据所述GOI的表达或指示所述表达的标记; 和c)分离并扩增选择的单细胞,从而获得生产细胞系。

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