本发明公开了一种布鲁氏菌病特异性融合蛋白抗原，是将布鲁氏菌外膜蛋白BP26、OMP31、OMP16、OMP2b优势抗原表位的氨基酸序列进行串联，构建了融合蛋白基因，插入pET‑28b中，在大肠杆菌BL21(DE3)表达的融合蛋白，在构象上接近天然蛋白，并保持了天然蛋白的抗原性与可溶性，并以其为诊断抗原制备了人布鲁氏菌病抗体ELISA试剂盒。该试剂盒克服了传统病原学诊断分离培养增菌时间长、容易对环境造成污染和传染人的不足，同时可改善传统免疫学方法交叉反应严重的缺点。该检测方法具有特异性强、重复性好、灵敏度高的优点，为布鲁氏菌病的快速、准确、特异诊断提供手段，也为布鲁氏菌病患者的早诊断、早治疗提供依据。