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公开(公告)号：CN102382786A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201110333678.8
申请日：2011-10-28
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及碱性蛋白酶高产菌株及碱性蛋白酶，其中菌株的分类命名为嗜碱芽孢杆菌Bacillus alcalophilus，保藏编号为：CGMCC No.5313，保藏日期：2011年9月30日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，酶由碱性蛋白酶高产菌株发酵得到。本发明中诱变获得的产碱性蛋白酶菌株是由嗜碱芽孢杆菌经过低能N+离子注入诱变而得的碱性蛋白酶高产菌株，有效地提高了菌株的产酶能力，其碱性蛋白酶的摇瓶活力最大值到30700U/mL，较出发菌株提高了37.7％。
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公开(公告)号：CN102382771A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201110243864.2
申请日：2011-08-25
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及了一种利用体外微生物发酵法模拟体内肠道微生物转化的方式对京尼平苷进行有效的转化而生成京尼平，即利用本实验室筛选保藏的β-葡萄糖苷酶的高产菌发酵中药栀子，通过单因素实验优化，确定微生物转化得到产物京尼平的最佳条件，一方面在温和条件下水解其中的京尼平苷，避免了传统方法导致有效成分损失的缺陷，另一方面利用现代微生物发酵工程技术使桅子的有效成分京尼平苷在体外可控条件下实现规模转化，具有较大的经济效益和社会效益，市场开发前景广阔。
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公开(公告)号：CN101781641B
公开(公告)日：2012-02-08
申请号：CN200910070737.X
申请日：2009-10-09
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种碱性果胶酶基因工程菌培养条件的优化方法，步骤如下：(1)采用单因素实验对碱性果胶酶基因工程菌的发酵培养基组成进行优化，得到初步优化的发酵培养基；(2)响应面方法对目标菌种培养基进行优化，得到目标菌种培养基；(3)采用后优化培养基，对目标菌种进行发酵培养条件优化，得到优化培养条件。本发明摸索到一套最优的发酵培养条件，使工程菌发酵所产生的酶活达到758.7825U/ml，比原始野生型菌株产碱性果胶酶活性提高了50倍，比LB培养基发酵基因工程菌产碱性果胶的酶活力提高了3倍，对提高工业酶的市场竞争力有着非常重要的意义。
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公开(公告)号：CN102286439A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110249360.1
申请日：2011-08-29
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种以大孔阴离子树脂为填充料的果糖基转移酶的初纯化方法，将经预处理大孔阴离子树脂装层析柱，用磷酸缓冲液冲洗层析柱层析柱，平衡层析柱，将含有果糖基转移酶的粗酶液上样，用两倍体积的磷酸缓冲液洗脱，再用两倍体积的磷酸缓冲液配置的1mol/mL的NaCl溶液0-1mol/mL梯度洗脱，用UV280nm在线监测，收集有酶活的峰，将收集到有酶活的酶液浓缩即得果糖基转移酶。本发明通过先球磨再超高压均质的方法得到了酶活较高的酶液，再采用大孔阴离子树脂D290为填充料对果糖基转移酶进行初纯化，得到具有一定纯度的果糖基转移酶，对于利用果糖就转移酶生产低聚果糖具有十分重要的现实意义和工业价值。
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公开(公告)号：CN102277344A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110220386.3
申请日：2011-08-03
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种低温碱性蛋白酶及其制备方法，属于用重组DNA技术定点突变野生型碱性蛋白酶基因，以改善其特性，并将突变后基因与大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒pBE2S连接，将其在枯草芽孢杆菌中高效表达的方法，涉及具有适冷性及碱稳定性的低温碱性蛋白酶及其制备方法。本发明解决了碱性蛋白酶在低温环境下活性较低，以致应用受限的问题。其技术方案是从微生物特别是嗜碱芽孢杆菌分离野生型碱性蛋白酶基因，对其Glu110、Glu134的氨基酸残基进行突变，经在枯草芽孢杆菌中高效表达，检测其发酵液酶活力达到1985U/mL，在40℃下，该低温碱性蛋白酶(Glu110&134Ala)比野生型碱性蛋白酶活力提高了28％；在10℃下，比野生型碱性蛋白酶活力提高了62％。
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公开(公告)号：CN101298604B
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN200810053625.9
申请日：2008-06-25
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种高温耐酸性α-淀粉酶的突变株及其构建方法，是将地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因经突变后(Leu134→Arg和Ser320→Ala)获得的高温耐酸性α-淀粉酶基因，通过构建打靶载体，利用同源重组的方法，将其整合到出发菌株地衣芽孢杆菌的基因组DNA中，得到了地衣芽孢杆菌突变株，实现高温耐酸性α-淀粉酶的同源高效表达。本发明中的突变株所产α-淀粉酶在本身耐高温的基础上，酸稳定性也有了明显地提高，为我国酒精、淀粉糖化等淀粉深加工行业提供了更好的工艺条件，降低了成本，节省了能源和工业用粮，满足了一些在酸性条件下进行淀粉原料液化工艺的要求。
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公开(公告)号：CN116970592B
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202310848260.3
申请日：2023-07-11
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及热稳定性提高的氨肽酶突变体，属于基因工程、酶工程及食品工程技术领域。所述氨肽酶突变体是在SEQ ID NO：2所示的野生型氨肽酶基础上，发生如下突变中的至少一种获得的：T51C、S268C、A149C或A165C。其中，氨肽酶突变体T51C+S268C，在60℃保温30min后仍有36％的残余酶活，相较于原始氨肽酶提高了71.4％；氨肽酶突变体A149C+A165C最适反应温度提高了5℃，在60℃保温30min后仍有34.3％的残余酶活，相较于原始菌株提高了63.3％。有利于拓宽氨肽酶在食品加工技术领域高温条件下的应用。
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公开(公告)号：CN118240004A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410284782.X
申请日：2024-03-13
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及芽孢杆菌来源碱性蛋白酶的竞争性抑制剂，发明获得了一种新型抑制肽，该抑制肽及其衍生物对芽孢杆菌来源碱性蛋白酶具有明显的抑制作用，在芽孢杆菌来源碱性蛋白酶的液体酶制剂中添加该抑制肽，蛋白酶活力保存的稳定性明显增强。该抑制剂在环保和安全性上具有明显的优势，有望应用于液体加酶洗涤剂领域，替代传统的硼砂类抑制剂。
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公开(公告)号：CN117603967A
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202311314646.2
申请日：2023-10-11
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于微生物与基因工程技术领域，具体涉及一种启动子PM311及其应用。所述启动子PM311，是通过对枯草芽孢杆菌来源的启动子分析改造获得的，核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明所述突变启动子PM311实现了氨肽酶的高效异源表达，相较于原始启动子，氨肽酶酶活提高了136％，为进一步实现氨肽酶YwaD的高效表达提供了参考依据，同时也为氨肽酶的工业化生产奠定基础。
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公开(公告)号：CN115125246B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202210671303.0
申请日：2022-06-14
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/65
摘要： 本发明通过对芽孢杆菌来源的启动子‑10区序列定向改造获得了一种强度提高的启动子突变体，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还提供包含该启动子突变体的表达载体、表达系统。本发明所述启动子突变体用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可以将绿色荧光蛋白GFP异源表达活性提高至170％，介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源蛋白的表达奠定基础。
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