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公开(公告)号：CN104017786A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410279966.3
申请日：2014-06-20
申请人： 天津科技大学
CPC分类号： C12N9/18 , C12Y301/01004
摘要： 本发明涉及一种磷脂酶A2突变体及其制备的方法，其技术方案是利用重组DNA技术定点突变来源于天蓝色链霉菌的野生型磷脂酶A2的Glu37、Asp78的氨基酸残基，得到活力较高的磷脂酶A2基因，然后将高活力磷脂酶A2基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶A2的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶A2的比酶活较野生型磷脂酶A2提高13.7％，其中枯草芽孢杆菌高活力磷脂酶A2重组菌发酵后磷脂酶A2的酶活可达到53.5U/ml，毕赤酵母游离表达高活力磷脂酶A2重组菌的酶活可达106.4U/ml，毕赤酵母细胞表面展示高活力磷脂酶A2全细胞催化剂的酶活可达260U/(g·干细胞)。
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公开(公告)号：CN103045624B
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201210470064.9
申请日：2012-11-20
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种耐高温高碱木聚糖酶及其基因、工程菌和制备方法，其技术方案是利用易错PCR和定点突变技术对来源于坎皮纳斯类芽孢杆菌的木聚糖酶基因XynG1-1进行耐高温和高碱的定向分子改造，得到耐高温高碱的木聚糖酶突变基因XynG1-1B43CC16，并利用巨大芽孢杆菌表达系统，分泌表达耐高温高碱木聚糖酶的方法。本发明解决了现有木聚糖酶耐高温与耐碱性无法同时兼顾，造成其在造纸工业中应用受限的问题，满足了木聚糖酶在高温和高碱性环境下进行生物制浆和生物漂白的要求，可提高纸浆白度和得率，减少造纸工业中化学试剂的用量，降低环境污染，促进造纸工业的清洁生产。
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公开(公告)号：CN102321558B
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201110282029.X
申请日：2011-09-22
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明公开了一种耐高温木聚糖酶的高产菌株及利用该菌株发酵产耐高温木聚糖酶的方法，并阐述了该酶的部分酶学性质。经菌种鉴定，将该菌命名为坎皮纳斯类芽孢杆菌G1-1(Paenibacillus campinasensis G1-1)，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号为CGMCC No.5023。该菌种发酵得到的耐高温木聚糖酶，经分离纯化得到单一组分，其相对分子量为41.3KDa，最适作用温度及pH分别为60℃和7.0；在40℃～70℃和pH 5.0～9.0范围内酶活保持相对稳定。本坎皮纳斯类芽孢杆菌木聚糖酶适合造纸、食品和饲料等多个工业领域的应用，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102787130B
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201210246909.6
申请日：2012-07-17
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种耐酸性高温α-淀粉酶及其基因、工程菌和制备方法，其技术方案是利用重组DNA技术定点突变地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因，得到耐高温α-淀粉酶耐酸性突变基因，即耐酸性高温α-淀粉酶基因，并利用枯草芽孢杆菌表达系统，分泌表达耐酸性高温α-淀粉酶的方法。本发明解决了现有耐高温α-淀粉酶耐酸性较差，耐高温与耐酸性无法同时兼顾，造成应用受限的问题，满足了一些在酸性和高温环境下进行淀粉原料液化工艺的要求，可提高产品收得率及质量，简化工艺。
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公开(公告)号：CN102433287A
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN201110446721.1
申请日：2011-12-28
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种直投式枯草芽孢杆菌发酵剂及其制备方法，包括枯草芽孢杆菌种子培养、枯草芽孢杆菌高密度放大培养、冷冻干燥法制备菌体发酵剂，最后得到直投式枯草芽孢杆菌发酵剂，所述枯草芽孢杆菌种子培养及高密度放大培养的培养基重量百分比为：蔗糖2，豆粕1，磷酸二氢钾0.1，硫酸镁0.05，加水至100％，pH7.0-7.2。冷冻干燥法制备菌体发酵剂浓缩条件为：离心转速5000r/min，离心10min，离心温度为4℃，冻干保护剂为5％麦芽糊精、4％蔗糖、0.8％海藻糖、0.2％吐温。用本方法生产的直投式枯草芽孢杆菌发酵剂的存活率为95.3％，活菌数为2.69×1010cfu/g，按照1‰的接种量便可达到理想的液态和固态发酵效果。基于本菌株开发了一种新型高活性的直投式枯草芽孢杆菌发酵剂的制备方法应用于枯草芽孢杆菌相关产品的液态发酵和固态发酵。
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公开(公告)号：CN102382786A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201110333678.8
申请日：2011-10-28
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及碱性蛋白酶高产菌株及碱性蛋白酶，其中菌株的分类命名为嗜碱芽孢杆菌Bacillus alcalophilus，保藏编号为：CGMCC No.5313，保藏日期：2011年9月30日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，酶由碱性蛋白酶高产菌株发酵得到。本发明中诱变获得的产碱性蛋白酶菌株是由嗜碱芽孢杆菌经过低能N+离子注入诱变而得的碱性蛋白酶高产菌株，有效地提高了菌株的产酶能力，其碱性蛋白酶的摇瓶活力最大值到30700U/mL，较出发菌株提高了37.7％。
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公开(公告)号：CN102277344A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110220386.3
申请日：2011-08-03
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种低温碱性蛋白酶及其制备方法，属于用重组DNA技术定点突变野生型碱性蛋白酶基因，以改善其特性，并将突变后基因与大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒pBE2S连接，将其在枯草芽孢杆菌中高效表达的方法，涉及具有适冷性及碱稳定性的低温碱性蛋白酶及其制备方法。本发明解决了碱性蛋白酶在低温环境下活性较低，以致应用受限的问题。其技术方案是从微生物特别是嗜碱芽孢杆菌分离野生型碱性蛋白酶基因，对其Glu110、Glu134的氨基酸残基进行突变，经在枯草芽孢杆菌中高效表达，检测其发酵液酶活力达到1985U/mL，在40℃下，该低温碱性蛋白酶(Glu110&134Ala)比野生型碱性蛋白酶活力提高了28％；在10℃下，比野生型碱性蛋白酶活力提高了62％。
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公开(公告)号：CN101210259B
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN200710060202.5
申请日：2007-12-25
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于微生物制药及医药工程领域，具体涉及以简单节杆菌为菌种、醋酸氢化可的松为底物并采用微生物转化的一种醋酸泼尼松龙的生产方法。本方法是用简单节杆菌为菌种，经一级种子培养、二级发酵培养、在菌体发酵液中投入醋酸氢化可的松转化生成醋酸泼尼松龙；需要说明的是在将菌体制成双液相、破碎细胞、原生质体，其转化率都很高，转化完成后，过滤，收集滤饼，可制得醋酸泼尼松龙。本发明所涉及的生产方法是以醋酸氢化可的松为原料替代醋酸可的松，收率高，工艺简单，经济实用，能够尽量避免使用各种有害试剂，对用生物转化法生产甾体药物有着非常重要的意义。
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公开(公告)号：CN101298604B
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN200810053625.9
申请日：2008-06-25
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种高温耐酸性α-淀粉酶的突变株及其构建方法，是将地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因经突变后(Leu134→Arg和Ser320→Ala)获得的高温耐酸性α-淀粉酶基因，通过构建打靶载体，利用同源重组的方法，将其整合到出发菌株地衣芽孢杆菌的基因组DNA中，得到了地衣芽孢杆菌突变株，实现高温耐酸性α-淀粉酶的同源高效表达。本发明中的突变株所产α-淀粉酶在本身耐高温的基础上，酸稳定性也有了明显地提高，为我国酒精、淀粉糖化等淀粉深加工行业提供了更好的工艺条件，降低了成本，节省了能源和工业用粮，满足了一些在酸性条件下进行淀粉原料液化工艺的要求。
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公开(公告)号：CN1943388B
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200610016405.X
申请日：2006-10-31
申请人： 天津科技大学
摘要： 以华根霉为菌种发酵制备大豆肽固体食品的方法涉及以大豆为原料、华根霉为菌种，发酵制备大豆肽固体食品的方法。本发明解决了发酵能力低及培养基成本高等问题。其方法是以能产纤溶酶的华根霉为菌种，以大豆为主要原料，经种子培养、发酵培养、打浆离心或过滤、干燥工艺得到含有大豆肽的固体食品。其中发酵培养基面粉与大豆按质量比为1∶8-10，加水量为0.6-0.8mL/g物料，于27-30℃培养50-70h。本发明提供了一种富含纤溶酶、营养丰富的保健食品。该产品可广泛用于医药、食品、饲料添加剂等诸多领域；且其制备工艺简单、周期短、成本低、适合工业化生产，为蛋白肽工业发展提供有效途径，具有较高的经济效益和社会效益。
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