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公开(公告)号：CN111676203B
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202010601081.6
申请日：2020-06-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种亮氨酸脱氢酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明提供了一种亮氨酸脱氢酶突变体，所述亮氨酸脱氢酶突变体与氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的亮氨酸脱氢酶相比，第72位氨基酸由赖氨酸突变为了丙氨酸，本发明首次对亮氨酸脱氢酶底物通道内碱性氨基酸残基进行定点突变，改造了酶可能底物结合位点附近的结构及环境，获得了更加高效制备L‑2‑氨基丁酸的亮氨酸脱氢酶。本发明提供的底物耐受性提高的亮氨酸脱氢酶突变体亮氨酸脱氢酶突变体K72A能耐受4.5g/L 2‑酮丁酸且对于底物2‑酮丁酸的催化活力提高了15％。
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公开(公告)号：CN113564183A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110800395.3
申请日：2021-07-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过过表达基因psrA提高粘质沙雷氏菌合成灵菌红素的方法，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在粘质沙雷氏菌中过表达LysR家族转录调控因子PsrA编码基因BVG90_12635(psrA)，显著提高了粘质沙雷氏菌合成灵菌红素能力；将利用本发明的方法制备得到的重组粘质沙雷氏菌在发酵培养基中发酵72h产灵菌红素发现，重组菌株发酵产灵菌红素能力较野生型菌株JNB5‑1相比，提高了33.58％。
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公开(公告)号：CN111718936B
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202010618552.4
申请日：2020-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种铵盐诱导型启动子及其在调控目的基因表达中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种铵盐诱导型启动子P‑Cgl2258，使用携带此铵盐诱导型启动子P‑Cgl2258的重组质粒在重组菌中表达目的基因时，可通过调控培养基中铵盐的浓度以调控目的基因的表达量，为重组菌在不同氮源条件下表达外源基因提供了有效的工具。
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公开(公告)号：CN113234620A
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110388080.2
申请日：2021-04-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株基于ARTP筛选获得的谷氨酰胺转氨酶高产突变株，属于微生物诱变育种领域。本发明所述茂源链霉菌Streptomyces sp.MTG‑7是以茂源链霉菌Streptomyces mobaraensis DB13为出发菌株，经常温常压等离子诱变筛选获得的。本发明所述茂源链霉菌MTG‑7在摇瓶水平上发酵84h，谷氨酰胺转氨酶酶活可达25U/mL，5L发酵罐发酵42h，谷氨酰胺转氨酶酶活高达80U/mL，最适温度和pH分别为50℃和7.0，且在pH 6.0‑8.0范围内仍保留90％以上的酶活，具有较好的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN112941059A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110203167.8
申请日：2021-02-23
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/82 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N1/21 , A23L5/20 , A23L19/18 , C12R1/19 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种L‑天冬酰胺酶突变体及其在枯草芽孢杆菌中的表达，属于酶工程和微生物工程技术领域。采用本发明公开的米黑根毛霉来源的L‑天冬酰胺酶突变体A344E在45℃、pH7.0的条件下酶活为786.8U/mg，为野生酶509.1U/mg的1.5倍；并且本发明的L‑天冬酰胺酶突变体可以实现在枯草芽孢杆菌中高效表达，采用本发明提供的方法，可以得到是一种表达的L‑天冬酰胺酶突变体酶活为原始菌株7.1倍的重组枯草芽孢杆菌，拓宽其在食品领域的应用范围，使L‑天冬酰胺酶能大规模应用于生产中。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112813043A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202110217977.9
申请日：2021-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活及稳定性提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。此突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的L‑乳酸脱氢酶的第184位氨基酸由天冬酰胺突变为天冬氨酸得到的；其比酶活可达563.3±6.5U/mg、Kcat/Km可达268.2±19.5mM‑1·S‑1，分别较野生型提高了1.15倍、2.73倍以2‑酮丁酸为底物，具有辅酶再生的(S)‑2‑羟基丁酸的不对称催化合成揭示了突变体在12小时内的产量为95.8g/L，与野生型相比提高1.05倍，因此本发明的L‑乳酸脱氢酶突变体更适合(S)‑2‑羟基丁酸生产。
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公开(公告)号：CN110438097B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201910750086.2
申请日：2019-08-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性与酶活提高的L‑异亮氨酸羟化酶突变体，具体公开了一种热稳定性与酶活提高的L‑异亮氨酸羟化酶突变体及其在4‑羟基异亮氨酸生产中的应用，属于基因工程技术领域。本发明提出的提高热稳定性的方法可用于其他羟化酶的改造，为生产其他高附加值羟化氨基酸提供了理论指导。利用本发明的的枯草芽孢杆菌工程菌生产得到的L‑异亮氨酸羟化酶的比酶活可达2.4±0.08U/mg，全细胞重复5批次，连续转化45h，可以得到856.91mM(126.1g/L)的4‑HIL，且5批次后，L‑异亮氨酸羟化酶的转化能力仍为第一次转化的84.1％。
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公开(公告)号：CN108642100B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201810468484.0
申请日：2018-05-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在钝齿棒杆菌中合成L‑鸟氨酸的方法，属于基因工程和代谢工程领域。本发明利用表达质粒pDXW10质粒，将N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶、N‑乙酰谷氨酸合酶进行表达并且对其RBS进行优化同时对起始密码子进行替代。5‑L发酵罐发酵培养重组钝齿棒杆菌SYPO/pDXW10‑EcargAHY‑SmargEb 72h，L‑鸟氨酸的产量达到46.2g/L，比出发菌株钝齿棒杆菌，L‑鸟氨酸的产量提高了62.2％，生产强度达到0.642g/L/h，并且糖酸转化率为0.414g/g。
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公开(公告)号：CN112080479A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202010945382.0
申请日：2020-09-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了比酶活高的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体V107A、T155N、H164Y和V107A/T155N/H164Y，17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体V107A、T155N、H164Y和V107A/T155N/H164Y的比酶活分别高达1.85、1.93、2.06和5.15U/mg，分别是野生型17β‑羟基类固醇脱氢酶(1.66U/mg)的1.11、1.16、1.24和3.10倍。
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公开(公告)号：CN108085309B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201711324136.8
申请日：2017-12-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐酸稳定性提高的β‑甘露聚糖酶突变体及其构建方法，属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.2所示的氨基酸的基础上，将第62位精氨酸突变成天冬氨酸。本发明得到的突变体在枯草芽孢杆菌中表达，摇瓶发酵24h后酶活为提高252.4U/mL，突变酶活提高了23.1％，纯化后比酶活提高34.2％，最适pH由6.5下降到5.2，提高了该酶的工业应用潜力，所得突变型β‑甘露聚糖酶可用于饲料添加用酶。
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