一种γ-聚谷氨酸的异源表达方法
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    发明公开

    公开(公告)号:CN113234764A

    公开(公告)日:2021-08-10

    申请号:CN202110546485.4

    申请日:2021-05-19

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种γ‑聚谷氨酸的异源表达方法,是一种从糖质原料一步法发酵合成不同D/L单体比的γ–PGA的生产工艺,以一株高产L‑Glu的C.glutamicum F343为底盘表达来自于地衣芽孢杆菌的γ–PGA合成酶的基因簇capBCA,合成了以L‑Glu为主(98.06)的γ–PGA。再通过外源添加不同浓度的D‑Glu,合成了γ–D‑PGA占比为2%‑33%的γ–PGA。结果显示,在48h时γ‑PGA的产量达到最高为5.33g/L。此外本发明对产自F343重组菌的γ‑聚谷氨酸的分子量进行了测定,结果显示,其重均分子量是产自地衣芽孢杆菌的天然γ‑聚谷氨酸的重均分子量的1.16倍。本发明成功地构建了聚谷氨酸的外源合成途径,节省了原料和过程控制成本,提高了经济效益,具有很好的工业应用价值和前景。

    一种用于特异性定量金山醋酸乳杆菌的分子标记和试剂盒以及应用

    公开(公告)号:CN112980980A

    公开(公告)日:2021-06-18

    申请号:CN202110440735.6

    申请日:2021-04-23

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种用于特异性定量金山醋酸乳杆菌的分子标记和试剂盒以及应用,属于生物工程领域。为了提高定量金山醋酸乳杆菌含量的准确性、稳定性和可靠性,节省定量的时间。本发明提供了一对特异性强,有效性好,准确性高的金山醋酸乳杆菌的分子标记和特异性定量金山醋酸乳杆菌的试剂盒,并构建了一种用于醋醅、酒醅、食醋样品中金山醋酸乳杆菌的快速鉴定、准确定量的实时荧光定量PCR方法,有助于在酿造生产过程或酿造产品中对该细菌的特异性定量和定性监测。

    一种分枝杆菌的17β-羟基类固醇脱氢酶突变体及其异源表达

    公开(公告)号:CN112592904A

    公开(公告)日:2021-04-02

    申请号:CN202011620795.8

    申请日:2020-12-31

    申请人: 江南大学

    发明人: 许正宏 李会 刘伟

    摘要: 本发明公开了一种分枝杆菌的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体及其异源表达,属于酶基因工程及酶工程领域。本发明提供一种来自于分枝杆菌(Mcobacterium sp.)LY‑1的放线菌17β‑羟基类固醇脱氢酶17β‑HSDy1及其基因序列,以pMA5为表达质粒,以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主,实现了分枝杆菌LY‑1的17β‑HSDy1的外源表达。对软件模拟获得的该酶关键T239位点,突变成了酪氨酸,酶活提高了19.2%,达到9571.77U·mg‑1。对突变获得的重组枯草芽孢杆菌WB600‑pMA5‑17βHSDy1‑T239Y进行酶活‑生长曲线的测定,在发酵28h时,重组枯草芽孢杆菌WB600‑pMA5‑17βHSDy1‑T239Y的比酶活达到最高。该异源表达菌株可用于雄甾烯‑1,4‑烯‑3,17‑二酮转化宝丹酮的生产,具有潜在的工业应用。

    一种具有抗氧化活性的金针菇酸性多糖的制备方法

    公开(公告)号:CN109988251B

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN201910339539.2

    申请日:2019-04-25

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C08B37/00 A61P39/06

    摘要: 本发明公开了一种具有抗氧化活性的金针菇酸性多糖的制备方法。本发明通过向金针菇菌丝体或子实体中,按照料液比1:2~8加入乙醇,匀浆1~5分钟,浸泡后离心取沉淀;向沉淀中,按照料液比1:4~6加入碱性溶液,在50~300MPa条件下均质1~4次,然后静置0.5~2小时,离心取上清液;将上清液进行透析,透析后进行浓缩得到浓缩液;向浓缩液中加入2~4倍体积的无水乙醇,静置,离心取沉淀;将沉淀干燥后得到所述的金针菇酸性多糖。本发明具有提取得率高,无需加热提取,活性成分破坏小,操作简便,对设备无腐蚀等优点。本发明方法提取得到的金针菇酸性多糖中总糖含量约为52.3‑65.1%,蛋白含量28.1‑30.9%,糖醛酸含量6.2‑7.6%,分子量在10KDa左右,具有清除羟自由基的抗氧化活性,羟基氧清除率达到85.2%。

    一株耐酸发酵乳杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN110093285B

    公开(公告)日:2021-01-26

    申请号:CN201910148417.5

    申请日:2019-02-28

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12N1/20 C12J1/04 C12R1/225

    摘要: 本发明公开了一株耐酸发酵乳杆菌及其应用,属于发酵工程技术领域。该菌株于2016年9月5日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏编号为12934。该菌株对酸具有很好的耐受性,在pH为3.85~4.40的条件下生长良好,经液态发酵培养,该菌株可代谢糖类物质产生乳酸,其乳酸总量达到27.37g/L;在酿醋过程的封醅阶段添加该菌株,可提高食醋中乳酸含量,改善食醋的口感和风味。

    一种富含乳酸和γ-氨基丁酸的食醋酿造方法

    公开(公告)号:CN109182076B

    公开(公告)日:2020-10-09

    申请号:CN201811236374.8

    申请日:2018-10-23

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12J1/04 C12R1/225 C12R1/25

    摘要: 本发明公开了一种富含乳酸和γ‑氨基丁酸的食醋酿造方法,属于食品调味品技术领域。本发明在封醅陈酿阶段添加糖,同时接种乳酸菌和产香酵母,封醅陈酿后淋醋煎煮,获得富含乳酸和γ‑氨基丁酸的香醋。在封醅阶段补糖能为乳酸菌和产香酵母提供碳源,而乳酸菌能利用糖产大量乳酸和γ‑氨基丁酸,产香酵母能合成酯类,因此能提高食醋的品质和等级,使食醋酸感柔和厚重,并使香气更加浓郁;此外,γ‑氨基丁酸是一种非蛋白质氨基酸,为哺乳动物中枢神经系统重要抑制性神经递质,还能提高食醋降血压、促进脑机能、促进长期记忆和生长激素的分泌等功能。

    一种角蛋白酶高效异源表达的方法

    公开(公告)号:CN111662908A

    公开(公告)日:2020-09-15

    申请号:CN202010698996.3

    申请日:2018-08-16

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种角蛋白酶高效异源表达的方法,属于工业生物技术领域。本发明成功构建了携带16种不同启动子序列的角蛋白酶重组菌,其中7种能够提高角蛋白酶表达量,PaprE启动子改造重组菌的酶活水平最高,达到2605U/mL,相比对照菌提高20倍。在5L发酵罐上发酵液中角蛋白酶活力高达7176U/mL,是目前文献报道重组角蛋白酶表达的最高水平,能更好地服务于实际应用。本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效策略。传统基因工程改造通常需构建高通量筛选方法,进行大量文库筛选,工作量大、周期长、成本高,该改造方法相比传统方法极大的减小了工作量,提高了高表达效率。