公开(公告)号：CN109342415A

公开(公告)日：2019-02-15

申请号：CN201811435786.4

申请日：2018-11-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  高松 ,  徐晓宇 ,  曾伟主 ,  堵国成 ,  吕云斌

IPC: G01N21/78 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种高通量检测圣草酚的方法，属于合成生物技术领域。本发明使用的显色剂为氢氧化钠或者氢氧化钾，经显色处理后，圣草酚呈现紫色，浓度越高，紫色越深，且显色越快，静置时间越长，颜色也会加深，一般5min内反应完毕，即便在干扰物质柚皮素存在时依然可以直接用目视法选择高产菌株。该反应液也可以使用酶标仪做进一步检测。在水溶液中，建议使用NaOH处理，最佳检测波长为550-580nm，在无色的合成培养基中建议使用KOH处理，最佳检测波长为560-570nm。该方法简便高效，抗干扰，精准度高，时间和人力成本低，适用于高通量筛选圣草酚高产菌株。

公开(公告)号：CN105400843B

公开(公告)日：2019-01-04

申请号：CN201510816624.5

申请日：2015-11-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  吕永坤 ,  乌仁嘎 ,  堵国成 ,  丁仁鹏

IPC: C12P17/16

Abstract: 本发明公开了一种使用漆酶催化合成水飞蓟宾的方法，属于生物化工领域。本发明以漆酶催化松柏醇和黄杉素合成了水飞蓟宾的4种同分异构体。该反应在水相中进行，避免了有机溶剂的使用；反应的效率较高，在1h内即可生成0.9694mg/L水飞蓟宾。该方法是一种安全且高效的合成水飞蓟宾合成方法。

公开(公告)号：CN105368884B

公开(公告)日：2019-01-04

申请号：CN201510907232.X

申请日：2015-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  罗正山 ,  堵国成 ,  刘松 ,  方芳

IPC: C12N1/19 ,  C12N1/16 ,  C12P7/40 ,  C12R1/72

Abstract: 本发明公开了一种丙酮酸生产强度提高的重组菌及其应用，属于发酵工程技术领域。本发明通过在光滑球拟酵母菌株中定位表达线粒体丙酮酸载体蛋白于细胞膜上，加强丙酮酸出细胞的速率和缓解丙酮酸对糖酵解途径关键酶的反馈抑制作用，进而提高丙酮酸的产量和生产强度，通过基因工程技术，将来源于酿酒酵母的MPC1和信号肽序列Shrew1p定位整合到pY26表达载体上，构建酵母重组表达质粒pY26‑Shrew1p‑MPC1，并将其电转进受体菌TgU‑中获得一株一株高产丙酮酸的工程菌株TgU‑(pY26‑Shrew1p‑MPC1)，相对于对照菌株TgU‑(pY26)，工程菌TgU‑(pY26‑Shrew1p‑MPC1)的细胞干重、葡萄糖消耗速率、丙酮酸的产量和丙酮酸生产强度相对于对照菌(TgU‑(pY26))分别提高了58.3％、68.1％、154.4％和152.6％。

公开(公告)号：CN107167528A

公开(公告)日：2017-09-15

申请号：CN201710280382.1

申请日：2017-04-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  周胜虎 ,  堵国成 ,  张娟

IPC: G01N30/02 ,  G01N21/33 ,  G01N21/31

Abstract: 本发明公开了一种高通量检测柚皮素的方法，属于生物化学领域。本发明以AlCl3和MgOAc为助色基团，与柚皮素反应后可在激发光下显荧光，并可产生出一个新的紫外吸收峰，从而建立了一套柚皮素高通量检测方法。本发明检测准确度与高效液相色谱(HPLC)法检测结果相吻合，所述方法为黄酮类化合物生产菌株的高通量筛选提供了方便。

公开(公告)号：CN107161230A

公开(公告)日：2017-09-15

申请号：CN201710318076.2

申请日：2017-05-08

Applicant: 江南大学

Inventor： 宁萌 ,  徐进 ,  周景文 ,  陈海卫 ,  张秋菊 ,  卢佳伟 ,  杨洋 ,  王垚 ,  李思奇

IPC: B62D57/024

CPC classification number: B62D57/024

Abstract: 本发明涉及机器人的技术领域，提供了一种自动爬杆机器装置及其方法，包括支架、抱紧机构和攀爬机构，所述抱紧机构设置在所述支架上，且所述抱紧机构和所述支架之间能够形成用于容纳攀爬杆的容纳空间，所述抱紧机构用于抱紧所述攀爬杆所述攀爬机构设置在所述容纳空间内，且与所述支架连接，所述攀爬机构用于带动所述爬杆机器人沿所述攀爬杆的表面移动。本发明相对于现有技术具有一下优势：加工、装配、操作简便，也可搭载其他模块应用于其他行业，实现不同功能。

公开(公告)号：CN106896076A

公开(公告)日：2017-06-27

申请号：CN201710280396.3

申请日：2017-04-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  周胜虎 ,  堵国成 ,  张娟

IPC: G01N21/33

Abstract: 本发明公开了一种紫外光谱法高通量检测对香豆酸的方法，属于生物化学领域。本发明以NaBH4为助色基团，与对香豆酸反应后在339nm形成新的紫外吸收峰而与其直接前体L‑酪氨酸吸收峰分离。本发明方法为苯丙素类化合物的发酵工程生产提供了便利，使得高通量的试验方法应用于苯丙素类化合物合成菌株改造成为了可能。

公开(公告)号：CN106497991A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201610928616.4

申请日：2016-10-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  吕永坤 ,  堵国成

IPC: C12P7/42 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12P7/42 ,  C12N9/88

Abstract: 本发明公开了一种以左旋多巴为底物合成咖啡酸的方法，属于生物化工领域。本发明以左旋多巴为底物生物合成咖啡酸。与以往的以L-酪氨酸为底物的转化方法相比，该方法底物溶解度较高，产量高，转化率，且生产效率高。与化学合成方法相比，该方法的产物为单一的反-咖啡酸，不需要对同分异构体进行进一步的分离。反应6小时后咖啡酸的产量可达910.90mg/L，转化率为99.70％。

公开(公告)号：CN106496022A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201610893332.6

申请日：2016-10-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  曾伟主 ,  罗正山 ,  堵国成 ,  方芳 ,  刘松

IPC: C07C59/19 ,  C07C51/42 ,  C07C51/44 ,  C07C51/48

CPC classification number: C07C51/42 ,  C07C51/44 ,  C07C51/48 ,  C07C59/19

Abstract: 本发明公开了一种从微生物发酵液或酶转化液中提取丙酮酸的方法，属于生物分离提取技术领域。本发明经离心去菌体和其他可见固型物、超滤去除大分子杂质、减压蒸发浓缩后用乙酸乙酯或乙酸丁酯等非水溶性有机溶剂萃取、减压蒸馏萃取剂乙酸乙酯和或乙酸丁酯等非水溶性有机溶剂及其中的水，继续采用高真空减压蒸馏或分子蒸馏获取合格的丙酮酸产品。本发明具有工艺操作简单高效、费用低、产品纯度高等优点，适合于丙酮酸的工业化生产。

公开(公告)号：CN106191028A

公开(公告)日：2016-12-07

申请号：CN201610595458.5

申请日：2016-07-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  王得明 ,  张庆辉 ,  王丽丽 ,  堵国成 ,  曹晓梅

IPC: C12N15/01 ,  C12N1/20 ,  C12R1/54

Abstract: 本发明公开了一种基于流式细胞术的高通量筛选高产泰乐菌素菌株的方法，属于高通量筛选技术领域。本发明通过对诱变之后不同活性的孢子进行PI染色法，通过调节优化FSC，SSC，电压阈值等各个参数正确区分有活性的孢子区域，排除由于孢子本身体积过小带来在流式细胞仪检测中与背景混杂的干扰。对分选后的活孢子采用固液结合的高通量培养方案，有效提高了弗氏链霉菌孔板生长率。本发明的基于流式细胞仪分选有活性的弗氏链霉菌，为弗氏链霉菌的高通量筛选提供一种新型有效的方式。

公开(公告)号：CN106086092A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610726130.2

申请日：2016-08-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  张海林 ,  堵国成 ,  刘松 ,  方芳

IPC: C12P7/50 ,  C12P7/40 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12P7/50 ,  C12P7/40

Abstract: 本发明公开了一种α‑酮戊二酸和丙酮酸联产的发酵方法，属于发酵工程技术领域。本发明考虑到α‑酮戊二酸和丙酮酸的商业价值差异不大，因此将两种羧酸进行联产。在羧酸联产发酵过程中，控制合适的甘油初始浓度以及流加速度促进菌体生长和羧酸的积累。本发明能够大大提高底物转化率、总酸产量、生产强度，缩短发酵周期，达到节能减耗、提高经济效益的目的。