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公开(公告)号：CN113372439A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110642668.6
申请日：2021-06-09
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K16/00 , C08G83/00 , C12N15/115 , G01N27/06 , G01N27/26 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种锰金属有机框架生物复合型材料及其在食源性致病菌检测中的应用。所述锰金属有机框架生物复合型材料由Mn‑MOF‑74纳米微球与特异性生物识别材料经共价偶联而成，Mn‑MOF‑74纳米微球的粒径为200～300nm。本发明锰金属有机框架生物复合材料具有电化学阻抗信号响应灵敏、结构稳定、特异性识别目标致病菌—单增李斯特杆菌的阻抗型电化学免疫传感器，其中Mn‑MOF‑74晶体尺寸均一，生物亲和性好，易于修饰，所制备出的锰金属有机框架生物复合材料对靶标细菌具有特异性标记能力，且易于被双氧水还原产生导电良好的锰离子，使用该生物复合材料开发的单增李斯特杆菌电化学检测技术具有操作简单，检测限低，检测过程高效快速的优势。
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公开(公告)号：CN113310843A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110657490.2
申请日：2021-06-12
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N5/04
Abstract: 本发明公开了覆膜农田土壤蒸发简易测定装置及测定方法。所述测定方法包括如下步骤：1)剪开3面，掀开地膜；2)将内桶打进土壤内，然后取出并反扣在木板上，用小刀平整下内桶底面，放上滤纸，并用两层大纱网包裹底部后，用胶带固定在侧面；3)将外筒打进土壤中，将外桶内土壤平面稍做平整，将内桶放入外桶内；4)将地膜重新盖上，用同色胶带在剪开地膜的边缘处进行加宽，并在剪开部位压土；5)按照需要在特定时间称重，记录完数据，放回原位置，盖好地膜。本发明原位测定，破坏性小，结构简单，操作便捷，造价低，同一完整地膜覆盖下保证了膜下蒸渗桶的水平水汽传输，底部滤纸保证了水汽的垂向输送，测量结果更加准确，对于土壤蒸发量的获取更加有效。
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公开(公告)号：CN103233020A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310122670.6
申请日：2013-04-10
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry34B的制备方法。该方法包括如下步骤：1）将SEQ ID №.1所示的DNA插入pET28a表达载体中，得到重组表达载体；2）将所述重组表达载体导入大肠杆菌BL21（DE3），得到重组菌；3）培养所述重组菌，并进行诱导表达，收集菌体；裂解菌体，即得。本发明应用基因工程方法在国内首次合成Bt Cry34B基因，并首次制备出了Bt Cry34B融合蛋白，为进一步探讨该蛋白的检测方法、生理功能及其作用机制、降解机制打下了基础。
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公开(公告)号：CN119118892A
公开(公告)日：2024-12-13
申请号：CN202411103939.0
申请日：2024-08-12
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07C403/24 , A23L33/105 , A23P10/30
Abstract: 本发明提供一种制备低晶态β‑胡萝卜素的方法及其应用，所述方法包括：将β‑胡萝卜素晶体原料进行热熔挤压处理，得到β‑胡萝卜素热熔挤压物；将所述β‑胡萝卜素热熔挤压物进行粉碎处理，得到所述低晶态β‑胡萝卜素。本发明制得的低晶态β‑胡萝卜素相对结晶度低，顺式异构体比例高，利用其开发的β‑胡萝卜素微胶囊呈无定形态，水溶性和生物可及性高，具有较好的产业化应用前景。
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公开(公告)号：CN112831058B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202110016857.2
申请日：2021-01-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种整体型CG‑ZIF‑8金属有机框架泡沫材料及其制备方法与应用。所述制备方法包括如下步骤：以羧甲基纤维素和葡聚糖的混合溶液作为ZIF‑8的自组装介质，原位合成ZIF‑8得到溶胶‑凝胶型ZIF‑8，经真空冷冻干燥即得。CG‑ZIF‑8材料在保证ZIF型材料的大比表面积和高孔隙率等传统优势的同时，还具有良好的机械稳定性和化学稳定性，克服了传统ZIF‑8型材料酸性敏感的缺陷。CG‑ZIF‑8材料对环境内分泌干扰物选择吸附性良好。此外，整体型的CG‑ZIF‑8材料具有操作简单，易于再生，方便回收的优势。CG‑ZIF‑8材料对应用于环境水中多种内分泌干扰物的吸附和祛除有良好的前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103194460B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310133843.4
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/21 , C07K14/325 , A01N47/44 , A01P7/04 , C12N15/70 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-2064位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry3Bb（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb基因（N-Cry3Bb基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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公开(公告)号：CN103233020B
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201310122670.6
申请日：2013-04-10
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry34B的制备方法。该方法包括如下步骤：1）将SEQ ID №.1所示的DNA插入pET28a表达载体中，得到重组表达载体；2）将所述重组表达载体导入大肠杆菌BL21（DE3），得到重组菌；3）培养所述重组菌，并进行诱导表达，收集菌体；裂解菌体，即得。本发明应用基因工程方法在国内首次合成Bt Cry34B基因，并首次制备出了Bt Cry34B融合蛋白，为进一步探讨该蛋白的检测方法、生理功能及其作用机制、降解机制打下了基础。
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公开(公告)号：CN103233021A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310133824.1
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12N15/70 , C07K14/325 , C07K19/00 , A01N57/16 , A01N63/02 , A61P7/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry35Ba2的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-1269位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry35Ba2（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry35Ba2基因（N-Cry35Ba2基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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公开(公告)号：CN103194460A
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201310133843.4
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/21 , C07K14/325 , A01N47/44 , A01P7/04 , C12N15/70 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-2064位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry3Bb（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb基因（N-Cry3Bb基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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公开(公告)号：CN103145815A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310070417.0
申请日：2013-03-06
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/325 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/30 , C07K1/22
Abstract: 本发明公开了一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法。本发明提供的从抗虫棉种子中纯化Bt Cry1Ac蛋白的方法，包括如下步骤：（1）将抗虫棉种子去壳后进行可溶性总蛋白的提取，得到溶液甲；（2）将所述溶液甲进行60%饱和度的硫酸铵沉淀，离心收集沉淀；（3）溶解步骤（2）得到的沉淀并进行透析，得到溶液乙；（4）将所述溶液乙进行免疫亲和层析，收集与抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体特异结合的蛋白组分，即为Bt毒蛋白；所述抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体为是由杂交瘤Bt2F9 CGMCC No.5162分泌产生的单克隆抗体。本发明具有以下优点：（1）简化了纯化流程，降低了纯化成本；（2）缩短了纯化时间，减少了目的蛋白损失。
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