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公开(公告)号：CN112251389B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN202010970300.8
申请日：2020-09-16
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明属重组减毒沙门菌领域，具体涉及一种RGD、TAT、GEL三基因重组减毒沙门菌LH430及其构建方法和应用。构建方法包括下述步骤：1)设计基因；2)PCR扩增；3)将获得的目的基因克隆到pMD‑18‑T载体中，构建了包含上述目的基因的重组减毒沙门菌LH430。本发明将RGD对肿瘤细胞的靶向性、TAT对细胞的穿透性、GEL基因的细胞凋亡作用和减毒沙门菌LH430可携带外源基因靶向肿瘤微环境的厌氧区的特性结合起来，构建出能够融合表达上述基因的重组减毒沙门菌，使得RGD‑TAT‑GEL基因能够更好地发挥靶向性及抑制凋亡的作用。
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公开(公告)号：CN113186172A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202110364756.4
申请日：2021-04-06
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明属于构建重组腺病毒领域，具体涉及一种共表达Apoptin与MEL基因的重组腺病毒及构建方法和应用。构建方法包括下述步骤：1)TAT‑Apoptin、RGD‑MEL、TAT‑Apoptin+UBI‑RG‑MEL基因片段的扩增与克隆；2)构建重组腺病毒穿梭质粒GV‑TAT‑Apoptin+UBI‑RGD‑MEL；3)在HEK293A细胞中重组和包装病毒Ad‑TAT‑Apoptin+UBI‑RGD‑MEL；本申请将TAT‑Apoptin和RGD‑MEL基因与腺病毒载体结合起来，构建出表达上述基因的Ad‑TAT‑Apoptin+UBI‑RGD‑MEL，藉此研制针对动物肿瘤的广谱疫苗。
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公开(公告)号：CN112410310A
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN202011170124.6
申请日：2020-10-28
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明涉及一种用作猪链球菌疫苗的重组蛋白GSE，所述重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。针对猪链球菌病的灭活苗和弱毒苗型间交叉保护效果并不好，且存在一定的生物安全性问题，本发明基于猪链球菌保护性抗原表位的筛选，设计而成的重组蛋白能够用于猪链球菌病疫苗的制备中，本发明提供的这种重组蛋白可在安全的条件下高效制备，具有良好的实用性。
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公开(公告)号：CN106011087B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201610622267.3
申请日：2016-07-28
申请人： 天津农学院
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/861 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61K39/02 , A61P31/04 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种S1基因和TM‑1基因重组腺病毒的构建方法及重组腺病毒和应用，从IBV H52株和MG S6株中分别扩增出S1基因和TM‑1基因，将获得的目的基因克隆到穿梭载体pDC315‑MCS‑EGFP中，利用脂质体转染法将重组腺病毒穿梭质粒pDC315‑S1‑TM‑1‑EGFP与腺病毒大骨架pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞，重组并包装获得含有S1基因和TM‑1基因的重组腺病毒pBH‑S1‑TM‑1‑EGFP；本发明用于免疫鸡以预防鸡传染性支气管炎和慢性呼吸道病，将此重组腺病毒免疫鸡后，鸡的抗体水平得到显著提高，且对鸡产生有效的保护作用。
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公开(公告)号：CN105132461B
公开(公告)日：2018-03-09
申请号：CN201510574849.4
申请日：2015-09-10
申请人： 天津农学院
IPC分类号： C12N15/861 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K35/761 , A61P31/04
摘要： 本发明公开了一种共表达SAL‑2基因和hLYZ双抑菌基因重组腺病毒载体的构建方法及重组腺病毒和应用，采用从金黄色葡萄球菌噬菌体基因组和人乳体细胞总RNA中分别扩增出的SAL‑2基因和hLYZ基因，将获得的目的基因克隆到pShuttle‑IRES‑hrGFP‑2穿梭载体中，线性化重组穿梭载体后与骨架载体pAdeasy‑1共转染大肠杆菌BJ5183感受态细胞，使其在BJ5183内进行同源重组，构建了包含上述目的基因的重组腺病毒质粒Ad‑SAL‑LYZ；将重组腺病毒质粒由PacⅠ酶切后，经脂质体介导转染HEK293细胞，包装获得高滴度的重组腺病毒；评价SAL‑2基因和hLYZ基因在腺病毒介导下对奶牛乳房炎主要致病菌的联合抑制作用。
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公开(公告)号：CN104480049B
公开(公告)日：2017-12-22
申请号：CN201410819192.9
申请日：2014-12-25
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明公开了一种提高肉鸡肌肉肉色的富硒乳酸菌制剂及其应用。它是以鼠李糖乳杆菌作为菌种接种于添加了有机硒转化促进剂的特定培养基中；培养15‑21 h后向其中加入无机硒源，并继续培养27‑36 h；培养结束后经干燥获得富硒乳酸菌制剂。该制剂中乳酸菌数在109cfu/g以上；含硒量为5.2‑22.8 mg/kg,有机硒含量在50%以上。将该制剂以2‑5%的添加量添加于肉鸡饲料中，可显著改善肉鸡肌肉肉色指标亮度、红度值以及肌肉组织含硒量和抗氧化能力，能够有效发挥提高肉鸡肌肉肉色的作用。该制剂在提高动物肌肉肉品质方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN106011088A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610622268.8
申请日：2016-07-28
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明公开了一种cLYZ和hLTF双抑菌基因重组腺病毒的构建方法及重组腺病毒和应用，从石斑鱼头肾组织和人乳体细胞总RNA中分别扩增出cLYZ基因和hLTF基因，将获得的目的基因克隆到pDC315穿梭载体中，将含有目的基因的穿梭质粒与腺病毒骨架质粒经脂质体共转染HEK293细胞，包装获得高滴度的重组腺病毒；评价cLYZ基因和hLTF基因在腺病毒介导下对奶牛乳房炎主要致病菌的联合抑制作用。
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公开(公告)号：CN105002145A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510377269.6
申请日：2015-07-01
申请人： 天津农学院
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/861 , A61K48/00 , A61P35/00
摘要： 本发明公开了一种利用mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用，采用从C57BL/6小鼠的胸腺DNA、小鼠黑色素瘤B16细胞总RNA和新城疫病毒(NDV)LaSota株中分别扩增出的mTERT启动子、mTyr启动子和HN基因，将获得的目的基因克隆到pShuttle-IRES-hrGFP-2穿梭载体中，线性化重组穿梭载体后与骨架载体pAdeasy-1共转染大肠杆菌BJ5183感受态细胞，使其在BJ5183内进行同源重组，构建了包含上述目的基因的重组腺病毒质粒Ad-mTERTp-Tyrp-HN；将重组腺病毒质粒由PacⅠ酶切后，经脂质体介导转染HEK293细胞，包装获得高滴度的重组腺病毒；评价HN基因在双启动子的联合调控作用下对B16细胞的抑瘤效果。
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公开(公告)号：CN104922664A
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201510335073.0
申请日：2015-06-17
申请人： 天津农学院
IPC分类号： A61K39/187 , A61K31/715 , A61K39/39 , A61P31/14 , A61P37/04
摘要： 本发明涉及一种利用黄芪多糖加猪瘟脾淋苗进行猪瘟防治的方法，包括：药物配置，黄芪多糖配制成100mg/mL的溶液，猪瘟兔化弱毒脾淋苗浓度为106TCID50/mL；(2)猪瘟防治时间的确定，注射黄芪多糖的具体猪龄为20日龄，注射猪瘟兔化弱毒脾淋苗的具体猪龄为30日龄；(3)猪瘟防治剂量的确定，对于20日龄的幼猪一次性注射浓度为100mg/mL的黄芪多糖1毫升，对于30日龄的幼猪一次性注射浓度为106TCID50/mL的猪瘟兔化弱毒脾淋苗1毫升。本发明确定了黄芪多糖和具体猪瘟疫苗搭配使用的方法，从具体用药量，具体时间上确定了最佳的猪瘟防治效果，为养猪业的稳定发展提供了保障。
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公开(公告)号：CN102604992B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201210047696.4
申请日：2012-02-28
申请人： 天津农学院
IPC分类号： C12N15/861
摘要： 本发明公开了一种利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用，使双基因在抑制肿瘤细胞生长方面发挥协同作用。采用从鸡脾细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中分别扩增出TRAIL和HN基因序列，通过定点突变和重叠延伸拼接法实现TRAIL和HN基因以柔性氨基酸的linker连接；将获得的目的基因克隆到pShuttle-CMV穿梭载体中，经与pAd-Easy骨架载体共转染大肠杆菌BJ5183感受态细胞，使其在BJ5183内进行同源重组，构建了包含目的基因的重组腺病毒质粒pAd-TRAIL和pAd-TRAIL-linker-HN；将重组腺病毒质粒由PacI酶切后，经脂质体介导，转染AD293细胞，包装后获得重组腺病毒；并对双基因抑瘤作用的协同效应进行评价。
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