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公开(公告)号:CN108586607B
公开(公告)日:2020-09-11
申请号:CN201810332746.0
申请日:2018-04-13
Applicant: 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC: C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种抗HPV16 L1蛋白单克隆抗体的制备方法及其应用。公开该抗HPV16 L1蛋白单克隆抗体及其重链可变区和轻链可变区的DNA序列和氨基酸序列。设计了所述的抗HPV16 L1蛋白单克隆抗体的制备方法。将所述的抗HPV16 L1蛋白单克隆抗体在免疫学检测、抗原或抗体检测试剂盒中应用。该抗HPV16 L1蛋白的单克隆抗体能够特异性识别HPV16这一主要的流行亚型,与HPV16假病毒以及HPV16 L1蛋白都具有良好的反应性,与其他亚型的L1蛋白没有交叉反应。为进一步改造其抗体可变区序列制备不同组合形式的基因工程抗体和进行HPV不同亚型病原的临床检测研究奠定了良好的基础。
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公开(公告)号:CN108752471B
公开(公告)日:2020-06-26
申请号:CN201810332092.1
申请日:2018-04-13
Applicant: 河南中泽生物工程有限公司
IPC: C07K16/08 , C12N15/06 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种抗PCV2单克隆抗体的制备方法及其应用。公开该抗PCV2单克隆抗体及其重链可变区和轻链可变区的DNA序列和氨基酸序列。设计了所述的抗PCV2单克隆抗体的制备方法。将所述单克隆抗体在抗原/抗体检测试剂盒、抗原/抗体免疫层析试纸以及IFA、IPMA中和PCV2或PCV2 Cap的免疫亲和柱中应用。本发明的单克隆抗体能够同时识别PCV2a和PCV2b这两种主要的流行亚型,与PCV2全病毒以及PCV2 Cap蛋白都具有良好的反应原性,而与PCV1、PCV3亚型和猪源病毒均无交叉反应;为进行PCV2病原学和致病机理的研究及PCV2病原的临床检测研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN109187968A
公开(公告)日:2019-01-11
申请号:CN201811091645.5
申请日:2018-09-19
Applicant: 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的二联金标检测试纸及其制备方法,包括支撑板、样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫,NC膜上含有猪瘟病毒检测线T1“│”,猪伪狂犬病毒检测线T2“│”和质控线C“│”印迹。检测时,在检测膜显现三条红色条带“│││”为猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒共感染,出现检测线T1和质控线C两条红色条带“││”为只有猪瘟病毒感染;出现检测线T2和质控线C两条红色条带“││”为只有猪伪狂犬病毒感染;只显现一条红色条带“│”为阴性,两种病毒都未感染。本检测试纸特异性强,敏感性高,反应谱广,可检测现有多数流行毒株,且操作简便、快速,可广泛用于猪瘟病毒感染与猪伪狂犬病毒感染检测,易于在生产实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN109161575A
公开(公告)日:2019-01-08
申请号:CN201811083057.7
申请日:2018-09-17
Applicant: 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种禽法氏囊病毒VP2蛋白的高表达发酵工艺,旨在解决工程菌禽法氏囊病毒VP2蛋白表达量低的技术问题。该发酵工艺包括以下步骤:(1)菌种活化;(2)种子培养;(3)补料分批发酵:I.细胞快速繁殖阶段:制备基础培养基置于发酵罐中,将二级种子液按4~6%的接种量接入发酵罐中发酵,待溶氧量急剧上升开始补料;II.蛋白表达阶段:加入终浓度为0.5mmol/L诱导剂;加入补料培养基之二,继续发酵至结束即成。本发明的工艺方法蛋白表达量高,能够缩短生产周期、减少设备投资,降低生产成本,提高生产效率,能够极大地提高产品在商场上的竞争力,为IBDV基因工程亚单位疫苗的研制和生产奠定了基础。
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公开(公告)号:CN108823218A
公开(公告)日:2018-11-16
申请号:CN201810797851.1
申请日:2018-07-19
Applicant: 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因、其表达产物、其亚单位疫苗及应用。本发明提供了一种鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的核酸序列、克隆该核酸序列的引物、含该核酸序列的表达载体、由表达载体转化而得的工程菌、由核酸序列编码、表达载体表达或所工程菌分离的鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白,及鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白自组装而成的鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒。还提供了由鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白制得的亚单位疫苗,由鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒制得的亚单位疫苗。将亚单位疫苗在预防鸡传染性法氏囊病病毒引起的鸡相关疾病中应用。本发明生产成本低、操作简单、生物安全性好,疫苗可有效预防鸡传染性法氏囊病毒对鸡群的感染。
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公开(公告)号:CN112625091A
公开(公告)日:2021-04-09
申请号:CN202011565041.7
申请日:2020-12-25
Applicant: 河南中泽生物工程有限公司
IPC: C07K7/06 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明主要涉及猪瘟病毒Erns蛋白亲和多肽及应用,该多肽由计算机模拟的虚拟分子对接技术设计而成,序列为WRHYIH。本发明以同源建模获得的猪瘟Erns蛋白晶体结构为模板,根据虚拟分子筛选技术,获得多肽序列P1。人工合成多肽后,采用酶联免疫吸附测定试验和等离子共振试验鉴定该序列与猪瘟Erns蛋白相互作用的亲和性,结果表明P1序列与猪瘟Erns蛋白具有较高的特异性和亲和力;本发明为以亲和肽作为亲和配基的亲和层析提供了可靠理论基础,可通过对多肽标记,从而对猪瘟Erns蛋白进行快速检测。
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公开(公告)号:CN112409494B
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202011133005.3
申请日:2020-10-21
Applicant: 河南中泽生物工程有限公司
Abstract: 本发明提供了一种通用型流感病毒抗原蛋白。本发明将PCV2的Cap蛋白与来源于人、猪和禽的M2e表位蛋白融合表达。所述PCV2的Cap蛋白与来源于人、猪和禽的M2e表位蛋白融合表达,为来源于人、猪和禽的M2e表位按照不同的次序与Cap蛋白的羧基端融合串联表达并自组装形成Cap‑3M2e的抗原蛋白。本发明确定了基于M2e表位的通用型流感疫苗的最佳排列次序,并研制最适用于猪的基于M2e表位的通用型流感疫苗;该疫苗能够诱导高水平的PCV2特异性中和抗体,具有成为二价疫苗的潜力;经过优化的基因更适合在大肠杆菌宿主中高效率表达目标蛋白,而且能够满足工业化生产的要求,产量高,成本低。
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公开(公告)号:CN112812178B
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202110157245.5
申请日:2021-02-04
Applicant: 河南中泽生物工程有限公司
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12P21/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及PCV3Cap蛋白抗原表位肽、抗PCV3Cap蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明提供了抗PCV3Cap蛋白单克隆抗体,并进一步提供了单克隆抗体的重链可变区序列和轻链可变区的核苷酸和氨基酸序列,在此基础上,可以通过基因工程方式来制备抗体;同时,能够采用基因工程和蛋白质工程的方法,进行一个或多个氨基酸的添加、删除、替换等修饰,获得其活性片段或保守性变异体,为进一步提升抗体的特异性和亲和力奠定基础。该抗体具有较高特异性,与PCV1、PCV2及其他猪源病毒如CSFV、PRRSV、PRV等均无交叉反应,在抗原/抗体检测试剂盒、抗原/抗体免疫层析试纸、IFA、IPMA以及Western Blotting等免疫学检测中具有广泛的研究应用价值和商业使用价值。
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公开(公告)号:CN109187968B
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN201811091645.5
申请日:2018-09-19
Applicant: 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的二联金标检测试纸及其制备方法,包括支撑板、样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫,NC膜上含有猪瘟病毒检测线T1“│”,猪伪狂犬病毒检测线T2“│”和质控线C“│”印迹。检测时,在检测膜显现三条红色条带“│││”为猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒共感染,出现检测线T1和质控线C两条红色条带“││”为只有猪瘟病毒感染;出现检测线T2和质控线C两条红色条带“││”为只有猪伪狂犬病毒感染;只显现一条红色条带“│”为阴性,两种病毒都未感染。本检测试纸特异性强,敏感性高,反应谱广,可检测现有多数流行毒株,且操作简便、快速,可广泛用于猪瘟病毒感染与猪伪狂犬病毒感染检测,易于在生产实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN112707948A
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202011565011.6
申请日:2020-12-25
Applicant: 河南中泽生物工程有限公司
IPC: C07K7/06 , G01N33/569
Abstract: 本发明主要涉及猪瘟病毒E0蛋白亲和多肽及应用,该多肽利用计算机辅助由虚拟分子对接技术设计而成,序列为WRHDFQ(P3)。本发明以牛病毒性腹泻病毒E0蛋白同源建模获得的猪瘟病毒E0蛋白晶体结构为模板,利用分子对接技术获得多肽序列P3;合成多肽后,采用等离子共振试验和酶联免疫吸附测定试验,鉴定该序列与猪瘟E0蛋白相互作用的亲和力和特异性,结果表明P3序列与猪瘟E0蛋白具有较高的亲和力和特异性;本发明可通过对多肽进行标记,从而对猪瘟抗原进行快速定性和定量检测,并可通过多肽对蛋白的结合能力,利用多肽对猪瘟E0蛋白进行富集,为蛋白纯化提供新思路。
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