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公开(公告)号：CN103642759A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310573277.9
申请日：2013-11-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/70 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种嵌合IBV4/91株纤突蛋白膜外区基因片段的重组传染性支气管炎病毒及其构建方法和应用。本发明的重组病毒是通过以下方法构建得到：将适应细胞培养的骨架病毒IBV Beaudette毒株的纤突蛋白膜外区基因片段置换成IBV4/91株的纤突蛋白膜外区基因片段来构建重组病毒，经病毒拯救过程后在Vero细胞上盲传3-5代，直至特定细胞病变—合胞体现象出现，即获得了嵌合IBV4/91株纤突蛋白膜外区基因片段的重组传染性支气管炎病毒。将本发明构建得到的重组传染性支气管炎病毒接种鸡只后表明，本发明重组病毒不仅对各种鸡只均安全、无副反应，而且能够诱导接种鸡只产生抵抗野生型毒株49/1攻击的免疫力。
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公开(公告)号：CN101914501B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201010251915.1
申请日：2010-08-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/04 , C12N15/42 , C12N15/63 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒及制备方法和用途。本发明的亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒是由亚洲I型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP3和VP1构成，其中VP0的基因序列为SEQ 1，其中VP3的基因序列为SEQ 3，其中VP1的基因序列为SEQ 2。本发明的亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒制备方法是通过扩增得到结构蛋白VP0、VP3和VP1，再经酶切后得到重组表达载体，再经小泛素样修饰蛋白酶酶切融合蛋白后在体外组装得到口蹄疫病毒样颗粒。
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公开(公告)号：CN101914501A
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN201010251915.1
申请日：2010-08-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/04 , C12N15/42 , C12N15/63 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒及制备方法和用途。本发明的亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒是由亚洲I型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP3和VP1构成，其中VP0的基因序列为SEQ 1，其中VP3的基因序列为SEQ 3，其中VP1的基因序列为SEQ 2。本发明的亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒制备方法是通过扩增得到结构蛋白VP0、VP3和VP1，再经酶切后得到重组表达载体，再经小泛素样修饰蛋白酶酶切融合蛋白后在体外组装得到口蹄疫病毒样颗粒。
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公开(公告)号：CN119667152A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411846827.4
申请日：2024-12-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种基于S蛋白单克隆抗体的猪δ‑冠状病毒双抗夹心ELISA检测试剂盒、其使用方法及应用。采用ExpiCHO表达系统表达PDCoV S蛋白，然后将纯化的S蛋白作为免疫原免疫小鼠，获得单克隆抗体。然后，分别使用单克隆抗体3D7和HRP标记的MAb 9G4作为捕获和检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA试剂盒。该试剂盒具有良好的灵敏度，对纯化的S蛋白的检测限为0.12ng/mL，对PDCoV的检测限为1.96×103copies/μL。特异性分析表明，所述试剂盒与其他在临床症状上与PDCoV相似的猪肠道冠状病毒PEDV、TGEV和PoRV无交叉反应性，且与RT‑PCR方法的一致性达到91.03％，Kappa值为0.814，表明该试剂盒用于临床样品检测的可靠性。此外，该试剂盒还可以定量评价PDCoV灭活疫苗和亚单位疫苗中S蛋白的含量，为评价这些疫苗提供了有力的工具。
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公开(公告)号：CN119552821A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202411690015.5
申请日：2024-11-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C07K14/09 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫假病毒细胞培养系统及其应用。本发明属于生物技术领域。本发明提供的一种细胞培养系统，可用于生产具有转录和复制能力的口蹄疫假病毒(FMDV‑trVLPs)，但其不具有活病毒的感染性。该系统由Nluc替换了FMDV衣壳蛋白基因(P1)的亚基因组复制子(FMDV‑Nluc)和稳定整合FMDV P12A3C基因的BHK‑21细胞系(BHK‑P1)组成。当FMDV‑Nluc复制子转染进BHK‑P1细胞后，可生产出口蹄疫假病毒FMDV‑trVLPs，并能在BHK‑P1细胞内增殖和传代，有效实现生物安全降级，在降低生物安全风险、模拟FMDV活病毒研究方面具有巨大潜力与实用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119320436A
公开(公告)日：2025-01-17
申请号：CN202411474710.8
申请日：2024-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K19/00 , C12N15/40 , C12N15/62 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒NS2截短蛋白及在BVDV抗体检测中的应用。本发明首先提供了一种BVDV NS2蛋白的截短蛋白，所述截短蛋白分别与谷胱甘肽S移换酶(GST)和辣根过氧化物酶(HRP)融合后可溶性表达，且与BVDV抗体阳性血清具有较好的反应原性，与BVDV抗体阴性血清不发生反应，可用于BVDV抗体检测；其次，本发明以GST与所述截短蛋白的融合蛋白为包被抗原，以HRP与所述截短蛋白的融合蛋白为检测抗原，构建了BVDV抗体检测的双抗原夹心ELISA方法，所述方法具有敏感性高、特异性好、操作简便、易于推广、成本低等技术优点，可适用用于牛群中BVDV抗体的筛查。
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公开(公告)号：CN118147026A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410171537.8
申请日：2024-02-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于原核表达系统的自诱导培养基及其应用。所述的自诱导培养基中含有胰蛋白胨5g～20g，酵母粉5g～20g，甘油3g～9g，葡萄糖0.3g～0.9g，乳糖1～4g，KH2PO43.4g/L，Na2HPO4‑7H2O 3.35g/L，NH4Cl 2.68g/L，Na2SO40.71g/L，MgSO40.493g/L以及微量元素，所述的微量元素含有50mM FeCl3，20mM CaCl2，10mM MnCl2，10mM ZnSO4，2mM CoCl2，2mM CuCl2，2mM NiCl2，2mM Na2MoO4，2mM Na2SeO3以及2mM H3BO3。研究结果显示，所述的自诱导培养基，通过阶梯温度调控策略，能够显著提高抗原的可溶性量，同等条件下抗原产量是普通LB培养基的6倍多，生产每毫克抗原所需成本仅为普通LB培养基的20％左右，大大实现了降本增效的目的。
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公开(公告)号：CN118130808A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410181881.5
申请日：2024-02-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 兰州兽研生物科技有限公司
Inventor： 刘新生 , 林密 , 包艳芳 , 张莉萍 , 潘丽 , 何莉 , 王永录 , 李善涛 , 方玉珍 , 潘晓乐 , 周鹏 , 蒋涛 , 张中旺 , 李昕 , 吕建亮 , 孙燕燕 , 杨光 , 郭慧琛 , 张永光
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N21/76
Abstract: 本发明提供了一种基于N蛋白的检测猪流行性腹泻病毒抗体管式磁微粒化学发光试剂盒，属于体外诊断产品技术领域。所述试剂盒包括偶联有猪流行性腹泻病毒N蛋白的磁微粒悬浊液和酶标抗体溶液。与商品ELISA检测试剂盒相比，本发明提供的基于N蛋白检测猪流行性腹泻病毒抗体试剂盒不仅能高特异性、高准确性的定量检测猪血清中猪流行性腹泻病毒的抗体，并且具有自动化、高敏感性、高重复性检测特点，具有较高的市场竞争力。
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公开(公告)号：CN118130791A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202311781532.9
申请日：2023-12-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种A型口蹄疫疫苗抗原定量检测ELISA试剂盒、检测方法及其应用。所述的试剂盒中含有A型口蹄疫病毒的特异性抗体Ab3，其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。所述的抗原包括A型口蹄疫病毒146S抗原以及口蹄疫病毒样颗粒。此外，本发明还建立了一种定量检测A型口蹄疫疫苗中抗原含量的方法，该方法是以A型口蹄疫病毒的特异性抗体Ab3为包被抗体，生物素化标记的Ab3抗体为检测抗体，HRP标记的链霉亲和素作为酶标二抗，同时使用A型口蹄疫病毒灭活146S抗原标准品制作标准曲线，建立的双抗体夹心ELISA方法，该方法具有较高的特异性和重复性，且相比较传统蔗糖密度梯度离心法，操作更简易，不需要大型仪器设备，更适合临床推广。
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公开(公告)号：CN118112255A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202410181877.9
申请日：2024-02-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 兰州兽研生物科技有限公司
Inventor： 刘新生 , 林密 , 包艳芳 , 张莉萍 , 潘丽 , 何莉 , 王永录 , 李善涛 , 方玉珍 , 潘晓乐 , 周鹏 , 蒋涛 , 张中旺 , 李昕 , 吕建亮 , 孙燕燕 , 杨光 , 郭慧琛 , 张永光
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N21/76
Abstract: 本发明提供了一种检测猪德尔塔冠状病毒抗体管式磁微粒化学发光试剂盒及其应用，属于体外诊断产品技术领域。所述试剂盒包括偶联猪德尔塔冠状病毒N蛋白的磁微粒悬浊液和酶标抗体溶液。与商品ELISA检测试剂盒相比，本发明提供的基于N蛋白检测猪德尔塔冠状病毒抗体试剂盒不仅能高特异性、高准确性的检测猪血清中猪德尔塔冠状病毒的抗体，并且具有自动化、高敏感性、高重复性检测特点，具有较高的市场竞争力。
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