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公开(公告)号：CN110551763B
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN201910731802.2
申请日：2019-08-08
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/864 , C12N15/10 , C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体为一种CRISPR/SlutCas9基因编辑系统以及其应用。本发明基因编辑系统为SlutCas9蛋白与sgRNA形成的复合体，能精确靶向DNA序列，并产生切割，使DNA发生双链断裂损伤；所述基因编辑为在细胞中或体外进行基因编辑；SlutCas9蛋白小，为1054个氨基酸，识别的PAM序列简单，所述SlutCas9蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述sgRNA具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。本发明在基因编辑领域中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN110551760B
公开(公告)日：2022-11-18
申请号：CN201910731390.2
申请日：2019-08-08
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/864 , C12N15/10 , C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体为一种CRISPR/Sa‑SeqCas9基因编辑系统以及其应用。本发明基因编辑系统为Sa‑SeqCas9蛋白与sgRNA形成的复合体，能精确靶向DNA序列，并产生切割，使DNA发生双链断裂损伤；所述基因编辑为在细胞中或体外进行基因编辑；Sa‑SeqCas9为融合蛋白，把SaCas9的PAM识别结构域（PAM interacting，PI）替换为SeqCas9的PAM识别结构域（SeqCas9‑PI）。Sa‑SeqCas9蛋白小，为1053个氨基酸，识别的PAM序列简单，所述Sa‑SeqCas9蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述sgRNA具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。本发明在基因编辑领域中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN109251963B
公开(公告)日：2022-11-18
申请号：CN201811342073.3
申请日：2018-11-12
Applicant: 复旦大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/689 , C12Q1/04 , C12R1/35
Abstract: 本发明属于核酸检测技术领域，具体为一种恒温检测细胞培养液中支原体污染的方法及试剂盒。本发明方法包括：构建反应体系，包含：RPA恒温扩增反应成分，特异性扩增支原体的引物对，Cas12a蛋白，靶向目标序列的crRNA和单链DNA报告分子；取1mL细胞培养上清液，加热培养，取1uL作为检测样品加入到一体化检测体系中，经过反应，可直接观察检测体系荧光变化进行支原体检测；试剂盒含有：扩增支原体16s rRNA保守区域DNA序列的引物对，RPA恒温扩增反应成分，Cas12a蛋白，与靶基因互补的crRNA和两端分别被荧光基团和猝灭基团修饰的单链DNA报告分子。本发明操作简单，检验周期短，并且解决了常规支原体检测过程中出现的开盖污染问题。
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公开(公告)号：CN113583999A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110765655.8
申请日：2021-07-06
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/113 , C12N15/864 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体涉及一种CRISPR/Cas9基因编辑系统以及其应用。本发明基因编辑系统为特定Cas9蛋白与sgRNA形成的复合体，能精确定位靶向DNA序列并产生切割，使所述靶序列发生双链断裂损伤；所述基因编辑为在细胞中或体外进行基因编辑。所述各Cas9蛋白均具有数量相对少的氨基酸，可与相同的sgRNA形成复合体进行基因编辑。进一步地，所述Sa‑SchCas9蛋白和SchCas9蛋白识别的PAM序列非常简单，所述Sha2Cas9‑HF1蛋白、Sha2Cas9‑HF2蛋白、SpeCas9‑HF1蛋白、SpeCas9‑HF2蛋白和SpeCas9‑HF3蛋白特异性非常高且编辑效率很高。本发明在基因编辑领域中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN113373130A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110606220.9
申请日：2021-05-31
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N9/22 , C12N9/78 , C12N15/62 , C12N15/113 , C12N15/864 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体涉及一种CRISPR/Cas12基因编辑系统以及其应用。本发明基因编辑系统为特定Cas12蛋白与sgRNA形成的复合体，能精确定位靶向DNA序列并产生切割，使所述靶序列发生双链断裂损伤；所述基因编辑为在细胞中或体外进行基因编辑。所述特定Cas12J‑8蛋白具有数量相对少的氨基酸，并且所述特定Cas12J‑8蛋白、Cas12a蛋白和Cas12b蛋白均具有高的编辑效率，且三类蛋白识别的PAM序列均非常简单。本发明在基因编辑领域中具有广泛的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110577972A
公开(公告)日：2019-12-17
申请号：CN201910731412.5
申请日：2019-08-08
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/864 , C12N15/10 , C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体为一种CRISPR/Sa-ShaCas9基因编辑系统以及其应用。本发明基因编辑系统为Sa-ShaCas9蛋白与sgRNA形成的复合体，能精确靶向DNA序列，并产生切割，使DNA发生双链断裂损伤；所述基因编辑为在细胞中或体外进行基因编辑；Sa-ShaCas9为融合蛋白，把SaCas9的PAM识别结构域（PAM interacting，PI）替换为ShaCas9的PAM识别结构域（ShaCas9-PI），Sa-ShaCas9蛋白小，为1055个氨基酸，识别的PAM序列简单，所述Sa-ShaCas9蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述sgRNA具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。本发明在基因编辑领域中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN110577969A
公开(公告)日：2019-12-17
申请号：CN201910731396.X
申请日：2019-08-08
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/864 , C12N15/10 , C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体为一种CRISPR/Sa-SlugCas9基因编辑系统以及其应用。本发明基因编辑系统为Sa-SlugCas9蛋白与sgRNA形成的复合体，能精确靶向DNA序列，并产生切割，使DNA发生双链断裂损伤；所述基因编辑为在细胞中或体外进行基因编辑；Sa-SlugCas9为融合蛋白，把SaCas9的PAM识别结构域（PAM interacting，PI）替换为SlugCas9的PAM识别结构域（SlugCas9-PI）。Sa-SlugCas9蛋白小，为1055个氨基酸，识别的PAM序列简单，所述Sa-SlugCas9蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述sgRNA具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。本发明在基因编辑领域中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN110499334A
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201910731795.6
申请日：2019-08-08
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/864 , C12N15/10 , C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体为一种CRISPR/SlugCas9基因编辑系统以及其应用。本发明基因编辑系统为SlugCas9蛋白与sgRNA形成的复合体，能精确靶向DNA序列，并产生切割，使DNA发生双链断裂损伤；所述基因编辑为在细胞中或体外进行基因编辑；SlugCas9蛋白小，为1054个氨基酸，识别的PAM序列简单，所述SlugCas9蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述sgRNA具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。本发明在基因编辑领域中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN104450785A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410733267.1
申请日：2014-12-08
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物基因工程技术领域，具体为一种使用编码靶向核酸内切酶附着体载体的基因组编辑方法及试剂盒。本发明利用附着体载体表达靶向核酸内切酶，附着体载体可以实现非整合的稳定的基因表达，同时表达筛选基因；通过药物筛选可以除去没有得到质粒的细胞；当编辑完成后撤掉药物，细胞会逐渐丢掉附着体载体，这样就得到了不含外源基因的编辑细胞系。本方法延长了编辑的时间，提高了基因编辑效率。本发明还提供用于编辑细胞中特定染色体序列的试剂盒。本发明适用于各种真核生物细胞的基因组编辑。
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公开(公告)号：CN118325867A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410453635.0
申请日：2021-07-06
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/113 , C12N15/864 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体涉及一种CRISPR/Cas9基因编辑系统以及其应用。本发明基因编辑系统为特定Cas9蛋白与sgRNA形成的复合体，能精确定位靶向DNA序列并产生切割，使所述靶序列发生双链断裂损伤；所述基因编辑为在细胞中或体外进行基因编辑。所述各Cas9蛋白均具有数量相对少的氨基酸，可与相同的sgRNA形成复合体进行基因编辑。进一步地，所述Sa‑SchCas9蛋白和SchCas9蛋白识别的PAM序列非常简单，所述Sha2Cas9‑HF1蛋白、Sha2Cas9‑HF2蛋白、SpeCas9‑HF1蛋白、SpeCas9‑HF2蛋白和SpeCas9‑HF3蛋白特异性非常高且编辑效率很高。本发明在基因编辑领域中具有广泛的应用前景。
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