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公开(公告)号：CN108103120B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201711374147.7
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种双酶偶联全细胞催化马来酸合成L‑天冬氨酸的方法，属于生物工程领域。本发明构建了一种偶联表达马来酸顺反异构酶和L‑天冬氨酸裂解酶的重组菌株，并对该重组菌株进行改造优化，获得能够全细胞高转化率催化马来酸生成L‑天冬氨酸的重组菌。该重组菌株能够利用价格相对便宜的马来酸生成L‑天冬氨酸，反应40～120min，马来酸反应完全，而且几乎没有中间产物富马酸的积累，转化率到达98％以上。
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公开(公告)号：CN108004225B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201711375805.4
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种成团泛菌来源的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体，属于酶工程技术领域。本发明的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体序列如SEQ ID NO.2所示，该突变酶在50℃处理1小时仍有60％残留酶活性，相比野生酶有了较大的温度稳定性提高。同时该突变体也具备了更好的pH稳定性，有利于以后的工业生产。
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公开(公告)号：CN110938616A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201911050011.X
申请日：2019-10-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种温泉热碱芽孢杆菌来源的腈水合酶的突变体，属于酶工程技术领域。本发明提供的腈水合酶突变体Cal.t Nhase-A20V在70℃的半衰期大约是10min，相比野生酶热稳定性并未有太大变化，突变体Cal.t Nhase-A20V的比酶活是野生酶的128％。同时该突变体也具备了更好的底物耐受性和产物耐受性，全细胞催化生成烟酰胺最终产量达到598g/L；因此，本发明提供的腈水合酶突变体Cal.t Nhase-A20V，具有很好的酶学性质，有利于以后的工业生产。
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公开(公告)号：CN107937374B
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201711376822.X
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的纳豆激酶，属于蛋白质工程。本发明得到的纳豆激酶Q59E‑N218D和N218D，热稳定性相较于原酶有了大幅度提高。本发明提供的纳豆激酶Q59E‑N218D和N218D将在一定程度上更好的应对工艺中高温加热环节，并可以延长在机体内的作用时间，提高了纳豆激酶作为治疗心脑血管疾病口服药物的应用价值。
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公开(公告)号：CN106916819B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201710290938.5
申请日：2017-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种活性提高的枯草芽孢杆菌启动子及其构建与应用，属于启动子工程领域。本发明方法以PsrfA启动子为模板进行定向进化，筛选得到了活性大幅提高的突变体启动子，以绿色荧光蛋白GFP为报告基因，突变后的启动子的最高表达量较原始启动子提高了70％。随后又进行了天冬氨酸酶AspA的表达，其突变体表达量较原始相比，分别提高了90％。此法与利用流式细胞仪建库相比，极大减少工作量而且有效，与此同时将此策略运用于其他启动子改造，改造后的启动子表达目的基因的能力也有很大提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110016459A
公开(公告)日：2019-07-16
申请号：CN201910355173.8
申请日：2019-04-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产β-丙氨酸的重组大肠杆菌及其厌氧发酵的方法，属于代谢工程领域。本发明构建得到的菌株B0016-083BB/pPL-panD、B0016-100BB/pPL-panD、B0016-110BB/pPL-panD厌氧发酵生产β-丙氨酸的产量分别为57.55×10-3g/L、58.37×10-3g/L、80.31×10-3g/L，较出发菌株B0016-080BB/pPL-panD分别提高到142.62％、146.41％和238.82％。本发明首次利用厌氧发酵生产β-丙氨酸，与好氧发酵相比，理论转化率更高，副产物更少，且避免了好氧发酵中所需通气搅拌，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN109852650A
公开(公告)日：2019-06-07
申请号：CN201811547731.2
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种由茶碱调控的人工适体酶及应用，属于基因工程技术领域。本发明采用茶碱适体域融合核酶的方式，得到了一种可调控外源蛋白表达的调控元件。该调控元件PAZSDE1-BG8可以在枯草芽孢杆菌中调控外源基因的表达。当以绿色荧光蛋白基因为目的基因时，可以使荧光强度提高7.23倍；当以普鲁兰酶基因为目的基因时，加入4mM茶碱溶液，可以使普鲁兰酶的酶活从0.30886U/mL提高到6.07431U/mL。该过程中不需要其他蛋白因子的参与，能够有效快速地实现基因调控。
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公开(公告)号：CN109536429A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811523470.0
申请日：2018-12-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产L-天冬氨酸-β-脱羧酶的基因工程菌及其应用，属于生物工程领域。本发明通过构建重组大肠杆菌，获得具有高酶活的L-天冬氨酸β-脱羧酶菌株，将重组菌株摇瓶发酵，以L-Asp-Na作为底物，进行全细胞催化反应制备L-丙氨酸。此法与化学生产法相比，生产工艺安全清洁，无环境污染，催化效率高，终产物L-丙氨酸产率96％以上，简化产物的分离纯化步骤。
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公开(公告)号：CN107955814A
公开(公告)日：2018-04-24
申请号：CN201711376849.9
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高蛋白表达效率的启动子，属于启动子工程领域。本发明所述方法中涉及的启动子PBH4是在启动子PsrfA的基础上对其核心区进行突变改造而形成的。在新启动子PBH4控制转录下，表达绿色荧光蛋白(GFP)时，使用PBH4的表达量是使用PsrfA的3.5倍，表达葡糖醛酸酶A(GusA)时，使用PBH4使酶活从0.6U/ml提高至8.9±0.1U/ml。
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公开(公告)号：CN107937374A
公开(公告)日：2018-04-20
申请号：CN201711376822.X
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的纳豆激酶，属于蛋白质工程。本发明得到的纳豆激酶Q59E-N218D和N218D，热稳定性相较于原酶有了大幅度提高。本发明提供的纳豆激酶Q59E-N218D和N218D将在一定程度上更好的应对工艺中高温加热环节，并可以延长在机体内的作用时间，提高了纳豆激酶作为治疗心脑血管疾病口服药物的应用价值。
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