修饰基因组的组合物和方法
    21.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118497198A

    公开(公告)日:2024-08-16

    申请号:CN202410204271.2

    申请日:2018-08-08

    摘要: 提供了用于修饰基因组DNA序列的组合物和方法。该方法在基因组DNA序列中的预定靶位点生成双链断裂(DSB),在基因组中的靶位点导致DNA序列的突变、插入和/或缺失。组合物包括DNA构建体,其包括编码Csm1蛋白的核苷酸序列,其操作性连接至在感兴趣细胞中可操作的启动子。DNA构建体可以用于指导在预定基因组基因座的基因组DNA修饰。本文描述了使用这些DNA构建体来修饰基因组DNA序列的方法。此外,提供了用于调节基因表达的组合物和方法。组合物包括DNA构建体,其包括在感兴趣细胞中操作性的启动子,其操作性地连接至编码消除了生成DSB能力的突变型Cms1蛋白的核苷酸序列,任选地连接至调节转录活性的结构域。该方法可以用于上调或下调预定基因组基因座处的基因表达。

    一种基于断裂内含子的RNA反式剪接系统及应用

    公开(公告)号:CN118460580A

    公开(公告)日:2024-08-09

    申请号:CN202410583420.0

    申请日:2024-05-11

    申请人: 浙江大学

    发明人: 王宝俊 高元力

    IPC分类号: C12N15/63 C12N15/113 C12N9/22

    摘要: 本发明公开了一种基于断裂内含子的RNA反式剪接系统及应用,属于生物技术领域。所述系统包括编码前体RNA分子的5'RNA构建体和3'RNA构建体,5'RNA构建体表达的5'RNA包括5'外显子、5'内含子和5'EGS,3'RNA构建体表达的3'RNA包括3'EGS、IGS、3'内含子和3'外显子;5'EGS和3'EGS互补使得5'内含子和3'内含子组装形成完整内含子,触发剪接反应,形成包含完整外显子的成熟mRNA。本发明提供的RNA反式剪接系统通过向断裂的内含子上融合EGS序列,大幅提高了RNA反式剪接效率,该反式剪接系统可以应用到基因调控研究、RNA传感器以及生物计算的构建。

    一种人FASN基因高表达的前列腺癌细胞模型的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN118421713A

    公开(公告)日:2024-08-02

    申请号:CN202410617933.9

    申请日:2024-05-17

    申请人: 云南大学

    摘要: 本发明涉及一种人FASN基因高表达的前列腺癌细胞模型的制备方法及应用,所述制备方法包括对人前列腺癌细胞系22RV1进行编辑,对FASN基因的dPAS序列进行突变,将其由活性的ATTAAA突变为失活的CCTAAA,编辑后的细胞记为22RV1‑FS。本发明通过使用CRISPR/Cas9的编辑方法,特异性敲除FASN基因长转录本的poly(A)信号位点,使FASN基因只产生短的转录本。令人惊喜的是只产生FASN基因短转录本的前列腺癌细胞22RV1‑FS,相比未编辑的22RV1细胞具有更高的FASN的mRNA水平和蛋白质表达,FASN高表达的前列腺癌细胞模型22RV1‑FS被成功制备。