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公开(公告)号：CN106345220A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201510410459.3
申请日：2015-07-13
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明涉及一种溴化乙锭吸附装置，其目的在于提供一种能够吸附核酸凝胶电泳过程中的溴化乙锭的装置，减少或杜绝EB污染实验室空气的同时，且能提高琼脂糖凝胶的利用率，保证试验的均一性，有利于推动生物学和医学，药物设计等领域的发展，为实验人员安全操作提供保障；本发明所述吸附装置包括冷凝盒和吸附盒，所述冷凝盒上下开口，所述吸附盒底部开口，顶部设有顶盖，所述吸附盒底部与所述冷凝盒顶部接通，所述冷凝盒包括冷凝层，所述冷凝层一侧设有进水孔，另一侧设有出水孔，所述冷凝层上设有贯穿上下面的通气孔；所述吸附盒包括吸附层，所述吸附层内放置有透气膜包裹的活性炭，所述吸附层设有与所述冷凝层通气孔相通的透孔。
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公开(公告)号：CN106148568A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201610536974.0
申请日：2016-07-08
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 内蒙古河套农牧业技术研究院
摘要： 本发明公开了一种免疫磁珠试剂盒及其在检测小反刍兽疫病毒抗原中的用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV N蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN105821480A
公开(公告)日：2016-08-03
申请号：CN201610288469.9
申请日：2016-05-03
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种抗羊口疮病毒的双峰驼VHH重链单域抗体cDNA文库及其制备方法。其文库包含羊口疮疫苗免疫骆驼的抗原剂量、免疫程序和血清抗体效价，制备文库包括以下步骤：骆驼外周血淋巴细胞分离、总RNA提取及mRNA分离、纯化；CDSⅢ和SMART引物逆转录合成全长cDNA，设计两套扩增引物，采用同源重组的方法将扩增产物与pGADT7共转染酵母细胞Y187；构建骆驼抗羊口疮病毒的VHH基因cDNA文库；计算文库库容量；扩增cDNA文库进行质量评价。本发明针对羊口疮病毒构建的cDNA文库是一种具备病毒特异性、生物学活性好、结合抗原能力强、具有潜在中和功能的抗体文库，尤其是单域抗体之类的新型抗体，对于建立羊口疮病毒的临床诊断方法，研究病毒的感染机理具有极其重要的作用。
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公开(公告)号：CN105603057A
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201510724479.8
申请日：2015-10-30
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 内蒙古河套农牧业技术研究院
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2561/101 , C12Q2545/114 , C12Q2531/113
摘要： 一种用于检测绵羊肺腺瘤病毒的Taqman Real-time RT-PCR试剂盒，所述试剂盒包含One Step RT-PCR buffer、酶混合物、阳性对照、无RNA酶水、序列SEQ ID NO:1和 SEQ ID NO:2的引物及SEQ ID NO:3的探针引物的混合物，所述检测方法包括使用所述试剂盒进行RT-PCR扩增的步骤及评定标准。所述方法能快速、敏感、准确以及低成本地对绵羊肺腺瘤病毒进行检测及定量分析。本发明设计了特异性针对绵羊肺腺瘤病毒的引物及探针，优化并组装成试剂盒。与普通RT-PCR方法相比，本发明省时、省力，成本较低。
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公开(公告)号：CN105274254A
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201510719383.2
申请日：2015-10-30
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
摘要： 一种用于检测PRRSV缺失变异株的Taqman Real-time RT-PCR试剂盒及其使用方法，所述试剂盒包含One Step RT-PCR buffer 、酶混合物、阳性对照、无RNA酶水、序列SEQ ID NO:1和 SEQ ID NO:2的引物及SEQ ID NO:3的探针引物的混合物，所述检测方法包括使用所述试剂盒进行RT-PCR扩增的步骤及评定标准。本发明弥补了PRRSV缺失变异株检测上的薄弱环节，与普通RT-PCR方法相比，本发明省时、省力，成本较低，并且比普通PCR的灵敏度高，能快速、敏感、准确以及低成本地对猪繁殖与呼吸综合征缺失变异株病毒进行检测及定量分析。
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公开(公告)号：CN104017776A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410160855.0
申请日：2014-04-21
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/275 , A61K47/46 , A61P31/20
摘要： 本发明公开了一种羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗及其制备方法和应用，在本发明的一种羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗中，其有效成分为经本发明发明人自行分离且经传代致弱培养后获得的羊传染性脓疱病毒细胞传代致弱毒，其保藏编号为CCTCC NO：V201406。攻毒保护试验结果显示，本发明所制备的ORFV细胞弱毒疫苗安全，且能够产生有效的免疫保护力。因此，本发明对于研制安全高效的弱毒疫苗以及用本发明公开的弱毒株规模化生产羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗来防控羊传染性脓疱病具有重要的现实意义。
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公开(公告)号：CN102660545A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210180401.0
申请日：2012-06-04
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/867 , C12N7/04 , C12N5/07 , C12N15/10
摘要： 一种用于抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的RNAi及其制备方法，所述包含siRNA序列、shRNA慢病毒表达载体构建、复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染Marc-145细胞（绿猴肾细胞）以及抑制PRRSV复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制PRRSV在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪繁殖与呼吸综合征病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
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公开(公告)号：CN114924069A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210524481.0
申请日：2022-05-13
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543 , C12Q1/6804 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑2免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑2通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑2免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑2蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠，免疫磁珠富集山羊痘病毒后，无需提取基因组RNA，可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久，不容易在病毒复制高峰期发现，采集病料病毒含量低微，所以检出率低，容易漏检等现象；以及提取基因组DNA时费时、费财、费力，操作时污染环境等一系列难题，而且高效、灵敏、特异、稳定、实用，本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号：CN113215084A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110656119.4
申请日：2021-06-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种羊胎儿皮肤成纤维细胞、其分离方法与应用，其中，所述成纤维细胞的保藏号为CCTCC No：C2019202。本发明在羊胎儿皮肤成纤维细胞SFSFS的分离过程中分别采用含0.05%胰蛋白酶和0.02%EDTA的消化液以及Ⅳ型胶原酶处理羊胎儿皮肤组织，然后用含0.01‑0.05%胰蛋白酶‑EDTA消化液处理细胞；并采用3%胎牛血清+10‑40ng/ml的h‑EGF替代10%的胎牛血清培养羊胎儿皮肤成纤维细胞，使胎牛血清使用量大大减少，降低了SFSFS培养成本和羊口疮病毒生产成本，节约了资源。本发明的细胞株能够明显提高羊口疮病毒的分离率、缩短分离时间，且分离的羊口疮病毒毒价和病毒拷贝数也更高，可以为羊口疮病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号：CN106148568B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201610536974.0
申请日：2016-07-08
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 内蒙古河套农牧业技术研究院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6804 , G01N33/569 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种免疫磁珠试剂盒及其在检测小反刍兽疫病毒抗原中的用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV N蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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