猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN107557497A

    公开(公告)日:2018-01-09

    申请号:CN201710984675.8

    申请日:2017-10-20

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/68 C12N15/11

    CPC分类号: Y02A50/451

    摘要: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR试剂盒及检测方法,试剂盒包括特异性引物和探针,引物序列如下:上游引物:5'-ACGTCGTAAGACCCAGCATC-3';下游引物:5'-CCCACCTGAAAGTTGCTCTC-3';探针的序列为:5'-FAM-GTATGGCTGATCCTCGCATCATGGC-BHQ1-3';扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段648bp,本发明建立的TaqMan实时荧光定量PCR对PDCoV的最低检测限度为26.6copies/μL,而对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及口蹄疫病毒的检测结果均为阴性;本发明检测PDCoV的TaqMan探针实时荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、批间和批内重复性好。利用本发明对194份临床猪粪便样品进行检测,结果显示PDCoV阳性率为22.1%,高出常规RT-PCR对该临床猪粪便样品检测的阳性率11.9%近1倍。

    对口蹄疫病毒有抑制作用的干扰靶序列

    公开(公告)号:CN104774856B

    公开(公告)日:2017-12-08

    申请号:CN201510196711.5

    申请日:2011-04-25

    摘要: 本发明公开一段对口蹄疫病毒有抑制作用的干扰靶序列。本发明的对口蹄疫病毒有抑制作用的干扰靶序列是位于奶牛功能基因ENTPDase6 mRNA上的RNA干扰靶序列,其序列为序列表中的SEQ ID No.1所示的核苷酸序列、SEQ ID No.2所示的核苷酸序列和SEQ ID No.3所示的核苷酸序列所示的核苷酸序列。由上述的序列可分别确定出发夹状DNA互补序列,利用合适的基因载体将该DNA序列转染至牛细胞后可以转录成发夹状双链RNA,能够与奶牛功能基因ENTPDase6中的SEQ ID No.1片段特异性结合,从而抑制ENTPDase6的正常表达,使其表达产物量降低,进而抑制口蹄疫病毒的复制。

    对口蹄疫病毒有抑制作用的干扰靶序列

    公开(公告)号:CN104774856A

    公开(公告)日:2015-07-15

    申请号:CN201510196711.5

    申请日:2011-04-25

    摘要: 本发明公开一段对口蹄疫病毒有抑制作用的干扰靶序列。本发明的对口蹄疫病毒有抑制作用的干扰靶序列是位于奶牛功能基因ENTPDase6 mRNA上的RNA干扰靶序列,其序列为序列表中的SEQ ID No.1所示的核苷酸序列、SEQ ID No.2所示的核苷酸序列和SEQ ID No.3所示的核苷酸序列所示的核苷酸序列。由上述的序列可分别确定出发夹状DNA互补序列,利用合适的基因载体将该DNA序列转染至牛细胞后可以转录成发夹状双链RNA,能够与奶牛功能基因ENTPDase6中的SEQ ID No.1片段特异性结合,从而抑制ENTPDase6的正常表达,使其表达产物量降低,进而抑制口蹄疫病毒的复制。

    口蹄疫O、A、Asia-1型三价灭活疫苗

    公开(公告)号:CN101130075A

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:CN200710018543.6

    申请日:2007-07-23

    摘要: 一种口蹄疫O、A、Asia-1型三价灭活疫苗,由O型口蹄疫病毒抗原、A型口蹄疫病毒抗原、Asia-1型口蹄疫病毒抗原和佐剂按抗原∶佐剂=1∶1比例,其中抗原配比:45%的已灭活并经3倍浓缩的O型病毒抗原O/china/99、20%的A型病毒抗原AF/72和35%的Asia-1型病毒抗原Asia-1/XJ/KLAMY/04混合而成;经:毒种、制苗材料的制备、病毒的增殖、病毒灭活的程序、菌检、浓缩、疫苗配制和疫苗检验步骤制备而成。本发明一次接种可同时预防O、A、Asia-1型三个血清型的口蹄疫,具有现用疫苗无法达到的便捷性和实用性,可降低用于防疫的人力、物力和财力,具有广阔的应用前景。