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公开(公告)号：CN108059685B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN201810074694.1
申请日：2018-01-25
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/42 , C12N15/62 , A61K39/135 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种猪口蹄疫病毒A型Fc多肽疫苗及其制备方法和应用。本发明以猪IgG的Fc为骨架，结合我国猪A型口蹄疫流行现状和防控需求，利用反向疫苗学、生物信息学和生物化学结等多种技术筛选、设计猪口蹄疫A型不同拓扑型毒株的表位抗原基因，利用免疫球蛋白Fc基因功能区展示抗原表位，研制得到了适合我国流行现状和防控需求的猪口蹄疫A型Fc多肽疫苗。并通过筛选原核表达系统，优化表达条件，实现了融合蛋白的可溶性表达，最大程度展示了抗原表位。实验证明，本发明的一种猪口蹄疫A型Fc多肽疫苗具有更强的免疫功效，经过加强免疫后能够诱导机体产生更高的的保护性抗体；免疫动物抗体水平差异较小，免疫猪经强毒攻击后，100％获得保护。
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公开(公告)号：CN109232720B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201811068030.0
申请日：2018-09-13
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种口蹄疫O型病毒sIgA抗体的ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括口蹄疫O型病毒广谱多表位重组抗原包被的酶标反应板，100×浓缩酶标抗体、酶标抗体稀释液、样品稀释液、浓缩洗涤液、显色液、终止液、阳性对照样品和阴性对照样品。所述的口蹄疫O型病毒广谱多表位重组抗原由中国型(Cathay)、泛亚型(PanAsia)、缅甸98三个谱系口蹄疫O型病毒代表毒株的主要中和性抗原表位组成，因此提高了试剂盒检测的灵敏性和特异性，并且适用于不同的口蹄疫O型病毒感染的检测。本发明提供的试剂盒适于检测猪、牛、羊三种易感动物黏膜分泌物中的sIgA抗体，对于防治口蹄疫O型病毒的传播和感染具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN113564276A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110550305.X
申请日：2021-05-19
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了FMDV可视化RT‑LAMP检测方法的建立。以合成的39条3D‑T7序列的体外RNA转录本为模板，对RT‑LAMP引物、引物浓度、反应时间、反应温度和显色剂等进行了筛选。建立了FMDV的RT‑LAMP检测方法，总体系为20μL，包括RT‑LAMP缓冲液15.2μL，BstAMV酶混合液1.5μL，外引物F3和B3各0.04μL(100μM)，内引物FIP和BIP各0.5μL(100μM)，环引物Floop和Bloop各0.11μL(100μM)，中性红1μL(500μM)，模板1μL。反应时间55min，反应温度65℃。反应结束后，若反应管溶液变为粉红色判为阳性，若为橘黄色则判为阴性。该方法特异性强，不与BVDV、ORFV、SPPV/GTPV、SVDV、BTV、PRRSV、CSFV、PRV、PPV和PCV等病毒发生反应。建立的FMDV可视化RT‑LAMP方法为基层现场检测奠定了基础，以达到快速诊断FMDV的目的。
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公开(公告)号：CN108330134B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201810074696.0
申请日：2018-01-25
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗及其制备方法和应用。所述的猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗中含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经原核表达系统表达得到的可溶性猪口蹄疫病毒O型Fc多肽。本发明通过对已经公开的编码猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原的核苷酸序列进行了密码子优化，然后通过重新构建重组质粒、优化诱导及培养条件，实现了靶标蛋白的可溶性表达及纯化。可溶性蛋白最大程度模拟了天然抗原的特性，免疫原性更强，抗体水平更高。此外，本发明制备得到的疫苗成份更为简单，不含3D蛋白成份，降低了疫苗总蛋白含量，在提高免疫效力的同时降低了疫苗成本。本发明的提出对我国猪O型口蹄疫防控提供了物质储备和技术支撑，具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN110564765B
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN201910886881.4
申请日：2019-09-19
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明提供了一种表达eGFP的同源重组载体，属于基因组编辑技术领域，所述表达eGFP的同源重组载体包括载体骨架和插入片段，所述插入片段包括左同源臂、CMV启动子、eGFP表达框和右同源臂；所述左同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述右同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明中所述同源重组载体与CRISPR/Cas9打靶载体共转染非洲绿猴胚胎肾上皮细胞后，通过G418筛选，得到定点整合eGFP并稳定表达eGFP的非洲绿猴胚胎肾上皮细胞。本发明所述的细胞构建方法支持外源基因的定点整合和稳定表达。
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公开(公告)号：CN109893529B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910178189.6
申请日：2019-03-08
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： A61K31/506 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及PF‑4708671在制备预防口蹄疫病毒感染的药物中的应用，属于兽用药物技术领域。本发明所述应用能够为进一步控制口蹄疫的传播提供一类高效、安全且质量可控的抗口蹄疫病毒药物。
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公开(公告)号：CN109679927B
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN201910137696.5
申请日：2019-02-25
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了猪塞内加谷病毒A/ZJ/2015、猪塞内加谷病毒灭活疫苗的制备方法、猪塞内加谷病毒灭活疫苗和应用，属于兽医生物制品技术领域，所述猪塞内加谷病毒的拉丁文为Seneca Valley，保藏编号为CGMCC No.15034。本发明将所述猪塞内加谷病毒经过培养后制备成灭活疫苗用于预防猪塞内加谷病毒病，对1月龄的健康易感猪具有良好的免疫原性，接种后的保护率在90％以上。
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公开(公告)号：CN109758456B
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN201910175549.7
申请日：2019-03-08
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： A61K31/4155 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及吡唑呋喃菌素在制备预防口蹄疫病毒感染的药物中的应用，属于兽用药物技术领域。本发明所述应用能够为进一步控制口蹄疫的传播提供一类高效、安全且质量可控的抗口蹄疫病毒药物。
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公开(公告)号：CN112415207A
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN202011163418.6
申请日：2020-10-27
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
摘要： 本发明提供了一种基于抗猪流行性腹泻病毒变异毒株重组S2蛋白的IgA抗体ELISA检测试剂盒，属于畜牧检测技术领域。本发明的ELISA检测试剂盒是以流行的PEDV变异毒株(基因型GⅡb)为亲本毒株，在体外成功的表达了其完整的S2蛋白，然后将完整S2蛋白为抗原包被至酶标板。所述试剂盒能有效同时检测血清和猪口腔粘液类型样本。采用本发明提供的试剂盒成功建立了一种敏感性强、特异性高、稳定性、重复性好且易于制备的PEDV特异性IgA抗体的ELISA检测方法，该方法对PEDV的临床诊断及防控具有重要临床实践意义。
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