-
公开(公告)号：CN112501193A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011446330.5
申请日：2020-12-09
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/65 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12N1/21 , C12Q1/02 , C12Q1/34 , C12Q1/527 , C12Q1/6897 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种烟酸及烟酰胺生物传感系统，属于基因工程技术领域。本发明将枯草芽孢杆菌转录阻遏蛋白NadR及其靶标启动子异源构建到大肠杆菌。通过对NadR进行基于易错PCR的定向进化筛选，得到响应合适浓度烟酸的NadR突变体L171F，并利用该突变体构建在所需浓度范围内高灵敏响应烟酸的生物传感系统，可使生物传感系统在0‑50mM范围内高灵敏响应烟酸浓度。进一步通过在该系统中过表达能将烟酰胺转化为烟酸的烟酰胺酶PncA，使得该系统可以间接感受烟酰胺浓度。
-
公开(公告)号：CN110938616B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201911050011.X
申请日：2019-10-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种温泉热碱芽孢杆菌来源的腈水合酶的突变体，属于酶工程技术领域。本发明提供的腈水合酶突变体Cal.t Nhase‑A20V在70℃的半衰期大约是10min，相比野生酶热稳定性并未有太大变化，突变体Cal.t Nhase‑A20V的比酶活是野生酶的128％。同时该突变体也具备了更好的底物耐受性和产物耐受性，全细胞催化生成烟酰胺最终产量达到598g/L；因此，本发明提供的腈水合酶突变体Cal.t Nhase‑A20V，具有很好的酶学性质，有利于以后的工业生产。
-
公开(公告)号：CN119391679A
公开(公告)日：2025-02-07
申请号：CN202411616294.0
申请日：2024-11-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种活性和热稳定性提高的腈水合酶及其应用，属于生物工程技术领域。本发明针对腈水合酶二聚体界面、四聚体界面以及亚基内的氨基酸共进化对进行计算设计，构建突变，并进行筛选，最终获得活性和热稳定性提升的腈水合酶突变体。本发明构建的突变体的热稳定性显著提升，65℃下半衰期从野生型的21min提高至210min。
-
公开(公告)号：CN117660421A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311564155.3
申请日：2023-11-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了共进化位点改造提高热稳定性和活性的纳豆激酶突变体，属于蛋白质工程技术领域。本发明筛选得到4个活性或稳定性提升的双点突变体，且这四个突变位于2个共进化残基对上。对双点突变进行组合，获得稳定性和活性进一步提升的三个四点组合突变。其中，M5的比酶活为17.9U/mg；其热稳定性大幅提高，55℃下半衰期是野生型的3.5倍，达到718分钟。将M5与之前获得的高性能突变体M4进一步组合，获得突变体M6，其活性和热稳定性得到进一步提升，以为底物时，比酶活达到33.8U/mg，Tm达到73.4±0.5℃，55℃下半衰期达到6348min。
-
公开(公告)号：CN117448303A
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311326116.X
申请日：2023-10-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种嗜热II型普鲁兰酶的分子改造及其在淀粉制糖中的应用，属于基因工程技术及制糖工业领域。本发明对超嗜热古菌(Pyrococcusyayanosii)CH1来源的II型普鲁兰酶进行突变得到突变体W30L/H400I/S552A。该突变体的比活和催化效率与野生型相比，分别提高了3.2倍和5倍。利用该酶突变体生产低聚麦芽糖的反应显示，酶突变体低聚麦芽糖的转化率达到96.1％，比野生型提高了5.4％。此外，将酶突变体用于葡萄糖生产时，该酶突变体的葡萄糖产量分别比野生型和传统方法提高25.4％和43.5％。表明了该酶的突变体在淀粉糖工业中应用中存在巨大潜力。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114277045B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202111466694.4
申请日：2021-12-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酰胺化合物生物传感器的构建及其应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一段AmiC‑AmiR突变体的氨基酸基序在检测酰胺类化合物中的应用。本发明通过对RBS进行优化、并将AmiC第83位取代为组氨酸，从而实现了此传感器对于酰胺类物质的响应，并且能检测到摩尔级别的含量，响应范围在0～10mM之间。从而具备良好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN114317502B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202111478383.X
申请日：2021-12-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高活性和高热稳定性的纳豆激酶突变体，属于蛋白质工程领域。本发明筛选得到三种纳豆激酶突变体，分别是突变体M2(S62AN181DY217KN218SN259P)，突变体M3(P57CA92C)以及突变体M4(S62AP57CA92CN181DY217KN218SN259P)。其中突变体M4在55℃与65℃下半衰期分别较野生型提升了20.7倍与12.9倍，这是目前已有的报道中关于纳豆激酶热稳定性最优的突变体，同时比酶活也较野生型提升了2.1倍。本发明实现了在提升纳豆激酶热稳定性的同时保持其催化活性，以突破“稳定性活性的权衡”，为纳豆激酶工业化应用奠定了基础。
-
公开(公告)号：CN112553236B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202011449745.8
申请日：2020-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于异源群体感应的高效表达系统，属于基因工程技术领域。本发明通过将金黄色葡萄球菌的agr群体感应系统中的agrA、agrB、agrC和agrD基因异源构建至枯草芽孢杆菌168基因组，将P3启动子克隆至穿梭载体，进而构建相配套的宿主和表达质粒。使用绿色荧光蛋白sfGFP作为报告基因，证明该系统可以高效表达外源蛋白，且不需要额外添加诱导剂。分别对P3启动子在RepA、RepB和RepF复制类型质粒上的蛋白表达水平进行检测，表明其与强组成型启动子P43和PylbP相比，在RepA和RepF复制类型质粒上具有超高的活性。
-
公开(公告)号：CN112553235B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202011449022.8
申请日：2020-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种甘油诱导表达系统及在纳豆激酶生产中的应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明通过将PglpD与抗终止子GlpP共同构建至枯草芽孢杆菌高拷贝质粒上，使菌体的生长和蛋白的表达分开。在发酵初期，使菌体充分利用葡萄糖等优先利用的碳源完成生长和高效积累生物量的过程；直至葡萄糖耗尽，甘油自动诱导开始之后，蛋白得到高效表达。本发明用绿色荧光蛋白和纳豆激酶验证该表达系统的调控性能，该表达系统可广泛应用于对宿主菌压力较大的蛋白和代谢产物的生产上。
-
公开(公告)号：CN114317502A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111478383.X
申请日：2021-12-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高活性和高热稳定性的纳豆激酶突变体，属于蛋白质工程领域。本发明筛选得到三种纳豆激酶突变体，分别是突变体M2(S62AN181DY217KN218SN259P)，突变体M3(P57CA92C)以及突变体M4(S62AP57CA92CN181DY217KN218SN259P)。其中突变体M4在55℃与65℃下半衰期分别较野生型提升了20.7倍与12.9倍，这是目前已有的报道中关于纳豆激酶热稳定性最优的突变体，同时比酶活也较野生型提升了2.1倍。本发明实现了在提升纳豆激酶热稳定性的同时保持其催化活性，以突破“稳定性活性的权衡”，为纳豆激酶工业化应用奠定了基础。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
60
records
(took 0.02 seconds)
